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2016 Fiscal Year Annual Research Report

Study on genomic basis of morphogenesis in hemimetabolous insects using novel genetic modification techniques

Research Project

Project/Area Number 26292176
Research InstitutionThe University of Tokushima

Principal Investigator

三戸 太郎  徳島大学, 大学院生物資源産業学研究部, 准教授 (80322254)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 渡辺 崇人  徳島県立農林水産総合技術支援センター(試験研究部), 資源環境研究課, 研究員 (30709481)
友成 さゆり  徳島大学, 大学院理工学研究部, 技術専門職員 (40448345)
Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
Keywords遺伝子ノックアウト
Outline of Annual Research Achievements

前年度までに確立した遺伝子ノックイン技術を利用した遺伝子ノックアウト系統の樹立や表現型解析をさらに進め,複数の発生関連遺伝子の機能を明らかにした。特に, even-skippedやHox遺伝子の機能を詳細に解析した。コオロギにおいてeven-skippedは,前頭部以外のすべての体節の形成に関与していることを示した。コオロギeven-skipped遺伝子の機能は他の短胚型昆虫で示されている機能と共通する部分があり,ショウジョウバエなどより祖先的な機能を有していると考えられる。また,ゲノム編集で標的とするエクソンによって表現型が異なるケースを見出した。選択的スプライシングが関わっている可能性が考えられ,解析を進めている。複数の転写産物の機能を個別に調べるために,ゲノム編集技術が有効であることが示唆される。abdominal-Aについて,前年度までに見出されていたノックアウト変異体の腹部に形成される付属肢様の構造について,詳しく解析した。付属肢のマーカー遺伝子発現などを調べた結果,脚での発現パターンと対応することが示され,付属肢様構造が脚の原基であることが示唆された。また,付属肢様構造の形成に腹部体節間で違いがあり,後部の数体節でより発達した構造が形成されていることが明らかとなった。他のHox遺伝子との協調作用が腹部体節間で異なっていることを反映していると考えられる。他の昆虫との比較から,abdominal-A遺伝子のコオロギにおける機能はより派生的な種よりも腹部形成への関与の度合いが高い可能性が考えられた。一方,遺伝子ノックイン技術を応用し,遺伝子のプロモーター領域にGFP発現カセットを導入する実験を行った。インジェクション当代でのノックインイベントを検出することができ,内因性のエンハンサーを利用した遺伝子機能解析につながる基礎的な成果を得た。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Causes of Carryover

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Expenditure Plan for Carryover Budget

28年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (10 results)

All 2017 2016

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 2 results,  Open Access: 1 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Invited: 3 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Gene knockout by targeted mutagenesis in a hemimetabolous insect, the two-spotted cricket Gryllus bimaculatus, using TALENs2016

    • Author(s)
      Watanabe T, Noji S and Mito T
    • Journal Title

      Methods in Molecular Biology

      Volume: 1388 Pages: 143-145

    • DOI

      10.1007/978-1-4939-2932-0_12

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] TGF-β signaling in insects regulates metamorphosis via juvenile hormone biosynthesis2016

    • Author(s)
      Ishimaru Y, Tomonari S, Matsuoka Y, Watanabe T, Miyawaki K, Bando T, Tomioka K, Ohuchi H, Noji S, Mito
    • Journal Title

      Proc Nati Acad Sci USA

      Volume: 113 Pages: 5634-5639

    • DOI

      10.1073/pnas.1600612113

    • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] even-skipped is required for segmentation and elongation of embryos in the cricket Gryllus bimaculatus as revealed by CRISPR/Cas9-based gene knock-out2017

    • Author(s)
      Yu-ki Nakamura, Kohei Kawamoto, Sayuri Tomonari, Mayuko Matsuda, Takahito Watanabe, Yoshiyasu Ishimaru, Natsuki Uemura, Sumihare Noji, Taro Mito
    • Organizer
      第50回日本発生生物学会年会
    • Place of Presentation
      タワーホール船堀(東京都・江戸川区)
    • Year and Date
      2017-05-10 – 2017-05-13
  • [Presentation] Functional analysis of a Hox gene, abdominal-A, in the cricket Gryllus bimaculatus using a CRISPR/Cas9-mediated gene knock-in system2017

    • Author(s)
      Mayuko Matsuda, Yuji Matsuoka, Yoshiyasu Ishimaru, Sayuri Tomonari, Takahito Watanabe, Sumihare Noji, Taro Mito
    • Organizer
      第50回日本発生生物学会年会
    • Place of Presentation
      タワーホール船堀(東京都・江戸川区)
    • Year and Date
      2017-05-10 – 2017-05-13
  • [Presentation] モデル昆虫(コオロギ)を用いた研究におけるゲノム編集技術の活用2016

    • Author(s)
      三戸太郎
    • Organizer
      第3回日本生物工学会西日本支部講演会
    • Place of Presentation
      徳島大学(徳島県徳島市)
    • Year and Date
      2016-12-10 – 2016-12-10
    • Invited
  • [Presentation] 直翅目昆虫フタホシコオロキにおけるゲノム編集2016

    • Author(s)
      三戸太郎
    • Organizer
      第87回日本動物学会大会
    • Place of Presentation
      沖縄コンベンションセンター(沖縄県・宜野湾市)
    • Year and Date
      2016-11-17 – 2016-11-19
    • Invited
  • [Presentation] Genome editing in the cricket Gryllus bimaculatus2016

    • Author(s)
      Taro Mito
    • Organizer
      XXV International Congress of Entomology
    • Place of Presentation
      Orland (USA)
    • Year and Date
      2016-09-25 – 2016-09-30
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] even-skipped acts principally as a gap gene in the cricket Gryllus bimaculatus as revealed by CRISPR/Cas9-based gene knockout analysis2016

    • Author(s)
      Kohei Kawamoto, Sayuri Tomonari, Yuji Matsuoka, Takahito Watanabe, Yoshiyasu Ishimaru, Sumihare Noji, Taro Mito
    • Organizer
      JSDB Special Symposium: Frontier of Developmental Biology Hosted by JSDB
    • Place of Presentation
      東京大学(東京都・文京区)
    • Year and Date
      2016-06-02 – 2016-06-02
  • [Book] The cricket as a model organism2017

    • Author(s)
      Horch, H.W., Mito, T., Popadic, A., Ohuchi, H., Noji, S eds.
    • Total Pages
      376 (327-370)
    • Publisher
      Springer
  • [Book] Genome Editing in Animals2017

    • Author(s)
      Watanabe T. Noji S. Mito T (Hatada I ed.)
    • Total Pages
      印刷中
    • Publisher
      Springer

URL: 

Published: 2018-01-16  

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