2013 Fiscal Year Annual Research Report
分子応答性RNAプロセシングシステムの開発と人工シュードリボスイッチへの応用
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25708027
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Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
小川 敦司 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 准教授 (30442940)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | リボスイッチ / プロセシング / tRNA |
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| Research Abstract |
『分子応答性遺伝子発現制御システム』を“自在に”構築できれば、任意の分子の濃度に応じて任意のタンパク質の生産量をコントロールすることができるため、幅広い学問領域において基盤技術となるのは疑う余地がない。我々は、現在までに、原核および真核の翻訳系において数々の当該システムを開発してきたが、国外の研究者が開発したシステムも含めて未だ発展途上にあることは否めず、さらなる改良が望まれている。そこで、本研究では、新しい概念を導入（tRNAプロセシング機構の利用）することによって、既存システムのデメリットを克服した新規システム『シュードリボスイッチ』を開発することを目的としている。
我々の研究室では、真核生物（植物）であるコムギの胚芽抽出液中で非常に効率よく働くamber suppressor tRNAを、人工改良を重ねることによって既に獲得している（サプレッション効率は約85%）。１年目は、このsuppressor tRNAをベースに、『分子応答性3'プロセシングシステム』を開発し、そのまま「trans制御型tRNAシュードリボスイッチ」へと発展させることを目標とした。まず最初の半年間で、当初の計画通り「tRNAのプロセシング機構」を調査し、その結果をもとに、核酸応答性3'プロセシングシステムのプロトタイプを構築した。しかしながら、このシステムをさらに汎用性のある分子応答性プロセシングシステムに応用するためにはRNAの不安定性を克服する必要があっため、残りの半年間で、tRNAのプロセシング機構をより詳細に調査し、小麦胚芽抽出液中でRNAを安定に保持できる骨格を見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
上述したように、研究途中で、小麦胚芽抽出液中でのRNAのプロセシング機構および安定性を精密調査する必要が生じたため、１年目の目標であった「trans制御型tRNAシュードリボスイッチ」の開発に至っていない。しかしながら、その結果、小麦胚芽抽出液中でRNAを安定化できる骨格の発見につながった。
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| Strategy for Future Research Activity |
新たに発見した小麦胚芽抽出液中でのRNAの安定化骨格に関するデータを集め、その情報をもとに、核酸応答性シュードリボスイッチ、さらには汎用性のある分子応答性シュードリボスイッチの開発を行う。
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| Expenditure Plans for the Next FY Research Funding |
次年度以降の研究費が申請額よりも低く、研究遂行が困難となることが予想されるため、助成金の１部を次年度に繰り越した。
次年度以降の物品費やその他の費用として使用する予定である。
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Research Products
(6 results)
