2013 Fiscal Year Research-status Report
腫瘍幹細胞を標的とした難治性小児固形腫瘍に対する治療法の開発
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25462783
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| Research Institution | National Research Institute for Child Health and Development |
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Principal Investigator |
渕本 康史 独立行政法人国立成育医療研究センター, その他部局等, その他 (40219077)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大喜多 肇 独立行政法人国立成育医療研究センター, その他部局等, その他 (50317260)
黒田 達夫 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (60170130)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 小児固形腫瘍 / 肝芽腫 / 腫瘍幹細胞 / 標的治療 / CD13 |
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| Research Abstract |
平成25年度はFACSにて小児固形腫瘍株を用いて、候補腫瘍幹細胞マーカーの表出の確認を行った。具体的には肝芽腫細胞株（HepG2, HuH6）、横紋筋肉腫細胞株（Rh30, KYM-1, RMS-YM, RD）、神経芽腫細胞株（LAN5）、ラブドイド腫瘍株（W4）についてFACSにより候補腫瘍幹細胞マーカー（CD13, CD44, CD44v, CD133）を同定した。腫瘍幹細胞マーカーの表出がみられる株においてはソート分離し免疫不全マウス（SCID-NOD）に移植して造腫瘍能を確認した。
１．現在までの研究実績：CD44では全ての腫瘍株で表出が確認された。しかし、一部の成人癌では腫瘍幹細胞と密接な関係があるとされているCD44vはいずれも小児固形腫瘍細胞株での発現はみられなかった（少なくともFACSにて確認できる限度以下であった）。これに対して、肝芽腫細胞株（HepG2, HuH6）ではCD13の表出がそれぞれ約50%,10%に認められ、現在 HuH6でCD13陽性細胞をSCID-NODマウスに移植してその造腫瘍能をCD13陰性細胞との比較を行っている。また横紋筋肉腫RD株はCD133陽性細胞の比率が高いため、分離・移植の実験を引き続き行ってゆく予定である。
２．考察：今研究では、2種類の肝芽腫細胞株において候補癌幹細胞表面マーカーであるCD13陽性細胞を認め、その高い造腫瘍能や抗癌剤抵抗性が示されればCD13陽性細胞が腫瘍幹細胞の性質をもつことが示される。現在、CD13陽性細胞阻害剤として医薬品のウベニクス（ベスタチン）、が臨床使用可能であるので、肝芽腫においてはCD13を標的とした腫瘍幹細胞に対する治療が可能となるかもしれない。組織幹細胞の一つであるLgr5も注目されるマーカーであるので全ての細胞株での表出を確認していきたい。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
抗体（CD13)のFICH, PEなどによりCD13陽性細胞の％にばらつきがでたため、CD13陽性細胞をソーティングして集めるのに時間がかかってしまったため。
また当初、考えていたCD44v8-10での陽性細胞をFACSでは確認することができなかったために遅れてしまいました。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在のところ肝芽腫にCD13陽性細胞が確認できたので、これからはCD13陽性細胞の肝芽腫治療薬である、CPA,VCR,THP-ADR,CDDPなどの抗癌剤への感受性、ならびに免疫不全マウスへの移植により腫瘍造成能を評価する。更には、CD13阻害剤（Ubenimex)の腫瘍造成能の抑制を評価する。
組織幹細胞の一つであるLgr5も注目されるマーカーであるので全ての細胞株での表出を確認していく。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
研究がやや遅れ気味であったために抗体、免疫不全マウスの発注が計画より遅れました。
平成26年度に研究を進め、使用予定でございます。
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