2014 Fiscal Year Research-status Report
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25870328
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
大隈 貞嗣 三重大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (70444429)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | メタボリックシンドローム / インスリン抵抗性 / 肥満 / 脂肪肝 / p38 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、メタボリックシンドロームやこれに続く糖尿病の発症において、慢性炎症の関与が多数報告されている。本研究では、炎症および免疫細胞の動態を制御する主要なシグナル伝達分子p38αの血管血球系特異的ノックアウトマウスおよび炎症性マクロファージ特異的ノックアウトマウスを作製し、代謝への影響を検討した。p38αの血管血球系特異的ノックアウトマウスにおいては、脂肪組織において炎症性マクロファージの浸潤および炎症性サイトカインの分泌が抑制されていることをすでに見いだしていたが、さらにp38α血管血球系KOマウスにおいては高脂肪食による脂肪肝が抑制されていたことから肝における炎症性マクロファージマーカーであるF4/80およびCD11cの発現を検討すると、変異マウスにおいてこれらの発現が顕著に抑制されていた。これらのことからCD11cCREマウスを用いてp38αマクロファージ特異的KOマウスを作製し、高脂肪食負荷モデルを用いて代謝への影響を検討した。その結果p38αマクロファージKOマウスにおいても高脂肪食による肥満、インスリン抵抗性および脂肪肝の抑制が観察された。これらの結果から、高脂肪食による肥満、インスリン抵抗性および脂肪肝にはマクロファージにおけるp38αが必要であることが示された。また老化形質への炎症の関与を検討するために早期老化モデルklothoマウスとこれらの変異マウスの交配を試みた。しかしマウスの遺伝的背景の違いによりklothoマウスの形質が不安定になったため、解析を中断した。現在遺伝的背景が同等であるα-klothoKOマウスを入手して交配実験を再開中である。またp38シグナル抑制効果を持つ化合物の投与による寿命の変化をklothoマウスで検討したところ、bufalinの投与で寿命の延長傾向がみられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
実験に使用するp38遺伝子改変マウスの繁殖に予定以上の期間がかかり、計画の進行がやや遅れている。しかし現在はp38αマクロファージ特異的KOマウスの繁殖も順調であり、順次計画を遂行していく予定である。またklothoマウスとの交配に関しては、p38遺伝子改変マウスのC57BL/6バックグラウンドにおいて老化形質が安定しなくなることが判明し、もともとC57BL/6バックグラウンドで早期老化形質を持つα-klothoマウスを入手し、新たに交配実験を計画している。
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| Strategy for Future Research Activity |
高脂肪食による肥満やインスリン抵抗性および脂肪肝の抑制に関して、p38αマクロファージ特異的KOマウスにおいて血管血球系KOマウスと同様の結果が得られたことから、今後よりポイントを絞った解析が可能なp38αマクロファージ特異的KOマウスを用いて、マクロファージの役割に不明な点の多い肝に注目し、食餌誘導性NASHモデルを中心に解析を進める。p38αマクロファージ特異的KOマウスにおける結果から、肝実質細胞ではなく、Kupffer細胞および浸潤マクロファージがNASHの発症の中心的役割を担い、またそこでp38αの機能が必要であることが示唆されるが、NASH発症過程での具体的なメカニズムは明らかでない。今後はkupffer細胞および浸潤マクロファージでのp38αの役割について、炎症制御、脂質代謝および肝実質細胞や星状細胞との相互作用を中心に解析を行う。また、p38αマクロファージ特異的KOマウスとα-klothoマウスとの交配実験を進め、早期老化形質と炎症性マクロファージとの関連を検討する。さらにp38抑制効果を持つ化合物の寿命への影響を早期老化マウスおよび野生型マウスを用いて、さらに詳細に検討する。
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| Causes of Carryover |
p38α遺伝子改変マウスの繁殖に予想以上に時間がかかり、実験計画にやや遅れが生じている。ただし現在は軌道に乗っており、順次実験を遂行していく予定である。またp38α遺伝子改変マウスとklothoマウスとの交配実験に関しては、遺伝的バックグラウンドの相違により、klothoマウスの早期老化形質が安定しなくなることが明らかになったため、バックグラウンドの同じα-klothoマウスとの交配実験に切り替えることとし、今後遂行予定である。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
遺伝子タイピング用PCR用酵素100,000円、RNA抽出試薬100,000円、cell migration kit 100,000円、α-klothoマウス購入100,000円、NASH誘導用特別餌150,000円、プラスチック器具50,000円として使用予定である。
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Research Products
(2 results)
