2014 Fiscal Year Research-status Report
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25860105
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
林原 絵美子 国立感染症研究所, その他部局等, 研究員 (20349822)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | Helicobacter cinaedi |
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| Outline of Annual Research Achievements |
H. cinaediの病原性の解析：
H . cinaedi感染による病態を明らかにするため，in vitro感染実験を行った．これまで用いてきたヒト単球系細胞株U937に加え，ヒト腸管上皮細胞株Caco-2およびHT-29を用いた感染実験により，細胞障害性，細胞増殖阻害効果，炎症性サイトカインの誘導，および細胞膜透過性の評価のための条件検討を行った．標準株であるCCUC18818株とCytolethal distending toxin（CDT）ノックアウト株を用いた検討を行い，CDT以外の病原因子の存在を示唆する結果を得た．また日本でアウトブレイクを起こしたH. cinaedi MRY08-1234株について，ゲノムを解析し，比較ゲノム解析等により，病原性に寄与する可能性のある遺伝子を選出した．
H. cinaediの薬剤耐性の解析：
シプロフロキサシン耐性株についてキノロン系抗菌薬の標的部位GyrAおよびGyrBに認められた複数の変異をそれぞれ感受性株に導入することにより耐性に寄与する変異部位を特定した．クラリスロマイシン耐性株については，標的部位である23S rRNAに認められた変異について同様に感受性株に変異を導入し，寄与を確認した．b-lactam耐性については，セフトリアキソン高度耐性株のゲノムを解読し感受性株と比較した．３つのペニシリン結合タンパク質（PBP）にそれぞれ変異が認められたことから，それぞれの遺伝子変異を感受性株に導入し，耐性への寄与の度合いを評価した．今後は蛍光ペニシリンを用いた競合実験による詳細な解析加えて報告する予定である．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
病原性については，ミュータントライブラリー作製するための条件検討に時間がかかっているため，遅れている．薬剤耐性機構に関する研究は各薬剤の耐性に寄与する遺伝子をトランスフォーメーションにより同定できており，おおむね順調に進んでいる．
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| Strategy for Future Research Activity |
病原性については，今後ゲノム解析により選定した遺伝子の候補遺伝子についてノックアウト株の作製し，H. cinaediの感染病態に寄与する因子の特定を行う．また環境変化に伴う遺伝子発現の変化についても検討し，H. cinaedi感染による病態へ寄与する因子を明らかにしていく．
薬剤耐性についてはこれまで得られたデータをまとめて報告することを目標とする．
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| Causes of Carryover |
次年度使用額のうち，約45万円は，年度末納品等にかかる支払いが平成２７年４月１日以降となったため，当該支出分については次年度の実支出額に計上予定である．平成26年度分についてはほぼ使用済みである。残りの使用額については，H25年度に産休・育休を取得し，研究進行が遅れたために生じた金額である．
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
H. cinaediの病原性に関する研究のための経費として，ノックアウト株作製のための培地や試薬類，細胞免疫染色やELISAのための試薬類に使用予定である．さらに関連学会での発表や情報収集，論文作成のための校正料，投稿料等に使用する予定である．
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