2016 Fiscal Year Annual Research Report
Mechanism of production, secretion and hypertension in the endogenous digitalis like factors using mass spectrometry immunoassay
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26460662
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| Research Institution | Kansai Medical University |
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Principal Investigator |
吉賀 正亨 関西医科大学, 医学部, 講師 (70434834)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小宮山 豊 関西医科大学, 医学部, 講師 (40140264) [Withdrawn]
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | 内因性ジギタリス / マリノブファギン / マリノブフォトキシン / テロシノブフォトキシン / ELISA / 高血圧 / レニン / アルドステロン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
内因性ジギタリス（EDLF）はナトリウムポンプ抑制活性を示すことで高血圧発症に関与する申請者はマリノブファギン（MBG）やそのトキシンフォームであるマリノブフォトキシン（MBT）がヒト血液中の存在し血圧上昇への関与を報告している． MBGの２水素付加体であるテロシノブファギン(TCB)にもトキシンフォームであるテロシノブフォトキシン(TCT)が質量分析を用い，ヒト血液中に存在することを報告している.EDLFはステロイド骨格を有する低分子物質であり解析手法が乏しい．近年開発注目されている質量分析イムノアッセイ（MISA）は従来の方法と比べ少ない試料量で高感度な定性のみならず定量解析も可能である． そこでTCTの抗体を作成しMISAに用いMBT，MBGだけでなくTCB，TCTの産生分泌機構および生理作用の網羅的解明を目指す.
本年度は昨年度に引き続き、質量分析の解析に用いる試料量の前処置がMISAチップで可能かの検討を行っている。現有の抗MBG抗体用い、すでに我々が確立しているenzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)の前処置に現在使用している簡易カラムと比べ、MISAチップが簡便で、特異性が高く有用であるかの検討を行った。
具体的には、昨年度に引き続きMISAチップに現有する抗体を吸着させておき、試料を加えることで、チューブ内で抗原抗体反応を起こし、目的の物質のみ抽出可能かの検討を行ったが、今回の検討では、チューブ内で十分な抗原抗体反応を起こすに至らなかった。
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