2014 Fiscal Year Research-status Report
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25462756
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
林 康人 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (70314953)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大橋 裕一 愛媛大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00116005)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | ケラトサイト / バイオイメージング / 幹細胞 / 再生医療 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Keratocan-IRES2-nls-Cre とKeratocan-IRES2-CreERT2ノックインマウスの作製のため、
作製されたそれぞれ2種類のES細胞由来のクローンKeratocan-IRES2-nls-Cre＃１６，Keratocan-IRES2-nls-Cre＃１００、Keratocan-IRES2-CreERT2＃１、Keratocan-IRES2-CreERT2＃１６０キメラマウスをC57BL/6Nと交配して、germline transmissionを確認した。Keratocan-IRES2-CreERT2＃１は7匹のキメラで交配を試みたが、妊娠が確認出来ず、精子を採取して、人工授精を行ったが、卵割が確認できず、F1の作製は断念した。Keratocan-IRES2-CreERT2＃１６０キメラマウスより得たF1雄とROSA26mT/mGによる交配により得られた、Keratocan-IRES2-CreERT2 /ROSA26mT/mGでは1%tamoxifen入り Ofloxacin軟膏を塗布による遺伝子組換えは確認できず、従来どおりに、コーン油に溶解した1%tamoxifenではケラトサイトにおいて遺伝子の組換えを確認出来た。Keratocan-IRES2-CreERT2 /ROSA26mT/mG雄は1%tamoxifenにおいてもすでに、CreによりROSA26mT/mGが組み変わっており、内在性の性ホルモンの影響を考えて、生後4週令で精巣の摘出を行い、1%tamoxifen投与前の遺伝子の組換えを抑制できることを確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Keratocan-IRES2-CreERT2の作製は、予定より早期に実現した。内在性の性ホルモンの影響により、遺伝子が組み変わる問題も解決する方法を見いだしており、概ね順調であると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
精巣摘出したKeratocan-IRES2-CreERT2 /ROSA26mT/mG雄のケラトサイト障害モデル（角膜上皮欠損）において、ケラトサイトのバイオイメージングを経時的に行い、ケラトサイトの分裂と移動を確認し、幹細胞の同定につなげる。
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Research Products
(1 results)
