子宮体癌・卵巣癌においてアポトーシスを誘導する新規分子標的治療法の探索

2014 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 26462515
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 織田 克利 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (30359608)
• Project Period (FY): 2014-04-01 – 2017-03-31
• Keywords: 子宮体癌 / アポトーシス / オートファジー / クロロキン / シスプラチン耐性

Outline of Annual Research Achievements

【目的】近年、細胞内のタンパク質を分解するための機序の一つであるオートファジー(自食作用)と癌の関係性が注目されているが、子宮体癌において、オートファジーの役割については、十分な知見が得られていない。そこで、オートファジー阻害剤の子宮体癌における抗腫瘍効果、アポトーシス誘導作用を解明することを研究の目的とした。
【方法】子宮体部細胞株6種類を用いて、オートファジー阻害剤（抗マラリア薬として実地臨床使用歴あり）クロロキンを添加し、MTTアッセイ法、Flow cytometry法にて細胞増殖抑制能を評価した。また、Annexin V法にてアポトーシス誘導能を検討した。さらに、Ishikawa株を用いてシスプラチン耐性株(CP-r)を樹立し、クロロキンの効果を親株と比較した。
【成績】子宮体癌細胞株6種類にクロロキンを添加した。クロロキン添加により、LC3蛋白の蓄積やオートファゴソ―ムの形成が認められており、オートファジーが実際に阻害されていること確認した。MTTアッセイを施行したところ、全6株において、クロロキンは濃度依存性に子宮体癌細胞の増殖抑制効果を示した。Flow cytometryによる細胞周期の解析では、いずれの細胞株でもSub-G1の比率が濃度依存性に上昇しており、Annexin V法にて、アポトーシスを誘導することが示された。さらに、MTTアッセイにてシスプラチン耐性株CP-rでは、クロロキンの感受性が高まり、シスプラチンとクロロキンの併用により、シスプラチンの感受性が高まることが示された。
【結論】クロロキンはオートファジー阻害剤として、子宮体癌の増殖抑制、アポトーシス誘導作用を有しており、有望な新規分子標的治療法として期待される。さらに、オートファジーはシスプラチン耐性とも関連しており、シスプラチン耐性を示す子宮体癌細胞において、薬剤耐性を克服する手段としても有効である可能性がある。

Current Status of Research Progress

1: Research has progressed more than it was originally planned.

Reason

順調に研究を遂行できており、研究の成果を英語論文としてすでに投稿を行った。査読において改訂を求められたが、追加実験を行ったうえで再投稿まですでに済ませており、初年度としては、当初の計画以上に研究成果が得られているといえる。また、子宮体癌における放射線照射の感受性規定因子に関する研究でも成果が得られ、すでに論文投稿を行った。卵巣がんを用いた他のプロジェクトも現在進行中である。H26年度のAmerican Association for Cancer Research (AACR) Annual Meetingをはじめ、国内外の学会発表の場でも研究成果を報告している。以上の通り、本研究プロジェクトは非常に順調であり、当初の計画以上の進展があったといえる。

Strategy for Future Research Activity

平成26年度は、子宮体癌においてアポトーシスを誘導する新たな分子標的治療法としてクロロキンが有望であることを明らかとした。H27年度以降においても、これまでの成果をもとに子宮体癌・卵巣癌におけるアポトーシスを誘導する新規分子標的治療法の探索研究を遂行していく予定である。
今後については、以下の２つのプロジェクトを中心に研究をさらに推進していく予定である。
一つは、子宮体癌における放射線照射の感受性を予測する因子の解明、放射線感受性を増強し、アポトーシス誘導効果を示す分子標的薬の探索である。子宮体癌における治療選択肢の一つである放射線治療をより効果的に活用することのできる、新たな治療法の提唱を目的とする。
もう一つは卵巣癌におけるアポトーシス誘導能を有する分子標的治療法の探索である。卵巣粘液性腺癌や明細胞腺癌といった、抗癌剤感受性の低い組織型を中心に研究を進めていく予定である。

