Host recognition of a parasite monogenean parasite Heterobothrium okamotoi for fugu Takifugu rubripes

2016 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 26450267
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 筒井 繁行 北里大学, 海洋生命科学部, 講師 (20406911)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 末武 弘章 福井県立大学, 海洋生物資源学部, 准教授 (00334326) ; 細谷 将 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 助教 (60526466) ; 田角 聡志 東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 特任助教 (90359646)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 寄生虫 / IgM / 宿主認識 / 粘液

Outline of Annual Research Achievements

昨年度までの研究により、単生類寄生虫ヘテロボツリウムがトラフグ粘液中のマンノース結合IgMを宿主認識に利用していることを突き止めた。今年度は、主にマンノース結合IgMの特性を明らかにすることを目的として、以下の実験を行った。
まず、このIgMが、マンノース以外の糖と結合しうるかを検討した。具体的には、精製したマンノース結合IgMを市販の４種類の糖結合アガロースカラム（ラクトース、フコース、GalNAc、GlcNAc）に供し、結合画分および非結合画分を得た。これをSDS-PAGEに供したところ、いずれの場合においても非結合画分にバンドが認められた。このことから、トラフグのマンノース結合IgMは、少なくとも上記の４つの糖には結合しないことが示された。
次に、マンノース結合IgMの可変領域のcDNA配列のクローニングを行った。まず、LC-MS/MSで得られたアミノ酸配列から縮重プライマーを設計した。次にこのプライマーを用いて5´RACEを行ったところ、187bpのcDNA配列を得た。今後、この情報を活用し、ゲノム編集技術を用いたマンノース結合IgMノックアウト個体を作出することで、寄生虫フリーのトラフグの生産を目指したいと考えている。

Research Products

• [Journal Article] Mucosal IgM Antibody with D-Mannose Affinity in Fugu Takifugu rubripes Is Utilized by a Monogenean Parasite Heterobothrium okamotoi for Host Recognition (2017)
  • Author(s): Igarashi K, Matsunaga R, Hirakawa S, Hosoya S, Suetake H, Kikuchi K, Suzuki Y, Nakamura O, Miyadai T, Tasumi S, Tsutsui S.
  • Journal Title: Journal of Immunology Volume: in press Pages: in press
  • DOI: doi: 10.4049/jimmunol.1601996.
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant