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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Development of a high throughput bioassay system for PM2.5 with luminescent cell arrays

Research Project

Project/Area Number 26288088
Research InstitutionNational Institute of Advanced Industrial Science and Technology

Principal Investigator

金 誠培  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 環境管理研究部門, 主任研究員 (60470043)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 中里 哲也  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 環境管理研究部門, 主任研究員 (10357618)
長縄 竜一  国立研究開発法人産業技術総合研究所, 環境管理研究部門, 主任研究員 (40357637)
Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
Keywords生物発光 / 発光プローブ / リガンド / 生理活性評価 / イメージング / 毒性評価 / センシング / 浮遊微粒子状物質
Outline of Annual Research Achievements

浮遊微粒子状物質(PM2.5など)の生物毒性・炎症効果を評価する方法論の開発は喫緊の課題である。我々はこの課題に資する研究として、各臓器由来の細胞株にそれぞれ適した生物毒性・炎症効果の可視化プローブを導入して形質変換し、その細胞株アレイ下でPM2.5の生理活性を高速発光評価するシステムを構築することを目的とする、様々な研究課題を遂行してきた。
このための当該年度の細目課題として、以下の課題を高度化する各研究を行ってきた:①既開発の生物毒性・炎症効果可視化プローブの高輝度・高感度化を行った。具体的には、これらの各可視化プローブに適した発光基質を有機合成することにより、生理活性物質のピンポイント発光イメージング系を開発した。この結果を纏めてScientific Reports (NPG)に発表した。また今まで開発してきたものよりも高輝度の生物毒性可視化プローブの開発を行い、さらに炎症効果可視化プローブや生物毒性可視化プローブ等に関する高度化研究も行い、それぞれの研究概要をMethodsX(Elsevier)に報告した。その他にも②各臓器由来の細胞株に前記プローブを安定発現させ、マイクロ流路上にアレイ化することにより、PM2.5の生物毒性・炎症に応じて発光する細胞株アレイを構築した。また③我々既開発の多チャンネル多ポイント同時計測式光検出機でその発光輝度を高速同時計測し、結果の解析を行った。当該研究成果の全体纏めとして、「Bioluminescence」(New York, Springer;2016.8)という単行本が出版できた。
これらの研究成果を踏まえ、当初の目標以上の研究成果を得たと自評する。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

28年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (20 results)

All 2017 2016

All Journal Article (13 results) (of which Peer Reviewed: 13 results,  Acknowledgement Compliant: 13 results,  Open Access: 2 results) Presentation (4 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results,  Invited: 2 results) Book (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (2 results) (of which Overseas: 1 results)

  • [Journal Article] Luciferase-Specific Coelenterazine Analogues for Optical Contamination-Free Bioassays2017

    • Author(s)
      Ryo Nishihara, Masahiro Abe, Shigeru Nishiyama, Daniel Citterio, Koji Suzuki, Sung Bae Kim
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7 Pages: 1-8

    • DOI

      10.1038/s41598-017-00955-6

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] A Genetically Encoded Molecular Tension Probe for Tracing Protein―Protein Interactions in Mammalian Cells2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Ryo Nishihara, Daniel Citterio, Koji Suzuki
    • Journal Title

      Bioconjugate Chemistry (ACS)

      Volume: 27 Pages: 354-362

    • DOI

      10.1021/acs.bioconjchem.5b00421

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] 非分割型生物発光イメージングプローブの開発と応用 (Splitting-free Bioluminescence Imaging Probes and Their Applications)2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Rika Fujii
    • Journal Title

      Bunseki Kagaku

      Volume: 65 Pages: 361-369

    • DOI

      10.2116/bunsekikagaku.65.361

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Fabrication of Molecular Tension Probes2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Rika Fujii
    • Journal Title

