Expression analysis of FGFR in canine mammary tumor
Project/Area Number |
19K06408
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 42020:Veterinary medical science-related
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Research Institution | Nippon Veterinary and Life Science University |
Principal Investigator |
山本 昌美 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (30530026)
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Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | Dog / Mammary tumor / FGFR / Cell line / Real-time RT-PCR / Cancer / IHC / TMA / イヌ / 乳腺腫瘍 / 遺伝子発現解析 / 分子標的薬 |
Outline of Research at the Start |
近年ヒト腫瘍で高い発現が報告されている線維芽細胞増殖因子受容体(Fibroblast growth factor receptor:FGFR)の発現を、イヌで発生の多い乳腺腫瘍において検索し、その発現と悪性度の関連を検索する。 検索対象としてイヌの乳腺腫瘍組織と乳腺細胞株を用いる。各FGFRの発現と悪性度との関連を調べ、悪性度をはかるマーカーとなりうるかを検討する。またヒトで報告のある遺伝子変異箇所などの検索をおこない、遺伝子変異の有無や発現の変化の腫瘍細胞の特性への影響を調べる。
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Outline of Annual Research Achievements |
イヌの乳腺腫瘍は、乳腺を構成する2種類の上皮細胞(腺上皮細胞、筋上皮細胞)の腫瘍細胞の増殖に加えて、腫瘍細胞の軟骨、骨などへの形質の変化、線維芽細胞などの間葉系成分も増えることが特徴である。イヌにおけるFGFRsの発現の特徴を探るため、上皮と間葉系を含めたイヌの全身組織におけるFGFRsの発現量の検討をおこなった。 病理解剖に供されたイヌの各種正常組織の小片をRNA laterに浸漬し凍結保存し、残り組織はパラフォルムアルデヒドで固定した。凍結小片組織からRNA抽出をおこないcDNAを合成し、FGFR1-4発現量をイヌのFGFR1-4に対するTaqman Probeを用いたreal-time RT-PCRによって解析した。 正常組織での発現は、FGFR1、2および3において脳で最も高い発現が確認され、FGFR4では、結腸と肝臓が高い値を示した。すべてのFGFRで骨格筋が著しく低値を示した。正常組織のRNA発現量の傾向は概ねヒトの組織で知られている発現と同様であることが明らかとなり、またこれによりイヌFGFRsに対するTaqman Probeが発現解析に有用であることが確認された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
市販の抗体を複数試したが、安定した結果に結びつかず、やはり抗ヒトのFGFR抗原に対する抗体であることが影響していると考えられた。そのため、イヌFGFRを抗原とする抗体の作製を計画しているが、抗原タンパクの決定で難航している。
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Strategy for Future Research Activity |
イヌFGFRsに対するTaqman Probeの有効性が確認されたことから、乳腺腫瘍組織と培養細胞でのRNA発現の大きな違いについての意義を探る。これには培養細胞がモノクローナル増殖であることが関連していることも予想され、組織上での個々の細胞の発現解析を実施予定である。
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Report
(4 results)
Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Multiple cystic sphere formation from PK-8 cells in three-dimensional culture2022
Author(s)
Yuuki Shichi, Fujiya Gomi, Yoshibumi Ueda, Keisuke Nonaka, Fumio Hasegawa, Yasuko Hasegawa, Nae Hinata, Hisashi Yoshimura, Masami Yamamoto, Kimimasa Takahashi, Tomio Arai, Toshiyuki Ishiwata
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Journal Title
Biochemistry and Biophysics Reports
Volume: 32
Pages: 101339-101339
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Adenomatous Hyperplasia of Bowman's Capsule Epithelium in a Dog with Metastatic Nasal and Hepatic Neuroendocrine Carcinoma2022
Author(s)
Yukino Machida, Marika Higo, So Doge, Tomokazu Nagashima, Takuya E. Kishimoto, Hisashi Yoshimura, Masami Yamamoto, Kazuki Okada, Naoko Yayoshi, Hitoshi Hatakeyama, Masaki Michishita
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Journal Title
Journal of Comparative Pathology
Volume: 197
Pages: 19-22
DOI
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] In vitro anticancer effects of alpelisib against PIK3CA-mutated canine hemangiosarcoma cell lines2022
Author(s)
Maeda M, Ochiai K, Michishita M, Morimatsu M, Sakai H, Kinoshita N, Sakaue M, Onozawa E, Azakami D, Yamamoto M, Ishioka K, Sadahira T, Watanabe M, Tanaka Y.
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Journal Title
Oncology Reports
Volume: 47
Issue: 4
Pages: 84-84
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Involvement of Nestin in the Progression of Canine Mammary Carcinoma.2021
Author(s)
Yoshimura H, Moriya M, Yoshida A, Yamamoto M, Machida Y, Ochiai K, Michishita M, Nakagawa T, Matsuda Y, Takahashi K, Kamiya S, Ishiwata T
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Journal Title
Vet Pathol.
Volume: 58
Issue: 5
Pages: 994-1003
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] FGFR4 Inhibitor BLU9931 Attenuates Pancreatic Cancer Cell Proliferation and Invasion While Inducing Senescence: Evidence for Senolytic Therapy Potential in Pancreatic Cancer2020
Author(s)
Sasaki N, Gomi F, Yoshimura H, Yamamoto M, Matsuda Y, Michishita M, Hatakeyama H, Kawano Y, Toyoda M, Korc M, Ishiwata T.
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Journal Title
Cancers (Basel)
Volume: 12
Issue: 10
Pages: 2976-2976
DOI
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Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] An Oncogenic Alteration Creates a Microenvironment that Promotes Tumor Progression by Conferring a Metabolic Advantage to Regulatory T Cells2020
Author(s)
Shogo Kumagai, Yosuke Togashi, Chika Sakai, Akihito Kawazoe, Masahito Kawazu, Toshihide Ueno, Eiichi Sato, Takeshi Kuwata, Takahiro Kinoshita, Masami Yamamoto, Sachiyo Nomura, Tetsuya Tsukamoto, Hiroyuki Mano, Kohei Shitara, Hiroyoshi Nishikawa
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Journal Title
Immunity
Volume: 14
Issue: 1
Pages: 187-203
DOI
NAID
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Established fibrous peritoneal metastasis in an immunocompetent mouse model similar to clinical immune microenvironment of gastric cancer2020
Author(s)
Daisuke Fujimori, Jun Kinoshita, Takahisa Yamaguchi, Yusuke Nakamura, Katsuya Gunjigake, Takashi Ohama, Koichi Sato, Masami Yamamoto, Tetsuya Tsukamoto, Sachiyo Nomura, Tetsuo Ohta, Sachio Fushida
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Journal Title
BMC Cancer
Volume: 20
Issue: 1
Pages: 1014-1014
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Presentation] 胃癌腹膜播種形成における血小板の役割2022
Author(s)
仲山 孝, 古屋 信二, 高橋 和徳, 山本 淳史, 滝口 光一, 芦沢 直樹, 庄田 勝俊, 中山 裕子, 山本 昌美, 野村 幸世, 塚本 徹哉
Organizer
第81回 日本癌学会学術総会
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