ディスペプシア症状発現における十二指腸上皮細胞間接着装置とIL-33に関する検討

2013 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25460939
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Research Institution: Hyogo Medical University
• Principal Investigator: 大島 忠之 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (00381814)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 福井 広一 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (60378742) ; 三輪 洋人 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80190833)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 機能性ディスペプシア / タイト結合 / クロディン / 細胞間接着装置

Research Abstract

タイト結合は，細胞間のバリア機能や細胞の極性を維持する機能を有しており，極性のある上皮細胞の内腔側細胞表面にある．このタイト結合を担う蛋白には，クロディン（CLDN），オクルディン，JAMがあり，CLDNが最も重要な役割をしていると考えられている．CLDNには少なくとも27のサブタイプが存在し，これらサブタイプは，組織特異的に発現し，臓器によって発現が異なる．
本研究では，内視鏡下生検組織を用いてタイト結合蛋白の発現を蛍光免疫組織染色で確認し，その発現程度をreal-time PCRで定量化した．
十二指腸粘膜上皮にはCLDN1, CLDN2, CLDN3, CLDN4, CLDN7，CLDN8, CLDN-15, CLDN18, JAM-A, Nectin-1, Nectin-3, ZO-1, ZO-3の発現を認め，それぞれの発現は，肉眼的に正常な粘膜においても異なることが明らかとなった．
腹部症状を認めない被検者の十二指腸粘膜と腹部症状を認める被検者の十二指腸粘膜でのタイト結合タンパクの発現を検討すべく症例集積を行い，一部のクロディンの発現量が異なる可能性が示されている．今後さらに症例を集積してデータの信頼性を確認する予定である．

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

内視鏡下生検組織を用いてタイト結合蛋白の発現を検討し，十二指腸粘膜上皮におけるクロディンの発現を明らかとした．機能性ディスペプシアにおいて一部のクロディンの発現量が異なる可能性が示されている．

Strategy for Future Research Activity

各CLDNの発現変化が明らかとなったことによりそれぞれの機能的役割を検討する必要がある．それぞれのクロディンのsiRNAによる発現制御や強制発現細胞株を樹立し，詳細な機能解析を行っていきたい．

Expenditure Plans for the Next FY Research Funding

細胞を用いた検討を行うにあたり，どのタイト結合蛋白に焦点を当てて検討するかに時間を要しており，効率的に研究を行うためにまずは臨床検体での検討を進めたため，細胞研究に必要な費用を次年度に使用する予定とした．
腹部症状を認めない被検者の十二指腸粘膜と腹部症状を認める被検者の十二指腸粘膜でのタイト結合タンパク発現を継続して検討すべく症例集積を行い，発現量が異なるクロディンを明らかとする．さらにin vitroでの検討で各クロディンの十二指腸粘膜での機能解析を行う．