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Development of analysis technology to visualize the role of microorganisms in bacterial consortium

Research Project

Project/Area Number 19K06230
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 40040:Aquatic life science-related
Research InstitutionNiihama National College of Technology

Principal Investigator

Kita Akihisa  新居浜工業高等専門学校, 生物応用化学科, 准教授 (00555162)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 岡村 好子  広島大学, 統合生命科学研究科(先), 教授 (80405513)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
KeywordsRHa-RCA-FISH / 蛍光 in situ ハイブリダイゼーション / 限界希釈法 / キチン分解有機酸発行菌叢 / GlcNAc分解菌 / 細菌間相互作用 / キチン分解菌叢 / アルギン酸分解菌叢 / Mangrovibacterium / RHa-RCA法 / in situ RHa-RCA-FISH法 / mRNA特異的蛍光標識 / 嫌気的キチン分解 / キチン含有廃棄物 / 海洋性菌叢 / 難培養微生物 / in situ RHa-RCA法 / シングルセルゲノミクス
Outline of Research at the Start

水産加工の際に大量に生じるキチン含有廃棄物(エビ殻やカニ殻)は有望な再生可能資源であるが、有効な利用方法が確立されていない。一方、申請者は未処理のキチン含有廃棄物からバイオガスを効率的に生産することができる微生物群集を、海洋環境中から取得することに成功した。そこで、本研究はその微生物群の個々の役割を明らかにすることを目的とし、まずは、in situ RHa-RCA法およびFISH法によって微生物群集中の特異的な微生物を可視化する技術を確立する。さらに、その特異的な微生物を個々に分取し、全ゲノム情報を取得することによって、微生物群集によるキチン分解メカニズムを世界で最初に明らかにしていく。

Outline of Final Research Achievements

In order to visualize the role of microorganisms in the bacterial consortium, we attempted to visualize gene expression by RHa-RCA-FISH in alginate degrading bacterial consortium as a model bacterial consortium. As a result, fluorescent granules were observed and visualized in Mangrovibacterium cells responsible for alginate degradation. In addition, we succeeded in obtaining an organic acid-fermenting consortium that does not require marine sediment from the chitin-degrading methane-fermenting consortium. Microscopic observation revealed that a large number of bacteria adhered around the chitin crystals.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

新たに分離に成功したキチン分解有機酸発酵菌叢は、微生物付着担体としての海洋底泥を必要としないため、キチンが分解されていく過程も観察できるようになった。一方、菌叢による嫌気的キチン分解がいかにして行われているのかを解明するためには、菌叢中の個々の微生物が「何を」やっているのか明らかにする必要がある。RHa-RCA-FISHを適用することにより、本菌叢だけでなく様々な菌叢中の微生物の役割を特異的に可視化することが可能となり、これまで未知であった微生物共生関係の解明が加速することが大いに期待される。

Report

(5 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2021 2020 2019

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results)

  • [Journal Article] Direct detection of mRNA expression in microbial cells by fluorescence in situ hybridization using RNase H-assisted rolling circle amplification2020

    • Author(s)
      Takahashi Hirokazu、Horio Kyohei、Kato Setsu、Kobori Toshiro、Watanabe Kenshi、Aki Tsunehiro、Nakashimada Yutaka、Okamura Yoshiko
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 10 Issue: 1 Pages: 1-8

    • DOI

      10.1038/s41598-020-65864-7

    • Related Report
      2019 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 海洋性アルギン酸分解菌叢におけるアルギン酸分解の分子メカニズム2021

    • Author(s)
      堀尾京平、喜多晃久、高橋宏和、渡邉研志、秋庸裕、中島田豊、岡村好子
    • Organizer
      第73回 日本生物工学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 海洋底泥からのみかん外皮分解菌叢の探索2021

    • Author(s)
      平田さや、小笠原豪、岡村好子、中島田豊、堀尾京平、早瀬伸樹、喜多晃久
    • Organizer
      第73回 日本生物工学会大会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] In Situ RNA Detection Toward Elucidation of Functional Consortium2019

    • Author(s)
      Kyohei Horio, Hirokazu Takahashi, Setsu Kato, Toshiro Kobori, Tsunehiro Aki, Yutaka Nakashimada, Yoshiko Okamura
    • Organizer
      8th IWA Microbial Ecology and Water Engineering Specialist Conference(MEWE2019)
    • Related Report
      2019 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] in situ detection of mRNA toward fluorescence-labelled cells2019

    • Author(s)
      Kyohei Horio, Hirokazu Takahashi, Setsu Kato, Toshiro Kobori, Tsunehiro Aki, Yutaka Nakashimada, Yoshiko Okamura
    • Organizer
      Marine Biotechnology Conference 2019 (MBC2019)
    • Related Report
      2019 Research-status Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 河口底泥からの海洋性キチン分解菌叢の探索とVFAs生産2019

    • Author(s)
      脇 滉、早瀬 伸樹、中島田 豊、喜多 晃久
    • Organizer
      第71回 日本生物工学会大会
    • Related Report
      2019 Research-status Report
  • [Presentation] 微生物細胞内mRNA検出法による遺伝子発現の可視化2019

    • Author(s)
      堀尾 京平、高橋 宏和、加藤 節、小堀 俊郎、秋 庸裕、中島田 豊、岡村 好子
    • Organizer
      第71回 日本生物工学会大会
    • Related Report
      2019 Research-status Report

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Published: 2019-04-18   Modified: 2024-01-30  

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