• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2016 Fiscal Year Annual Research Report

Development of direct visualization methods of steroid hormones on tissue sections by imaging mass spectrometry..

Research Project

Project/Area Number 26670461
Research InstitutionNara Medical University

Principal Investigator

秦野 修  奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (40164850)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 竹森 洋  国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所, 医薬基盤研究所 疾患モデル小動物研究室, 客員研究員 (90273672) [Withdrawn]
大西 健  茨城県立医療大学, 保健医療学部, 教授 (50152195)
矢尾 育子  浜松医科大学, 学内共同利用施設等, 准教授 (60399681)
Project Period (FY) 2014-04-01 – 2017-03-31
Keywordsステロイドホルモン / 副腎皮質 / 質量分析イメージング / 誘導体化試薬 / On-Tissue 誘導体化
Outline of Annual Research Achievements

哺乳動物のステロイドホルモンは、主に副腎皮質、精巣、卵巣で、CYPsやHSDsの連携によって合成・分泌される。これらのステロイドホルモンは、組織切片上で従来の免疫組織化学法などで検出できないために、各々のステロイドホルモン産生部位(細胞)については、それらの最終合成酵素の発現部位を検出することによって、間接的に推定されていた。本研究ではステロイドホルモン産生機構の解明を目的として、質量分析イメージング法を用いて、組織切片上で直接、ステロイドホルモンを検出する実験系の開発を行った。ステロイドホルモンは、質量分析MALDI法のマトリックスとして一般的なCHCAやDHB等の有機化合物を用いると、イオン化効率が悪くピーク強度が低いが、ステロイドホルモンのA環のケトン基に反応するGirard-T(GirT)試薬を用いて、代表的なステロイドホルモン類を誘導体化することにより、強いイオン化シグナルが得られた。そこで、ラット、ウサギ等の副腎の凍結組織切片(10μm厚)を作成し、スライドグラス上に貼付した切片にGirT試薬を噴霧器でスプレーし(On-Tissue誘導体化)、引き続きCHCAマトリックスを噴霧した後に、質量分析MALDI法スキャンを行い、イメージング検出を行った。その結果、Corticosterone-GirT, Progesterone-GirT, Cortisol-GirT等の誘導体化されたステロイドホルモンのm/z値の質量分析イメージング像が、副腎皮質の束状層と網状層に検出された。この際、超高質量分解能(質量分解能100万)のFT-ICR MS機を用いることによって、予想されるm/z値の ±0.001以内の正確さで、これらのイオン化ステロイドホルモンのイメージング検出が達成された。

  • Research Products

    (4 results)

All 2017 2016

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Potentiality of syringetin for preferential radiosensitization to cancer cells.2017

    • Author(s)
      Bando-S, Hatano-O, Takemori-H, Kubota-N, Ohnishi-K.
    • Journal Title

      Int J Radiat Biol.

      Volume: 93(3) Pages: 286-294

    • DOI

      10.1080/09553002.2017.1242815

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] SALDI と誘導体化によるステロイドホルモンのイオン化法の改良と質量分析イメージングへの応用2017

    • Author(s)
      秦野 修、磯崎勝弘、竹森 洋、大西 健、岩崎哲史、片桐昌直、川崎英也、一柳優子、荒川隆一
    • Organizer
      第68回イオン反応研究会 / 第157回質量分析関西談話会 / 第6回イオン移動度研究会・合同研究会
    • Place of Presentation
      奈良市
    • Year and Date
      2017-04-23 – 2017-04-23
  • [Presentation] Improvement of Ionization Methods of Steroid Hormones and Application to Imaging Mass Spectrometry.2016

    • Author(s)
      Hatano O, Isozaki K, Takemori H, Ohnishi K, Katagiri M, Kawasaki H, Ichiyanagi Y, Arakawa R, Kurumatani N.
    • Organizer
      Intl. Symp. of Biological Mass Spectrometry
    • Place of Presentation
      Tokyo
    • Year and Date
      2016-10-14 – 2016-10-15
  • [Presentation] ステロイドホルモンのイオン化法の改良と質量分析イメージングへの応用2016

    • Author(s)
      秦野修, 磯崎勝弘, 竹森洋, 大西健, 五百崎太輔, 森本翔大, 一柳優子, 川崎英也, 片桐昌直, 荒川隆一, 車谷典男
    • Organizer
      第64回質量分析総合討論会
    • Place of Presentation
      大阪
    • Year and Date
      2016-05-19 – 2016-05-19

URL: 

Published: 2018-01-16  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi