2016 Fiscal Year Annual Research Report
Development of neoglycobiologics and application for drug discovery for lysosomal diseases
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26293120
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
伊藤 孝司 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部, 教授 (00184656)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 大輔 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部, 助教 (00423400)
広川 貴次 国立研究開発法人産業技術総合研究所, 創薬分子プロファイリング研究センター, 研究チーム長 (20357867)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | バイオ医薬品 / 糖タンパク製剤 / リソソーム病 / ドラッグデリバリー / 糖鎖工学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1.改変型HexBのX線結晶構造を基に改良型HexBの哺乳類細胞による発現・精製と有効性評価 分担者の広川が改変型HexBのX線結晶構造を基にin silicoで予測した改良型HexBをCHO細胞で高発言・精製し,HexA欠損症患者iPS細胞由来培養神経系細胞や疾患モデルマウス脳室内へ投与を行った。分担研究者の辻らが、患者iPS細胞由来培養神経細胞では、神経栄養因子非存在下で、PI3K活性の低下に基づく生存率の低下が観察されたが、改良型hexBを培養系に投与することにより、Hex活性の回復に伴い、PI3K活性が増大することが明らかになった。改良型HexBをモデルマウスの脳室内投与（1～2mg/kg体重）した際に、各脳領域でのHex活性の回復を蛍光イメージングと、MSイメージングによる蓄積GM2ガングリオシド（GM2）の減少を観察することができた。またHex活性の回復・GM2の減少に伴い、モデルマウスの運動障害の改善や寿命の延長などの有効性が向上が示された。
2.化学酵素合成法に基づくアクセプターN型糖タンパク質としてのヒトリソソーム酵素への均一な機能性合成糖鎖付加技術の確立 改変型エンドグリコシダーゼM（endoM N175Q）のもつトランスグリコシレーション作用を利用するN型糖鎖すげ替え法により、組換えカイコ絹糸腺で生産・精製するヒトイズロニダーゼ（IDUA)に、末端マンノース6-リン酸含有合成N型糖鎖を付加することにより、ネオグライコIDUAの創製に成功した。
3.ネオグライコ酵素の欠損症患者由来培養繊維芽細胞に対する補充効果の評価 IDUA欠損症（ムコ多糖症１型）患者繊維芽細胞の培養系に、ネオグライコIDUAを投与すると、細胞表面のマンノース6-リン酸レセプター（M6PR）を介して取り込まれ、リソソームまで輸送されることを明らかにした。
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| Research Progress Status |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Causes of Carryover |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Protease-resistant modified human β-hexosaminidase B ameliorates symptoms in GM2 gangliosidosis model.2016
Author(s)
Kitakaze Keisuke, Mizutani Yasumichi, Sugiyama Eiji, Tasaki Chikako, Daisuke Tsuji, Nobuo Maita, Hirokawa Takat- sugu, Asanuma Daisuke, Kamiya Mako, Sato Kohei, Setou Mitsutoshi, Urano Yasuteru, Togawa Tadayasu, Akira Otaka, Sakuraba Hitoshi and Kouji Itou
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Journal Title
The Journal of Clinical Investigation
Volume: 126
Pages: 1691-1703
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
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[Presentation] TG カイコ由来ヒトリソソーム酵素の糖鎖リモデリングと治療への応用2016
Author(s)
西岡宗一郎, 小林功, 原園景, 久保勇樹, 松崎祐二, 真板宣夫, 日高朋, 辻大輔, 瀬筒秀樹, 町井博明, 石井明子, 川崎ナナ, 伊藤孝司
Organizer
第35 回 日本糖質学会年会
Place of Presentation
宮城県仙台市(仙台国際センター)
Year and Date
2016-09-26 – 2016-09-26
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[Presentation] TG カイコ由来ヒトリソソーム酵素の糖鎖リモデリングと治療への応用2016
Author(s)
西岡宗一郎, 小林功, 原囿景, 久保勇樹, 松崎祐二, 真板宣夫, 日高朋, 辻大輔, 瀬筒秀樹, 町井博明, 石井明子, 川崎ナナ, 伊藤孝司
Organizer
第57回 日本生化学会 中国・四国支部例会
Place of Presentation
高知県南国市（高知大学医学部）
Year and Date
2016-05-28 – 2016-05-28
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