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Organization of artificial cells into an assembled model that can express orchestrated dynamic behavior through cell junction networks

Research Project

Project/Area Number 19K06540
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 43030:Functional biochemistry-related
Research InstitutionMie University

Principal Investigator

Tsumoto Kanta  三重大学, 工学研究科, 教授 (80362359)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 瀧口 金吾  名古屋大学, 理学研究科, 講師 (20262842)
Project Period (FY) 2019-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
Keywords人工細胞 / リポソーム / GUV / 細胞骨格 / 細胞接着 / バキュロウイルス / 脂質二分子膜 / マイクロコンパートメント / 細胞モデル / 再構成
Outline of Research at the Start

細胞サイズ(10~20 µm)のリン脂質二分子膜ベシクル(Giant Unilamellar Vesicles; GUVs)を単一の人工細胞に見立ててこれらの細胞モデルを集団とした場合にどんな機能や挙動が現れるかを調べることで、細胞組織のモデル化が可能かを検討する。私たちがこれまでに開発してきた、GUV大量調製技術、組換えバキュロウイルスによる膜タンパク質再構成技術、そして細胞骨格再構成技術の3つを組み合わせることにより、GUVに対して、細胞外の認識・結合を行う細胞接着膜受容体の導入や、受容体へ連絡する細胞骨格の導入などを試みる。膜を挟み内外相互作用する機能を持ったGUVの相互作用を実現する。

Outline of Final Research Achievements

To achieve the constitution of artificial cell assemblies, we’ve basically investigated the following experimental concerns. 1) Membrane fusion between baculovirus budded virions (BVs) and GUVs prepared using the reverse-phase/centrifugation method were analyzed and phosphatidylethanolamine was found to serve as cofactor promoting the fusion. We developed lipid-membrane coated silica microbeads containing recombinant proteins introduced by BVs. 2) Expression of cell adhesion proteins and FERM proteins on BVs were investigated. 3) GUV assembly were able to be induced by the aforesaid adhesive proteins. 4) Aqueous/aqueous microdroplets in an aqueous two-phase system (ATPS) could be used for an efficient vessel concentrating cytoskeletal proteins.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

細胞はとてもよくできたシステムであるが、設計者はいない。生命の起源からあと、自然に出来てきたものである。現代の細胞、その集まりがもつ仕組みに学んで、何とか、それに近い構造機能の一部でも実現した「人工細胞」が作れないか、という研究は、細胞の持つ生命機能を切り取り際立たせるという意味では、メディカルライフサイエンスに資する発明の基礎にもなりうる。本研究では、細胞接着分子や細胞骨格を導入し、巨大リポソーム(Giant Unilamellar Vesicles; GUVs)等をベースに人工細胞モデル構築を試みた。

Report

(5 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (37 results)

All 2023 2022 2021 2020 2019 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 3 results) Presentation (28 results) (of which Int'l Joint Research: 6 results,  Invited: 8 results) Book (1 results) Remarks (3 results)

  • [Journal Article] Behavior of Biopolymers, Cytoskeleton, DNA, and Phospholipids, that Exert Self-organization, Shown in the Liquid-Liquid Phase Separation2023

    • Author(s)
      Kingo TAKIGUCHI, Hiroki SAKUTA, Masahito HAYASHI, Tatsuyuki WAIZUMI, Kanta TSUMOTO, Kenichi YOSHIKAWA
    • Journal Title

      Seibutsu Butsuri

      Volume: 63 Issue: 1 Pages: 5-11

    • DOI

      10.2142/biophys.63.5

    • ISSN
      0582-4052, 1347-4219
    • Related Report
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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Polymerization/depolymerization of actin cooperates with the morphology and stability of cell-sized droplets generated in a polymer solution under a depletion effect2021

    • Author(s)
      Waizumi Tatsuyuki、Sakuta Hiroki、Hayashi Masahito、Tsumoto Kanta、Takiguchi Kingo、Yoshikawa Kenichi
    • Journal Title

      The Journal of Chemical Physics

      Volume: 155 Issue: 7 Pages: 075101-075101

    • DOI

      10.1063/5.0055460

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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Self‐Emergent Protocells Generated in an Aqueous Solution with Binary Macromolecules through Liquid‐Liquid Phase Separation2020

    • Author(s)
      Sakuta Hiroki, Fujita Fumika, Hamada Tsutomu, Hayashi Masahito, Takiguchi Kingo, Tsumoto Kanta, Yoshikawa Kenichi
    • Journal Title

