2014 Fiscal Year Research-status Report
Ｂ細胞リプログラミングとヒト化マウスモデルによるホジキンリンパ腫発症機構の解析
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26460439
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
渡邉 真理子 北里大学, 大学病院, 臨時職員 (90270701)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀江 良一 北里大学, 医学部, 准教授 (80229228)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | Hodgkinリンパ腫 / EBウイルス / CD30 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Epstein-Barr virus (EBV) 産生細胞株B95.8 の培養上清を用いてEBV を正常末梢血Bリンパ球に感染させ、シクロスポリンによる免疫抑制下においてlymphoblastoid cell line (LCL) へとトランスフオームさせた。この間、感染前、２０日、５０日のポイントにおいてEBV 由来分子のLMP-1とHodgkinリンパ腫(HL) の分子基盤と関わっているCD30、CD40、JunB の誘導とNF-κB、ERK1/2 MAPK 活性化を検討した。感染前にはこれらの分子の発現あるいは活性化は認めなかったが、２０日において、LMP-１に加えCD30、CD40、JunB の誘導とNF-κB、ERK1/2MAPK 活性化を認め、５０日のポイントにおいてLMP-１の発現はやや低下傾向を示したが、CD30、CD40、JunB の誘導とNF-κB、ERK1/2 MAPK 活性化は増強した。以上の事より、LCLにおいて既にHLの分子基盤と密接に関わっている分子群の誘導を認める事が明らかとなった。
一方、作製したLCL２種類についてFlow cytometryによる解析で、幹細胞様分画であるside population（SP）が存在している事が示された。
SPとその他の分化した細胞集団であるmajor population (MP)をそれぞれソーティングしサイトスピン後、ギムザ染色を行い細胞の形態を解析したところ、SPは小型の単核の細胞からなるのに対し、non-SPはそれより大型の細胞から構成されている事が明らかとなった。
マウスを用いたHL 発症モデルの作製については何回か移植実験を行い条件の検討を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ほぼ予定通りに研究が進行しているから。
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| Strategy for Future Research Activity |
蛍光ラベルしたlymphoblastoid cell line (LCL)のside population（SP）major population (MP)をマウスに接種して臓器分布等の挙動の差をイメージアナライザーや病理学的手法により検討していくとともにニッチの同定についても進める。LCL においてHL において失われているB 細胞の形質について検討していく。すなわちB 細胞に特徴的な抗原の表面免疫グロブリンや、さらに表面免疫グロブリン発現に関わる転写因子Oct-1 やBob-1 について検討していく。一方、B 細胞の分化に関わる転写因子E2Aについてもあわせて検討して、HLの分子基盤の確立とB細胞としての性質の喪失という視点から解析を進めていく。
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| Causes of Carryover |
研究はおおむね順調に進捗しているが、一部の実験を繰り越したこと。論文投稿が予定よりも遅れ関連費用を繰り越しているため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
物品費と論文投稿関連費用に使用する予定である。
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