2015 Fiscal Year Research-status Report
AMPキナーゼ（AMPK）活性化による抗動脈硬化効果、抗癌効果の機序解明
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26461108
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
塚本 蔵 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (80589151)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
朝野 仁裕 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (60527670)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | AMPキナーゼ / Pdlim5 / 細胞遊走 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
AMPK賦活化と細胞遊走の関係について研究を行っている。今回、Pdlim5がAMPKの新規基質であり、AMPKによってPdlim5のSer177がリン酸化されることを証明した。Ser177疑似リン酸化Pdlim5 (S177D-Pdlim5)を発現させた血管平滑筋細胞は、AMPK賦活剤非投与下でもラメリポディアの形成異常を認め、細胞遊走が阻害されていた。さらに、FRETバイオセンサーを利用してを用いて、S177D-Pdlim5発現細胞では遊走細胞のleading edgeにおけるRac1活性が低下し、ラメリポディアにおける樹状アクチン重合に重要なArp2/3複合体がleading edgeから細胞質へと局在変化されることを発見した。
さらには、野生型Pdlim5に結合している複数のRac1特異的RhoGEFsが、S177D-Pdlim5には結合しなくなることを証明した。すなわち、リン酸化されたPdlim5はRac1特異的RhoGEFとの結合が阻害され、Rac1活性の低下とleading edgeからのArp2/3複合体の消失を誘導し、ラメリポディアにおける樹状アクチン重合が阻害されると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
AMPK賦活化による細胞遊走阻害の機序解明に迫ることができた。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでの検討で、AMPK阻害では細胞極性の障害により細胞遊走方向が不安定となり細胞が迷走するような状態となるが、AMPK活性化ではラメディポディア構造が消失し過度のストレス線維が形成されることで細胞遊走が停止する状態が考えられる。
今後は、AMPK活性レベルによる細胞遊走スピードと遊走細胞のdirectionalityに及ぼす影響を中心に検討を行う。
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| Causes of Carryover |
リコンビナント蛋白質の精製に使用する生化学関連試薬をストック分で使用したため、余剰金が発生した。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
ストックは無くなったので、予定通り必要な生化学関連試薬の購入に使用する予定。
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[Journal Article] Augmented AMPK activity inhibits cell migration by phosphorylating the novel substrate Pdlim52015
Author(s)
Yan Y, Tsukamoto O, Nakano A, Kato H, Kioka H, Ito N, Higo S, Yamazaki S, Shintani Y, Matsuoka K, Liao Y, Asanuma H, Asakura M, Takafuji K, Minamino T, Asano Y, Kitakaze M, Takashima S
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Journal Title
Nature Communications
Volume: 6
Pages: 6137
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Higd1a is a positive regulator of cytochrome c oxidase.2015
Author(s)
.Hayashi T, Asano Y, Shintani Y, Aoyama H, Kioka H, Tsukamoto O, Hikita M, Shinzawa-Itoh K, Takafuji K, Higo S, Kato H, Yamazaki S, Matsuoka K, Nakano A, Asanuma H, Asakura M, Minamino T, Goto Y, Ogura T, Kitakaze M, Komuro I, Sakata Y, Tsukihara T, Yoshikawa S, Takashima S.
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci U S A.
Volume: 112
Pages: 1553
DOI
Peer Reviewed
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