Development of effective transformation methods for marine phytoplankton using Agrobacterium

• Project/Area Number: 19580206
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Research Field: General fisheries
• Research Institution: Kochi University
• Principal Investigator: ADACHI Masao Kochi University, 教育研究部・自然科学系, 教授 (70274363)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大西 浩平 高知大学, 教育研究部・総合科学系, 教授 (50211800)
• Project Period (FY): 2007 – 2009
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000); Fiscal Year 2008: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000); Fiscal Year 2007: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
• Keywords: プランクトン / 遺伝子導入 / 形質転換 / アグロバクテリウム / 微細藻類 / 珪藻類

Research Abstract

本研究では、まず海産プランクトンに対し、様々な条件の下でアグロバクテリウムを感染させ、その遺伝子導入を試みたが、形質転換体を得ることは出来なかった。そこで、海産藻類感染性ウイルスに由来するプロモーターを新たに用い、これを組み込んだ形質転換用プラスミドを構築した。本プラスミドを用いることにより、中心目珪藻種や羽状目珪藻種に対し、目レベルを超えて形質転換が可能であることが判明した。本結果は、海産藻類ウイルス由来のプロモーターの形質転換系への適用事例として、世界初の成果である。

Research Products

• [Journal Article] High efficiency transformation of the diatom Phaeodactylum tricornutum with a promoter from the diatom Cylindrotheca fusiformis (2009)
  • Author(s): Miyagawa A., Okami T., Kira N., Yamaguchi H., Ohnishi K. and Adachi M.
  • Journal Title: Phycological Research 57 Pages: 142-146
  • NAID: 10025362143
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The pleiotropic regulator PhcA negatively controls expression of the first component of a regulatory cascade necessary for Ralstonia solanacearum hrp regulon induction (2009)
  • Author(s): Yoshimochi T., Hikichi Y., Kiba A. and Ohnishi K.
  • Journal Title: J.Bacteriol (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] High efficiency transformation of the diatom Phaeodactylum tricornutum with a promoter from the diatom Cylindrotheca fusiformis. (2009)
  • Author(s): Miyagawa, A., et al.
  • Journal Title: Phycological Research 57(印刷中)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Occurrence of toxic Dinophysis acuminata (Dinophyceae) in Uranouchi Inlet, Japan (2008)
  • Author(s): Adachi M., Okamoto N., Matsubara M., Nishijima T. and Suzuki T.
  • Journal Title: Fisheries Science 74 Pages: 1351-1321
  • NAID: 10024652675
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The hrp genes of Pseudomonas cichorii are essential for pathogenicity on eggplant but not on lettuce (2008)
  • Author(s): Hojo H., Koyanagi M., Tanaka M., Kajihara S., Ohnishi K., Kiba A. and Hikichi Y.
  • Journal Title: Microbiology 154 Pages: 2920-2928
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Crystal structure of pyridoxamine-pyruvate amino-transferase from Mesorhizobium loti MAFF303099 (2008)
  • Author(s): Yoshikane Y., Yokochi N., Yamasaki M., Mizutani K., Ohnishi K., Mikami B., Hayashi H. and Yagi T.
  • Journal Title: J.Biol. Chem. 283 Pages: 1120-1127
  • NAID: 120001671535
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Occurrence of toxic Dinophysis acuminata (Dinophyceae) in Uranouchi Inlet, Japan. (2008)
  • Author(s): Adachi, M., et al.
  • Journal Title: Fisheries Science 74 Pages: 1315-1321
  • NAID: 10024652675
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 藻類感染性ウイルスプロモーターを用いた海産珪藻の形質転換系の開発 (2009)
  • Author(s): 宮川亜利沙・外丸祐司・長崎慶三・山口晴生・足立真佐雄
  • Organizer: 第12回マリンバイオテクノロジー学会
  • Place of Presentation: 早稲田大学大久保キャンパス
  • Year and Date: 2009-05-31
• [Presentation] Development of marine diatom transformation system using viral promoter (2009)
  • Author(s): Arisa Miyagawa, Yuji Tomaru, Keizo Nagasaki, Haruo Yamaguchi and Masao Adachi
  • Organizer: SCOR Viral Ecology Meeting, Poster Presentation
  • Place of Presentation: Newark, USA
• [Presentation] Stable nuclear transformation of the diatom Chaetocerossp. (2008)
  • Author(s): Miyagawa, A., et al.
  • Organizer: The 8th Asia-Pacific Marine Biotechnology Conference
  • Place of Presentation: Busan, Korea
  • Year and Date: 2008-11-14
• [Presentation] Stable nuclear transformation of the diatom Chaetoceros sp. (2008)
  • Author(s): Arisa Miyagawa, Haruo Yamaguchi and Masao Adachi
  • Organizer: The 8th Asia-Pacific Marine Biotechnology Conference, Poster Presentation
  • Place of Presentation: Busan, Korea
• [Presentation] The genus Ostreopsis in the coastal regions in Tosa Bay, southern part of Japan (2008)
  • Author(s): Masao Adachi, Takuji Ikegami, Haruo Yamaguchi
  • Organizer: The 13th International Conference on Harmful Algae, Poster Presentation
  • Place of Presentation: The Hong Kong Disneyland Hotel, Hong Kong, China
• [Presentation] 珪藻Chaetoeeros sp.の形質転換系の確立 (2007)
  • Author(s): 宮川 亜利沙
  • Organizer: 平成19年度日本水産学会秋季大会
  • Place of Presentation: 函館市・北海道大学
  • Year and Date: 2007-09-26
• [Presentation] 海産珪藻Phaeodactylum tricornutumの異種由来プロモーターによる形質転換 (2007)
  • Author(s): 宮川 亜利沙
  • Organizer: 第10回マリンバイオテクノロジー学会
  • Place of Presentation: 山形市・山形大学
  • Year and Date: 2007-05-27
• [Patent(Industrial Property Rights)] 海産藻類を形質転換するために用いられる新規プロモーター (2009)
  • Inventor(s): 足立真佐雄、長崎慶三、外丸裕司
  • Industrial Property Rights Holder: 国立大学法人高知大学、独立行政法人水産総合研究センター
  • Industrial Property Number: 2009-013577
  • Filing Date: 2009-01-23
• [Patent(Industrial Property Rights)] 海産藻類を形質転換するために用いられる新規プロモーター (2009)
  • Inventor(s): 足立真佐雄, 長崎慶三, 外丸裕司
  • Industrial Property Rights Holder: 国立大学法人高知大学, 独立行政法人水産総合研究センター
  • Industrial Property Number: 2009-013577
  • Filing Date: 2009-01-23