Structural and functional studies of acetylcholine receptor and rapsyn complex

• Project/Area Number: 17370042
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: Structural biochemistry
• Research Institution: The Institute of Physical and Chemical Research
• Principal Investigator: MIYAZAWA Atsuo The Institute of Physical and Chemical Research, 生体マルチソーム研究チーム, チームリーダー (60247252)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): NISHINO Yuri 独立行政法人理化学研究所, 生体マルチソーム研究チーム, 研究員 (20342826)
• Research Collaborator: UNWIN Nigel 英国MRC分子生物学研究所, 神経生物学部門, 部門長 ; STOWELL Michael 米国コロラド大学, 生物学部, 准教授
• Project Period (FY): 2005 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥15,990,000 (Direct Cost: ¥14,400,000、Indirect Cost: ¥1,590,000); Fiscal Year 2008: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000); Fiscal Year 2007: ¥3,640,000 (Direct Cost: ¥2,800,000、Indirect Cost: ¥840,000); Fiscal Year 2006: ¥4,700,000 (Direct Cost: ¥4,700,000); Fiscal Year 2005: ¥4,400,000 (Direct Cost: ¥4,400,000)
• Keywords: アセチルコリン受容体 / 二次元結晶化 / 精製 / 脱感作 / 電子顕微鏡 / 再構成 / 界面活性剤 / 神経筋接合部 / ラプシン / 二次元結晶 / シナプス / 膜タンパク質 / 細胞内情報伝達 / シビレエイ / ショ糖密度勾配遠心分離 / 受容体結合蛋白質 / 蛋白質複合体 / シグナル伝達 / 神経化学 / 結晶成長

Research Abstract

神経筋接合部において神経から筋への情報伝達に深く関わっているニコチン性アセチルコリン受容体(nAChR)とその結合タンパク質であるrapsynの原子レベルでの構造解明を目的として、脱感作状態におけるnAChRの結晶化とrapsynの精製の検討を行った。その結果、シビレエイの電気器官を用いて再配列させる方法によりnAChRの二次元結晶を作製することができた。また、rapsynは昆虫細胞を用いた発現系を利用することによってカラム精製することができた。

Research Products

• [Journal Article] Myasthenia gravis experimentally induced with muscle-specific kinase (2008)
  • Author(s): Kazuhiro Shigemoto, Atsuo Miyazawa(11名中10番目)
  • Journal Title: Annals of the New York Academy of Sciences 1132 Pages: 93-98
• [Journal Article] 膜タンパク質の二次元結晶化法 (2007)
  • Author(s): 西野有里、宮澤淳夫
  • Journal Title: 膜 32(1) Pages: 25-31
  • NAID: 10018696255
• [Journal Article] 膜タンパク質の二次元結晶化法 (2007)
  • Author(s): 西野 有里、宮澤 淳夫
  • Journal Title: 膜 32 Pages: 25-31
  • NAID: 10018696255
• [Journal Article] 膜たんぱく質の二次元結晶化法 (2007)
  • Author(s): 西野有里, 宮澤淳夫
  • Journal Title: 膜 MEMBRANE 32・1 Pages: 25-31
• [Journal Article] ニコチン性アセチルコリン受容体の構造と機能 (2006)
  • Author(s): 宮澤淳夫
  • Journal Title: 実験医学 24(5) Pages: 630-637
  • NAID: 40006047085
• [Journal Article] 極低温弟子顕微鏡で解析されたアセチルコリン受容体の構造と機能 (2005)
  • Author(s): 宮澤淳夫、西野有里、藤吉好則
  • Journal Title: 構造生物 11(1) Pages: 31-50
• [Journal Article] 極低温電子顕微鏡で解析されたアセチルコリン受容体の構造と機能 (2005)
  • Author(s): 宮澤淳夫, 西野有里, 藤吉好則
  • Journal Title: 構造生物 11・1 Pages: 31-50
  • NAID: 40006863430
• [Presentation] タンパク質の構造解析に向けた試料調製 (2008)
  • Author(s): 西野有里
  • Organizer: 公開合同カンファレンス:神経筋の疾患、老化研究から分子複合体高次構造解析への展開
  • Place of Presentation: 東京都老人総合研究所、東京都
  • Year and Date: 2008-02-13
• [Presentation] ニコチン性アセチルコリン受容体の構造と分子メカニズム (2008)
  • Author(s): 宮澤淳夫
  • Organizer: 日本学術振興会 回折構造生物第169委員会 第27回研究会
  • Place of Presentation: 京都大学百周年時計台記念館、京都市
• [Presentation] Structure and mechanism of nicotinic acetylcholine receptor (2005)
  • Author(s): Atsuo Miyiazawa
  • Organizer: Asia-Pacific Advanced Microscopy Symposium
  • Place of Presentation: Hualien, Taiwan
• [Presentation] 低温電子顕微鏡法による膜タンパク質の高分解能構造解析 (2005)
  • Author(s): 宮澤淳夫
  • Organizer: 日本顕微鏡学会 第50回シンポジウム、"顕微鏡による次世代への挑戦"
  • Place of Presentation: 九州大学医学部、福岡市
• [Presentation] 低温電子顕微鏡によるイオンチャネルの機能構造の解析 (2005)
  • Author(s): 宮澤淳夫
  • Organizer: 日本顕微鏡学会 第61回学術講演会シンポジウム、"電子顕微鏡によるタンパク質のイメージング"
  • Place of Presentation: つくば国際会議場、つくば市
• [Presentation] Structure and Function of Nicotinic Acetylcholine Receptor (2005)
  • Author(s): Atsuo Miyazawa
  • Organizer: 2nd Bilateral Japan-UK Symposium on Structural Genomics and Proteomics
  • Place of Presentation: RIKEN Yokohama Institute, Yokohama, Japan
• [Presentation] ニコチン性アセチルコリン受容体の機能構造の解析 (2005)
  • Author(s): 宮澤淳夫
  • Organizer: 第82回 日本生理学会大会シンポジウム、"センサータンパク分子内の情報転換の仕組み"
  • Place of Presentation: 仙台国際センター、仙台市