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Gタンパク質シグナルに応答するスイッチングゲノム編集技術

研究課題

研究課題/領域番号 26820362
研究種目

若手研究(B)

配分区分基金
研究分野 生物機能・バイオプロセス
研究機関神戸大学

研究代表者

石井 純  神戸大学, 自然科学系先端融合研究環重点研究部, 准教授 (40512546)

研究期間 (年度) 2014-04-01 – 2016-03-31
研究課題ステータス 完了 (2015年度)
配分額 *注記
4,030千円 (直接経費: 3,100千円、間接経費: 930千円)
2015年度: 2,210千円 (直接経費: 1,700千円、間接経費: 510千円)
2014年度: 1,820千円 (直接経費: 1,400千円、間接経費: 420千円)
キーワード遺伝子スイッチ / ゲノム編集 / Gタンパク質シグナル / Gタンパク質共役型受容体 / 二量体形成 / 酵母 / セロトニン受容体 / アドレナリン受容体 / 遺伝子発現スイッチ / 発現スイッチ / レポーター遺伝子
研究成果の概要

Gタンパク質シグナルに応答するスイッチングゲノム編集技術として、Cre/loxP組換えシステムを利用した「遺伝子が抜け落ちて代わりに別の遺伝子が発現する」系を確立した。これにより、Gタンパク質シグナルを検知して2つの遺伝子発現の「ON→OFF」と「OFF→ON」を同時に引き起こすことが可能となった。本技術を利用して、Gタンパク質共役型受容体(GPCR)の二量体形成シグナルに応答して2つの遺伝子発現を切替えることのできるシステムを開発し、酵母内在性Ste2受容体とヒト由来セロトニン受容体(HTR1A)のホモ二量体形成や、ヒト由来アドレナリン受容体(ADRB2)のヘテロ二量体形成の検出に成功した。

報告書

(3件)
  • 2015 実績報告書   研究成果報告書 ( PDF )
  • 2014 実施状況報告書
  • 研究成果

    (13件)

すべて 2016 2015 2014 その他

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件、 謝辞記載あり 5件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (7件) (うち国際学会 1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] Dual-color reporter switching system to discern dimer formations of G-protein-coupled receptors using Cre/loxP site-specific recombination in yeast2016

    • 著者名/発表者名
      Yasuyuki Nakamura, Takamichi Hashimoto, Jun Ishii, Akihiko Kondo
    • 雑誌名

      Biotechnology and Bioengineering

      巻: in press 号: 10 ページ: 2178-2190

    • DOI

      10.1002/bit.25974

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Current Techniques for Studying Oligomer Formations of G-Protein-Coupled Receptors Using Mammalian and Yeast Cells2016

    • 著者名/発表者名
      Yasuyuki Nakamura, Jun Ishii, Akihiko Kondo
    • 雑誌名

      Current Medicinal Chemistry

      巻: 23 号: 16 ページ: 1605-1619

    • DOI

      10.2174/0929867323666160407113353

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Gγ recruitment systems specifically select PPI and affinity-enhanced candidate proteins that interact with membrane protein targets2015

    • 著者名/発表者名
      Misato Kaishima, Jun Ishii, Nobuo Fukuda & Akihiko Kondo
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 5 号: 1 ページ: 16723-16723

    • DOI

      10.1038/srep16723

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Applications of yeast-based signaling sensor for characterization of antagonist and analysis of site-directed mutants of the human serotonin 1A receptor2015

    • 著者名/発表者名
      Yasuyuki Nakamura, Jun Ishii, Akihiko Kondo
    • 雑誌名

      Biotechnology and Bioengineering

      巻: 112 号: 9 ページ: 1906-1915

    • DOI

      10.1002/bit.25597

    • 関連する報告書
      2015 実績報告書 2014 実施状況報告書
    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Signaling assays for detection of human G-protein-coupled receptors in yeast2014

    • 著者名/発表者名
      Nakamura Y, Ishii J, Kondo A
    • 雑誌名

      Bio-protocol

      巻: 4

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
    • 査読あり / オープンアクセス / 謝辞記載あり
  • [学会発表] High-resolution, quantitative analysis for measuring heterogeneities of G-protein signaling at single-cell levels in yeast2015

    • 著者名/発表者名
      Jun Ishii, Akihiko Kondo
    • 学会等名
      The 2015 International Chemical Congress of Pacific Basin Societies (Pacifichem 2015)
    • 発表場所
      Honolulu, Hawaii, USA
    • 年月日
      2015-12-15
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
    • 国際学会
  • [学会発表] 酵母シグナル伝達を用いた標的膜タンパク質に対するバイオメディカル分子スクリーニングシステム2015

    • 著者名/発表者名
      海嶋美里,福田展雄,石井純,近藤昭彦
    • 学会等名
      第33回イーストワークショップ
    • 発表場所
      せとうち児島ホテル
    • 年月日
      2015-11-13
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ヒトニューロテンシン受容体のリガンド検出のための酵母バイオセンサーの開発2015

    • 著者名/発表者名
      橋弘樹,中村泰之,石井純,近藤昭彦
    • 学会等名
      第33回イーストワークショップ
    • 発表場所
      せとうち児島ホテル
    • 年月日
      2015-11-13
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] ヒトニューロテンシン受容体におけるリガンド探索のための酵母バイオセンサー2015

    • 著者名/発表者名
      橋弘樹,中村泰之,石井純,近藤昭彦
    • 学会等名
      第67回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      鹿児島城山観光ホテル
    • 年月日
      2015-10-26
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] 1細胞スクリーニングに向けたヒトGPCRアッセイ用酵母バイオセンサー開発2015

    • 著者名/発表者名
      橋弘樹,中村泰之,石井純,近藤昭彦
    • 学会等名
      生物工学若手研究者の集い 夏のセミナー2015
    • 発表場所
      タナベ名古屋研修センター
    • 年月日
      2015-07-11
    • 関連する報告書
      2015 実績報告書
  • [学会発表] Gタンパク質共役型受容体の二量体形成検出のためのゲノム編集技術の開発2014

    • 著者名/発表者名
      橋本貴理,中村泰之,石井純,近藤昭彦
    • 学会等名
      第66回日本生物工学会大会
    • 発表場所
      札幌コンベンションセンター
    • 年月日
      2014-09-09 – 2014-09-11
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [学会発表] G蛋白質共役型受容体の二量体形成に応答して機能するゲノム編集技術の開発2014

    • 著者名/発表者名
      橋本貴理,中村泰之,石井純,近藤昭彦
    • 学会等名
      生物工学若手研究者の集い 夏のセミナー2014
    • 発表場所
      神戸市立神戸セミナーハウス
    • 年月日
      2014-07-12 – 2014-07-13
    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書
  • [備考] Bio-ProtocolのWebページ

    • URL

      http://www.bio-protocol.org/e1206

    • 関連する報告書
      2014 実施状況報告書

URL: 

公開日: 2014-04-04   更新日: 2017-05-10  

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