2016 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of the pathology of lymphedema and search for effective lymphangiogenesis
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26462722
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
小山 明彦 北海道大学, 大学病院, 講師 (70374486)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古川 洋志 北海道大学, 医学研究科, 准教授 (00399924) [Withdrawn]
林 利彦 北海道大学, 歯学研究科, 准教授 (00432146)
舟山 恵美 北海道大学, 医学研究科, 講師 (10533630)
七戸 龍司 北海道大学, 大学病院, 医員 (30640346)
山本 有平 北海道大学, 医学研究科, 教授 (70271674)
村尾 尚規 北海道大学, 大学病院, 助教 (90706558)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2017-03-31
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| Keywords | リンパ浮腫 / リンパ管新生因子 / 低酸素応答因子 / 炎症応答 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
リンパ浮腫とリンパ流鬱滞に暴露された組織において発現する因子を詳細に解析するため、浮腫が安定的かつ再現性のある状態で持続するマウス後肢リンパ浮腫モデルを作製して解析した。マウス後肢浮腫モデルは我々が報告した方法に準じて (Iwasaki, D. et al. Plast. Reconstr. Surg. 139, 2017)、作製した。主な改良点は以下の２つである。1)左膝窩領域、鼠径領域のリンパ節、リンパ管を含む脂肪組織を筋肉上で徹底的に切除した。この手術的操作は、リンパ管の再生を抑え、安定的に浮腫が持続することに寄与すると考えられる。2)従来のマウス後肢リンパ浮腫モデルの作製ではリンパ節の摘出を含む外科手術とともに左鼠径領域に放射線照射を施行していた。これは放射線照射により線維化を惹起して、浅リンパ管の再生を抑制することを目的としていた。本実験のモデルでは、放射線照射によるマウスへの影響(骨髄抑制など)を考慮して施行していない。術後浮腫組織を採取して、リアルタイムRT-PCRとウエスタンブロッティングによる分子生物学的解析を行った。リンパ管新生において重要なVEGF-C/VEGFR-3 signalingはmRNAレベルとタンパクレベルで浮腫の程度に応じて変動していることが確認された。また、同様に浮腫を呈した後肢の皮膚・皮下組織を採取し、免疫組織学的染色、ウエスタンブロッティングによってマクロファージ(F4/80)と低酸素応答因子であるHIF-1αの発現解析を行った。浮腫の程度が強い組織において対照群と比較してマクロファージが多く集積・浸潤しており、且つHIF-1αの発現増加も確認された。これらの因子が発現するパターンはリンパ管新生因子の発現パターンに相関していた。今回得られた知見から、炎症応答と低酸素応答がリンパ浮腫の病態に大きく関与していることが示唆された。
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