ラットリボソーム蛋白遺伝子の構造とその発現調節機構

1988 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 61570117
• Research Institution: Yamagata University
• Principal Investigator: 田中 龍夫 山形大学, 医学部, 助教授 (70018688)
• Keywords: リボソーム蛋白遺伝子 / Processed Pseudogene / 遺伝子クローニング

Research Abstract

ラットのリボソーム蛋白遺伝子は、各々15〜20のProcessed Pseudogeneを持っている。本年度は、このように多数の偽遺伝子の中から、発現している本来の遺伝子をクローニングすることを目標として実験を進めた。
ラット遺伝子ライブラリーよりcDNAクローンをプローブとして、リボソーム蛋白S11、およびL35aの遺伝子クローン各々数十種を得た。各遺伝子クローンのDNAとcDNAとの混成分子の熱安定性の検討や各々のクローンの制限酵素切断部位地図の作成、塩基配列決定などを行った。また、このように多数のProcessed Pseudogeneの中から、本来の遺伝子を探り出すための、最も一般的に適応可能な方法は、イントロン部分をプローブとすることであると考えられていることから、核内のmRNA前駆体のcDNAクローニングを進めている。
一方、鳥類以下ではリボソーム蛋白遺伝子の偽遺伝子は存在しないことが判明したので、鶏のリボソームた蚤白遺伝子クローニングを試みることにした。プローブとして、ラットリボソーム蛋白L37aのcDNAとのクロスハイブリダイゼイションを利用して、鶏L37aのcDNAクローンを得た。現在、鶏のDNAを複数の制限酵素で完全分解して、直接プラスミドに組み込むquick cloning法によって遺伝子クローニングを行っている。
本年度は、このような方法論的検討や、プローブ、ライブラリーの作成に多くの時間を費やし、発現している本来の遺伝子のクローン化には至らなかった。

Research Products

• [Publications] Tatsuo,Tanaka: Eur.J.Biochem.173. 53-56 (1988)
• [Publications] Tatsuo,Tanaka: Eur.J.Biochem.