Causes of Carryover

本年度は昨年度までに購入した物品・消耗品を主に使用しながら効率的に実験を進めたために、次年度使用額が発生した。

Expenditure Plan for Carryover Budget

年度をまたぐプロジェクトの総合的推進に向けて、本資金を次年度に有効活用する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Positive peritoneal cytology at interval surgery is a poor prognostic factor in patients with stage T3c advanced ovarian carcinoma: A retrospective study. (2015)
  • Author(s): Nagasaka K, Kawana K, Tomio K, Tsuruga T, Mori-Uchino M, Miura S, Tanikawa M, Miyamoto Y, Ikeda Y, Sone K, Adachi K, Matsumoto Y, Arimoto T, Oda K, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: J Obstet Gynaecol Res Volume: 41 Pages: 755-762
  • DOI: 10.1111/jog.12616.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] CCAR2 negatively regulates nuclear receptor LXRalpha by competing with SIRT1 deacetylase. (2015)
  • Author(s): Sakurabashi A, Wada-Hiraike O, Hirano M, Fu H, Isono W, Fukuda T, Morita Y, Tanikawa M, Miyamoto Y, Oda K, Kawana K, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: J Steroid Biochem Mol Biol Volume: 149C Pages: 80-88
  • DOI: 10.1016/j.jsbmb.2015.02.001.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] mTOR Signaling in Endometrial Cancer: From a Molecular and Therapeutic Point of View (2015)
  • Author(s): Oda K, Ikeda Y, Kawana K, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: Curr Obstet Gynecol Rep Volume: 4 Pages: 1-10
  • DOI: 10.1007/s13669-014-0103-x
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Recent process of molecular target therapies in ovarian serous and endometrioid carcinomas on basis of intergrated genomic characterization (2015)
  • Author(s): Oda K
  • Journal Title: Gan To Kagaku Ryoho Volume: 42 Pages: 169-173
• [Journal Article] Characterization of novel transcripts of human papillomavirus type 16 using cap analysis gene expression technology. (2015)
  • Author(s): Taguchi A, Nagasaka K, Kawana K, Hashimoto K, Kusumoto-Matsuo R, Plessy C, Thomas M, Nakamura H, Bonetti A, Oda K, Kukimoto I, Carninci P, Banks L, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: J Virol Volume: 89 Pages: 2448-2452
  • DOI: 10.1128/JVI.03433-14.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] よくわかる検査と診断 がん関連遺伝子検査 (2015)
  • Author(s): 織田 克利
  • Journal Title: 診断と治療社 産科と婦人科 Volume: 82 Pages: -
• [Journal Article] Huge pyogenic cervical cyst with endometriosis, developing 13 years after myomectomy at the lower uterine segment: a case report. (2014)
  • Author(s): Oda K, Ikeda Y, Maeda D, Arimoto T, Kawana K, Fukayama M, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: BMC Womens Health Volume: 14 Pages: 104 (1-4)
  • DOI: 10.1186/1472-6874-14-104
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Non-diethylstilbestrol exposed vaginal clear cell adenocarcinoma has a common molecular profile with ovarian clear cell adenocarcinoma: A case report (2014)
  • Author(s): Ikeda Y, Oda K, Aburatani H, Kawana K, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: Gynecol Oncol Rep Volume: 10 Pages: 49-52
  • DOI: 10.1016/j.gynor.2014.05.006
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Xanthogranulomatous inflammation of the perimetrium with infiltration into the uterine myometrium in a postmenopausal woman: a case report. (2014)
  • Author(s): Inoue T, Oda K, Arimoto T, Samejima T, Takazawa Y, Maeda D, Fukayama M, Kawana K, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: BMC Womens Health Volume: 14 Pages: 82 (1-4)
  • DOI: 10.1186/1472-6874-14-82.
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] SIRT3 positively regulates the expression of folliculogenesis- and luteinization-related genes and progesterone secretion by manipulating oxidative stress in human luteinized granulosa cells. (2014)
  • Author(s): Fu H, Wada Hiraike O, Hirano M, Kawamura Y, Sakurabashi A, Shirane A, Morita Y, Isono W, Oishi H, Koga K, Oda K, Kawana K, Yano T, Kurihara H, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: Endocrinology Volume: 155 Pages: 3079-3087
  • DOI: 10.1210/en.2014-1025
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Oral vaccination against HPV E7 for treatment of cervical intraepithelial neoplasia grade 3 (CIN3) elicits E7-specific mucosal immunity in the cervix of CIN3 patients. (2014)
  • Author(s): Kawana K, Adachi K, Kojima S, Taguchi A, Tomio K, Yamashita A, Nishida H, Nagasaka K, Arimoto T, Yokoyama T, Wada-Hiraike O, Oda K, Sewaki T, Osuga Y, Fujii T
  • Journal Title: Vaccine Volume: 32 Pages: 6233-6239
  • DOI: 10.1016/j.vaccine.2014.09.020
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 子宮体癌細胞株におけるPTEN発現とPARP阻害剤/放射線への感受性 (2014)
  • Author(s): 宮坂 亞希, 織田 克利
  • Journal Title: 放射線生物研究 Volume: 49 Pages: 410-417
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 卵巣がんと子宮体がんにおけるゲノム解読 (2014)
  • Author(s): 織田 克利
  • Journal Title: 実験医学 Volume: 32 Pages: 1885-1892
• [Presentation] 卵巣漿液性腺癌におけるHeterogeneityとLiquid Biopsyの意義 (2015)
  • Author(s): 浅田佳代、織田克利、栗川怜子、後藤健吾、神尊貴裕、池田悠至、宮坂亞希、稲葉可奈子、福田友彦、牧井千波、Agapiti Chuwa、竹内真、曾根献文、平池修、矢野哲、川名敬、大須賀穣、藤井知行、油谷浩幸
  • Organizer: 第３回婦人科がんバイオマーカー研究会学術講演会
  • Place of Presentation: 福岡 博多
  • Year and Date: 2015-02-21 – 2015-02-21
• [Presentation] 抗マラリア薬クロロキンはオートファジーを阻害し子宮体癌細胞の増殖を抑制しシスプラチン抵抗性を克服する (2015)
  • Author(s): 福田友彦, 織田克利, 平池修, 曾根献文, 稲葉可奈子, 池田悠至, 樫山智子, 宮坂亜希, 牧井千波, 谷川道洋, 上原ゆり子, 松本陽子, 有本貴英, 矢野哲, 川名敬, 大須賀穣, 藤井知行
  • Organizer: 第15回関東ホルモンと癌研究会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2015-01-31 – 2015-01-31
• [Presentation] 卵巣癌治療におけるアバスチン療法～いかに活用していくか？～ (2014)
  • Author(s): 織田 克利
  • Organizer: 第128回関東連合産科婦人科学会
  • Place of Presentation: 長野 松本
  • Year and Date: 2014-10-25 – 2014-10-26
  • Invited
• [Presentation] PI3K/mTOR 同時阻害剤と MEK 阻害剤との併用は子宮体癌において新たな治療戦略となりうる (2014)
  • Author(s): 稲葉 可奈子、織田 克利、宮坂 亞希、池田 悠至、Coumaran Egile、Loic Vincent、Veronique Onado、福田 友彦、平池 修、川名 敬、穣 大須賀 穣、藤井 知行
  • Organizer: 第７３回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] 血中遊離 DNA を用いた次世代シーケンサーによる全エクソン解析法の検討 (2014)
  • Author(s): 浅田 佳代、織田 克利、後藤 健吾、栗川 怜子、山本 尚吾、辰野 健二、上田 宏生、池田 悠至、川名 敬、矢野 哲、大須賀 穣、藤井 知行、油谷 浩幸
