膵癌新規治療法の開発へ向けた細胞膜透過性ペプチドの応用

2015 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 25461969
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 中村 透 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (70645796)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 平野 聡 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (50322813) ; 土川 貴裕 北海道大学, 大学病院, 講師 (50507572) ; 田中 栄一 北海道大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員研究員 (60374279)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 膵癌新規分子標的治療 / 細胞膜透過性ペプチド治療

Outline of Annual Research Achievements

・教室で切除した膵癌臨床検体におけるCBPCI発現状況ならびに予後との相関から、CBPCIは膵癌症例の56.8%で高発現し、またCBPCI高発現は術後全生存期間と強い相関があり、低発現と比較し予後不良であった。多変量解析では、リンパ節転移陽性とCBPCI高発現の2因子が独立した予後規定因子であることが判明した。CBPCIは膵癌の悪性度に関わる分子であり、これを標的とした治療が、予後改善につながる可能性が示された。
・CBPCIとPPP3CAの結合が膵癌の増殖浸潤に関わることが判明しており、この結合を阻害する細胞膜透過性ペプチドは、ヒト膵癌細胞株を用いた細胞実験で増殖抑制効果がみられ、正常繊維芽細胞には阻害効果がないことを確認した。またCapan1による膵癌同所移植モデルマウスを用いた細胞膜透過性ペプチド治療実験を施行し、in vivoにおいても、コントロールペプチド群と比較し細胞膜透過性ペプチド治療群では腫瘍径および腫瘍量の縮小効果が確認された。治療後に採取した腫瘍の免疫染色による検討から、細胞膜透過性ペプチド治療群ではKi67-indexが低下し細胞増殖が抑制されていたが、Apoptosisは誘導されなかった。また治療群の腫瘍はmTORのリン酸化が抑制され、さらにE-cadherin発現上昇を認めることを見出した。
・CBPCIとPPP3CAとの結合を阻害する細胞膜透過性ペプチド配列は免疫抑制効果が予想されたため、マウス末梢血における免疫抑制効果を検討した。結果、IL-2およびIFN-γの発現低下は通常の免疫抑制剤と比較し軽度であることが示された。
・さらにCBPCIの浸潤増殖機能解析のため、インテグリンβ3との結合を確認し、膵癌細胞骨格に影響を与えていることを免疫染色ならびに免疫沈降を用いた解析で確認した。

Remarks

論文投稿中