      MethodsX

      Volume: 3 Pages: 261-267

    • DOI

      10.1016/j.mex.2016.03.008

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] A genetically encoded bioluminescent indicator for illuminating proinflammatory cytokines2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Takeaki Ozawa, Yoshio Umezawa
    • Journal Title

      MethodsX

      Volume: 3 Pages: 483-489

    • DOI

      10.1016/j.mex.2016.06.001

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] How to Fabricate Functional Artificial Luciferases for Bioassays2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Rika Fujii
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 43-53

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_4

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Single-chain probes for illuminating androgenicity of chemicals2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Hiroaki Tao
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 143-151

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_11

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Multicolor Imaging of Bifacial Activities of Estrogens2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Yoshio Umezawa
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 153-163

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_12

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Circular Permutation Probes for Illuminating Phosphorylation of Estrogen Receptor2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Hiroaki Tao
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 165-173

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_13

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Fabrication of Molecular Strain Probes for Illuminating Protein-Protein Interactions2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Rika Fujii
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 175-182

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_14

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] An ALuc-Based Molecular Tension Probe for Sensing Intramolecular Protein-Protein Interactions2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Ryo Nishihara, Koji Suzuki
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 183-193

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_15

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] A Multichannel Bioluminescence Determination platform for Bioassays2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Ryuichi Naganawa
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 271-278

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_22

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] A Bioluminescence Assay System for Imaging Metal Cationic Activities in Urban Aerosols2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Ryuichi Naganawa, Shingo Murata, Takayoshi Nakayama, Simon Miller, Toshiya Senda
    • Journal Title

      Method in Molecular Biology

      Volume: 1461 Pages: 279-287

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-3813-1_23

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] ホルモン様化学物質の生理活性評価技術の開発と応用2017

    • Author(s)
      金 誠培
    • Organizer
      InterAqua 2017
    • Place of Presentation
      Tokyo, Japan
    • Year and Date
      2017-02-16 – 2017-02-16
  • [Presentation] Fabrication of artificial luciferases and their applications to molecular imaging2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim
    • Organizer
      Royal Society of Chemistry (RSC) Tokyo International Conference 2016
    • Place of Presentation
      Chiba, Japan
    • Year and Date
      2016-09-08 – 2016-09-09
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Fabrication of Single-Chain Bioluminescent Probes from Artificial Luciferases2016

    • Author(s)
      Sung Bae Kim, Rika Fujii
    • Organizer
      The 19th International Symposium on Bioluminescence and Chemiluminescence (ISBC2016)
    • Place of Presentation
      Tsukuba, Japan
    • Year and Date
      2016-05-29 – 2016-06-02
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Fabrication of Blue-Shifted Coelenterazine Derivatives for Bioluminescent Applications2016

    • Author(s)
      Ryo Nishihara, Takahiro Nakajima, Sung-Bae Kim, Moritoshi Sato, Shigeru Nishiyama, Naoko Iwasawa, Daniel Citterio, Koji Suzuki
    • Organizer
      The 19th International Symposium on Bioluminescence and Chemiluminescence (ISBC2016)
    • Place of Presentation
      Tsukuba, Japan
    • Year and Date
      2016-05-29 – 2016-06-02
    • Int'l Joint Research
  • [Book] Bioluminescence2016

    • Author(s)
      Sung-Bae Kim
    • Total Pages
      XIII, 314
    • Publisher
      Springer-Humana Press
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 新規セレンテラジン化合物及びその用途2017

    • Inventor(s)
      鈴木孝治, チッテリオダニエル, 西原諒, 金 誠培
    • Industrial Property Rights Holder
      鈴木孝治, チッテリオダニエル, 西原諒, 金 誠培
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      特願2017-055985
    • Filing Date
      2017-03-22
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 新規人工生物発光酵素群2016

    • Inventor(s)
      金 誠培
    • Industrial Property Rights Holder
      金 誠培
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      PCT/JP2016/079160
    • Filing Date
      2016-09-30
    • Overseas

URL: 

Published: 2018-01-16  

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