  • Organizer: 第７３回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-09-25 – 2014-09-27
• [Presentation] 卵巣明細胞腺癌・子宮体癌におけるゲノム解析と分子標的治療法の探索 (2014)
  • Author(s): 織田 克利
  • Organizer: 第1回 新潟産婦人科シンポジウム
  • Place of Presentation: 新潟
  • Year and Date: 2014-09-14 – 2014-09-14
  • Invited
• [Presentation] 子宮平滑筋肉腫15例の検討 (2014)
  • Author(s): 鶴賀 哲史, 織田 克利, 大木 慎也, 江口 聡子, 冨尾 賢介, 足立 克之, 長阪 一憲, 松本 陽子, 有本 貴英, 川名 敬, 大須賀 穣, 藤井 知行
  • Organizer: 第52回日本癌治療学会学術集会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2014-08-28 – 2014-08-30
• [Presentation] 卵巣癌治療におけるベバシズマブへの期待と今後の展望 (2014)
  • Author(s): 織田 克利
  • Organizer: 第56回婦人科腫瘍学会学術講演会
  • Place of Presentation: 栃木 宇都宮
  • Year and Date: 2014-07-17 – 2014-07-19
  • Invited
• [Presentation] 卵巣明細胞腺癌におけるPI3K/mTOR同時阻害剤DS-7423とMDM2阻害剤Nutlin-3aによる抗腫瘍効果の検討 (2014)
  • Author(s): 牧井 千波、織田 克利、池田悠至、樫山智子、宮坂亞希、福田友彦、稲葉可奈子、栗川怜子、神尊貴裕、浅田佳代、竹内真、Agapiti Chuwa、平池修、川名敬、大須賀穣、藤井知行
  • Organizer: 第2回婦人科がんバイオマーカー研究会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-07-05 – 2014-07-05
• [Presentation] 血中遊離DNAを用いた次世代シーケンサーによる遺伝子変異検出法の検討 (2014)
  • Author(s): 浅田佳代、織田克利、栗川怜子、後藤健吾、神尊貴裕、池田悠至、宮坂亞希、稲葉可奈子、福田友彦、牧井千波、Agapiti Chuwa、平池修、矢野哲、川名敬、大須賀穣、藤井知行、油谷浩幸
  • Organizer: 第2回婦人科がんバイオマーカー研究会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-07-05 – 2014-07-05
• [Presentation] 子宮体癌においてPI3K/mTOR同時阻害剤と低用量のMEK阻害剤との併用は新たな治療戦略となりうる (2014)
  • Author(s): 稲葉 可奈子, 織田 克利, 宮坂 亞希, 樫山 智子, 福田 友彦, 牧井 千波, 池田 悠至, 蔵本 博行, 平池 修, 川名 敬, 大須賀 穣, 藤井 知行
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] PI3K/mTOR経路阻害剤NVP-BEZ235はp53変異の有無によらず子宮体癌の放射線感受性を増強する (2014)
  • Author(s): 宮坂 亞希, 織田 克利, 池田 悠至, 樫山 智子, 神尊 貴裕, 稲葉 可奈子, 福田 友彦, 牧井 千波, 平池 修, 川名 敬, 大須賀 穣, 藤井 知行
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] 卵巣明細胞腺癌における統合的ゲノム・エピゲノム解析 (2014)
  • Author(s): 神尊 貴裕, 織田 克利, 上原 ゆり子, 浅田 佳代, 池田 悠至, 宮坂 亞希, 中川 俊介, 恩田 貴志, 平池 修, 川名 敬, 大須賀 穣, 藤井 知行
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] 血中遊離DNAを用いた次世代シーケンサーによる遺伝子変異検出法の検討 (2014)
  • Author(s): 浅田 佳代, 織田 克利, 神尊 貴裕, 池田 悠至, 宮坂 亞希, 稲葉 可奈子, 福田 友彦, 平池 修, 矢野 哲, 川名 敬, 大須賀 穣, 藤井 知行
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] プラチナ抵抗性またはプラチナアレルギーを呈した再発卵巣癌におけるネダプラチンの有効性の検討 (2014)
  • Author(s): 金 愛理, 織田 克利, 有本 貴英, 松本 陽子, 長阪 一憲, 足立 克之, 鶴賀 哲史, 冨尾 賢介, 江口 聡子, 川名 敬, 大須賀 穣, 藤井 知行
  • Organizer: 第66回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2014-04-18 – 2014-04-20
• [Presentation] Aberrant expression of beta-catenin and cyclin D1 in endometrial cancer. (2014)
  • Author(s): Ikeda Y, Oda K, Koso T et al
  • Organizer: AACR Annual Meeting 2014
  • Place of Presentation: San Diego, CA, USA
  • Year and Date: 2014-04-05 – 2014-04-09
• [Presentation] Antitumor effect of a poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibitor in endometrial carcinoma cell lines (2014)
  • Author(s): Miyasaka A, Oda K, Ikeda Y et al
  • Organizer: AACR Annual Meeting 2014
  • Place of Presentation: San Diego, CA, USA
  • Year and Date: 2014-04-05 – 2014-04-09
• [Remarks] 東大病院産婦人科 研究・論文リスト
  • URL: http://plaza.umin.ac.jp/tkyobgyn/recruit/about/report.html