      ChemBioChem

      Volume: 21 Issue: 23 Pages: 3323-3328

    • DOI

      10.1002/cbic.202000344

    • NAID

      120006940266

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    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] 水性ミクロ相分離:バイオケミカルリアクターへの利用2020

    • Author(s)
      湊元幹太
    • Journal Title

      化学工業

      Volume: 71(4) Pages: 242-246

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  • [Journal Article] Membrane fusion and infection abilities of baculovirus virions are preserved during freezing and thawing in the presence of trehalose2019

    • Author(s)
      Nakanishi Kohei、Tomita Masahiro、Tsumoto Kanta
    • Journal Title

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry

      Volume: 84 Issue: 4 Pages: 686-694

    • DOI

      10.1080/09168451.2019.1704396

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  • [Presentation] なぜ「相」は選ばれているのか? ~モデル実験の意味について~2023

    • Author(s)
      湊元幹太
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      コロイド先端技術講座2022ソフトマターの「液液」相分離
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    • Invited
  • [Presentation] ウイルス膜融合補助因子としてのホスファチジルエタノールアミン2022

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      関真由子、川勝響、伊藤諒、湊元幹太
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      第53回中部化学関係学協会支部連合秋季大会
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  • [Presentation] タンパク質を捕捉する水性微小液滴の形態安定性とその制御2022

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      前田悠佑、林夢乃、鈴木勇輝、湊元幹太
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      第86回 日本生化学会 中部支部例会・シンポジウム
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  • [Presentation] 水性2相系を用いたγ-globulinによるシェル型液滴形成の条件検討2022

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      林夢乃、藤瀬優介、鈴木勇輝、湊元幹太
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      第73回コロイドおよび界面化学討論会
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  • [Presentation] 人工脂質2分子膜を担持したマイクロビーズへのシグナル伝達タンパク質導入2022

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      岩田京樹、鈴木勇輝、湊元幹太
    • Organizer
      第95回日本生化学会大会
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  • [Presentation] 細胞-細胞会合操作のためのリガンド細胞表面修飾とその溶媒検討2022

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      森口夏愛、冨田昌弘、湊元幹太
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      第95回日本生化学会大会
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  • [Presentation] 細胞区画の模倣:リポソームと水性相分離2021

    • Author(s)
      湊元幹太
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      2021年度日本生物工学会中部支部例会
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    • Invited
  • [Presentation] 組換えバキュロウイルス出芽粒子を膜タンパク質デリバリ担体として用いる組換え膜タンパク質再構成膜の形成2021

    • Author(s)
      湊元幹太
    • Organizer
      第5回黒潮カンファレンス
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    • Invited
  • [Presentation] Baculovirus budded virions: protein delivery carriers and model enveloped viruses2021

    • Author(s)
      K. Tsumoto, R. Ito, S. Nishio, Y. Uno, H. Kawakatsu
    • Organizer
      14th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2021)
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Aqueous Microdroplets Stably Serve as Dynamic Biomicrocapsules2021

    • Author(s)
      Yusuke Fujise, Kanta Tsumoto
    • Organizer
      14th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2021)
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    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 遺伝子組換えバキュロウイルスを用いた酵素担持粒子の開発2021

    • Author(s)
      岩田 典也, 冨田 昌弘, 湊元 幹太
    • Organizer
      第94回日本生化学会大会
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  • [Presentation] リポソームモデル膜融合によるエンベロープウイルス感染能阻害条件の検討2021

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      川勝 響, 伊藤 諒, 湊元 幹太
    • Organizer
      第94回日本生化学会大会
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  • [Presentation] Membraneless test tubes: microcompartmentalization for model wet experiments using aqueous micro phase-separation2021

    • Author(s)
      Kanta Tsumoto
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      第44回日本分子生物学会年会
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    • Invited
  • [Presentation] マイクロビーズ担持脂質2分子膜を場とする抗原抗体反応の画像解析2020

    • Author(s)
      倉本大樹,西尾征和,冨田昌弘,湊元幹太
    • Organizer
      第84回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
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  • [Presentation] マイクロビーズ担持リポソームに再構成した組換え膜タンパク質の評価2020

    • Author(s)
      西尾征和,倉本大樹,冨田昌弘,湊元幹太
    • Organizer
      第84回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
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  • [Presentation] ミクロバイオケミカルリアクターをめざした水性ミクロ相分離の分散安定性の検討2020

