2013 Fiscal Year Research-status Report
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25460084
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Research Institution | National Institute of Health Sciences |
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Principal Investigator |
内藤 幹彦 国立医薬品食品衛生研究所, 機能生化学部, 部長 (00198011)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 細胞分裂 / サイクリン / ユビキチン |
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| Research Abstract |
ApollonによるMitosis制御機構を明らかにするために、Apollonと結合するMitosis制御因子CyclinAの局在を調べた。間期においてCyclinAは主に核内に、Apollonは主に細胞質に局在しており、両者は細胞内で相互作用しにくい状況にあると考えられたが、核膜の消失したM期においてはApollonとCyclinAは細胞全体に共局在していた。このM期においてApollonとCyclinAの相互作用をin situ proximity assayで検討した結果、M期においてのみ強いシグナルが得られ、これらのタンパク質が結合している事を示す結果となった。
次にM期におけるCyclinAの蓄積量に及ぼすApollonの影響を調べた。Apollon遺伝子破壊MEF、及び野生型MEFをNocodazoleで分裂中期に停止させ、抗CyclinA抗体で免疫染色する事によりCyclinAの蓄積量を比較した。その結果、Apollon遺伝子破壊MEFでは野生型に比べCyclinA蓄積量の増加した細胞が多数観察された。さらにGFP標識CyclinAを細胞に発現させ、細胞内でのCyclinAの分解を生細胞イメージングにより観察した。その結果、Apollonをノックダウンした細胞内ではM期におけるCyclinAの分解とM期の進行が遅延している事等が明らかになった。
これらの結果から、ApollonはM期におけるスピンドルチェックポイント非依存的なCyclinA分解に重要な役割を果たしている事が分かった。これらの研究成果をまとめて論文に発表した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
平成２５年度に計画していた研究は概ね終了し、平成２６年度以後に計画していた研究を一部前倒しで進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成２６年度以後は、Apollon UBC変異マウスの表現型解析、Apollon UBC変異MEFの細胞周期解析などを重点的に行い、Apollonによる細胞周期制御におけるApollon UBCドメインの機能等を明らかにする。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
３月に購入した物品の経理処理が４月以後になってしまったため、３月末時点での次年度使用額が０より大きい数字となった。
平成２６年度も消耗品の購入に多くの研究費を充てる予定。
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[Journal Article] Design and synthesis of tamoxifen derivatives as a selective estrogen receptor down-regulator.2014
Author(s)
Shoda, T., Okuhira, K., Kato, M., Demizu, Y., Inoue, H., Naito, M., and Kurihara, M.
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Journal Title
Bioorg Med Chem Lett
Volume: 24
Pages: 87-89
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Development of hybrid small molecules that induce degradation of estrogen receptor-alpha and necrotic cell death in breast cancer cells.2013
Author(s)
Okuhira, K., Demizu, Y., Hattori, T., Ohoka, N., Shibata, N., Nishimaki-Mogami, T., Okuda, H., Kurihara, M., and Naito, M.
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Journal Title
Cancer Sci
Volume: 104
Pages: 1492-1498
DOI
Peer Reviewed
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