| Project/Area Number |
18K06028
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 42040:Laboratory animal science-related
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| Research Institution | Kyoto University (2020-2022)
Hamamatsu University School of Medicine (2018-2019) |
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Principal Investigator |
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高林 秀次 浜松医科大学, 光尖端医学教育研究センター, 准教授 (70372521)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
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| Keywords | シリアンハムスター / ゲノム編集 / CRISPR/Cas9 / 生殖工学 / 冬眠 / 冬眠動物 / リバースジェネティクス / 遺伝子改変動物 |
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| Outline of Final Research Achievements |
We established a technique to generate genome-edited animals by introducing the CRISPR/Cas9 system into zygotes by in vitro electroporation in a hibernation model, the Syrian hamster. Although fertilization failures sometimes occurred when mating after superovulation, zygotes were stably obtained by injecting a large amount of fresh sperm into uterine horns by artificial insemination (AI) using the rat method. As for storage of genome-edited Syrian hamster strains, we investigated cryopreservation of embryos. The results showed that efficient resuscitation is possible in the Syrian hamster by simple vitrification with cryotubes, using rat methods such as PEPeS. AI was also useful in the collection of 2-cell embryos for cryopreservation.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
In vitro受精卵エレクトロポレーション法によるゲノム編集では高効率にKO個体が得られることから、冬眠候補因子等のF0世代での高速スクリーニングに有用ではないかと考えている。複数の遺伝子において、産仔中100%に近い効率でKO個体が得られており、一部はすでに感染実験に利用されている。現在、ゲノム編集シリアンハムスター作製の受託事業について、企業と協力して社会実装を進めている。ゲノム編集シリアンハムスターは、胚凍結による効率的な系統保存が可能である。シリアンハムスターにはマウスやラットのようなリソースセンターはないが、IBBPセンター（基礎生物学研究所）のバックアップ保管制度を利用できる。
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