    • Author(s)
      藤瀬優介,冨田昌弘,湊元幹太
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      第84回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
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  • [Presentation] 組換え膜受容体を提示するマイクロビーズ担持プロテオリポソーム2020

    • Author(s)
      西尾征和,倉本大樹,冨田昌弘,湊元幹太
    • Organizer
      第93回日本生化学会大会
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  • [Presentation] 組換えバキュロウイルス出芽粒子-リポソーム膜融合によるプロテオGUV形成はホスファチジルエタノールアミンが促進する2020

    • Author(s)
      伊藤諒,中西航平,冨田昌弘,湊元幹太
    • Organizer
      第93回日本生化学会大会
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  • [Presentation] On how to prepare and use GUVs: From an experimental aspect2020

    • Author(s)
      Kanta Tsumoto
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      International Workshop on “Water Mediated Low-Dimensional Coulomb Systems” for Bilateral Joint Research Projects between JAPAN & SLOVENIA respectively supported by JSPS (Japan) and MESS (Slovenia)
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Artificial membranes presenting membrane proteins delivered by recombinant baculovirus particles2019

    • Author(s)
      Kanta Tsumoto, Kohei Nakanishi, Seiwa Nishio, Masahiro Tomita
    • Organizer
      The 7th China-Japan Symposium on Nanomedicine
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 膜受容体を提示するマイクロビーズ担持プロテオリポソームの開発2019

    • Author(s)
      西尾征和,中西航平,冨田昌弘,湊元幹太
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      第83回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
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  • [Presentation] 組換えバキュロウイルス膜融合によるプロテオGUV形成の効率化2019

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      伊藤諒,中西航平,冨田昌弘,湊元幹太
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      第83回日本生化学会中部支部例会・シンポジウム
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  • [Presentation] 膜タンパク質を提示するマイクロビーズ担持プロテオリポソームの作製2019

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      西尾征和, 中西航平, 磯崎勇志, 冨田昌弘, 湊元幹太
    • Organizer
      第92回日本生化学会大会
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  • [Presentation] 組換えバキュロウイルス膜融合によるプロテオGUV形成の効率化と膜機能解析2019

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      伊藤諒, 中西航平, 冨田昌弘, 湊元幹太
    • Organizer
      第92回日本生化学会大会
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  • [Presentation] Development of microbead-supported proteoliposomes with recombinant membrane receptors using a baculovirus gene expression system2019

    • Author(s)
      Seiwa Nishio, Kohei Nakanishi, Yushi Isozaki, Masahiro Tomita, Kanta Tsumoto
    • Organizer
      OKINAWA COLLOIDS 2019
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    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Baculovirus particles for displaying/delivering recombinant membrane proteins onto artificial lipid bilayers2019

    • Author(s)
      K. Tsumoto, S. Nishio, H. Seto, K. Nakanishi, M. Tomita
    • Organizer
      13th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2019)
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  • [Presentation] リン脂質とアクチンとビーズの互いに結合しないもの同士によるリポソームの形態形成2019

    • Author(s)
      児島涼太、渋谷朋、住野豊、田中駿介、林真人、瀧口金吾
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      第57回日本生物物理学会年会
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  • [Presentation] リン脂質とアクチンとビーズの互いに結合しないもの同士の協働によるリポソームの形態形成2019

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      児島涼太、伊藤萌香、田中駿介、瀧口金吾、渋谷朋、住野豊、林真人
    • Organizer
      第9回ソフトマター研究会
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      2019 Research-status Report
  • [Book] 42 細胞様構造と相分離:モデル実験によるアプローチ In:相分離生物学の全貌(現代化学増刊46) 白木賢太郎 編2020

    • Author(s)
      湊元幹太、ジンチェンコ アナトーリ
    • Total Pages
      402
    • Publisher
      東京化学同人
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  • [Remarks] 分子生物工学研究室(三重大学工学研究科)

    • URL

      https://www.bio.chem.mie-u.ac.jp/

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  • [Remarks] Google Scholar Citations

    • URL

      https://scholar.google.com/citations?user=HesLhbwAAAAJ&hl=ja

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  • [Remarks] 分子生物工学研究室(三重大学 工学研究科)

    • URL

      https://www.bio.chem.mie-u.ac.jp/

    • Related Report
      2020 Research-status Report

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Published: 2019-04-18   Modified: 2024-01-30  

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