口腔癌の癌微小環境における時計遺伝子DECの分子機構

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 25861767
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 古舘 健 弘前大学, 医学部附属病院, 医員 (50638898)
• Project Period (FY): 2013-04-01 – 2016-03-31
• Keywords: 時計遺伝子 / 癌微小環境

Outline of Annual Research Achievements

ヒト歯肉癌細胞と非癌上皮細胞（歯肉線維芽細胞）の相互作用に関与し、かつ時計遺伝子DECが発現抑制の標的とする遺伝子の検討を行う。

ヒト歯肉癌細胞（Ｃａ９－２２）と歯肉線維芽細胞（fibroblasts)の共培養を1週間行い、50%馬血清で2時間刺激後、4時間毎のサンプリング（0～48時間）を行った。

本研究では、DECを中心とした時計遺伝子の発現を解析する予定であったが、共培養におてヒト口腔癌細胞の非癌上皮細胞（正常口腔粘膜上皮細胞）と相互作用に対してDECの効果が予想外に弱かったため、DEC以外の時計遺伝子（Clock、BMAL、Per、Cry）についてもリアルタイムＰＣＲならびにウェスタンブロッティングで検討している。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

共培養を開始してからＲＮＡならびにタンパク質の回収まで、最短で12日を要する。
その後、ＲＮＡとタンパク質の解析となる。当初、DECを中心とした時計遺伝子の発現を解析する予定だったが、共培養におてヒト口腔癌細胞の非癌上皮細胞（正常口腔粘膜上皮細胞）と相互作用に対してDECの効果が予想外に弱かったため、DEC以外の時計遺伝子（Clock、BMAL、Per、Cry）についても解析することとした。実験の途中で検討項目を変更したため、進行がやや遅れてしまった。

Strategy for Future Research Activity

サンプルはすべて回収したため、今後はサンプル解析を行い、これまでの遅れを取り戻す予定である。今後、検討した結果は論文にまとめて今年度中に発表する予定。また研究成果は、国際学会で発表する予定である。