| Project/Area Number |
19K10041
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 57010:Oral biological science-related
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
磯野 加奈 三重大学, 医学系研究科, 技術補佐員 (10833858)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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| Keywords | エナメル芽細胞 / 象牙芽細胞 / Amelogenin-X / Dspp / 前駆細胞 / tdTomato / GFP / 胚性幹細胞 / Amelx / Tamoxifen / 蛍光標識 / Amelogenin / 象牙芽細胞前駆細胞 / エナメル芽細胞前駆細胞 / 歯の器官形成 |
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| Outline of Research at the Start |
我々が作製した象牙芽細胞とエナメル芽細胞を別蛍光で同時標識できるマウスの歯髄・歯胚の象牙芽細胞やエナメル芽細胞を蛍光を指標に検出・単離し、遺伝子発現や表面分子発現を解析する 。次に、これらのマウス歯胚・歯髄から、器官培養にて蛍光陰性から陽性になりDSPP蛋白やAMELX蛋白を産生できる機能的な前駆細胞を同定・単離する。象牙芽細胞とエナメル芽細胞を別蛍光で同時に検出できるマウスから胚性幹細胞株を樹立し、蛍光を指標に象牙芽細胞やエナメル芽細胞の誘導を試みる。また、本系を用いて、蛍光を指標に歯への分化能を持つ口腔外の細胞集団を探索を行う。
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| Outline of Final Research Achievements |
We established Dspp-GFP; Amelx-tdTomato double transgenic mice, that enable us to detect odontoblasts and ameloblasts as GFP-expressing cells or tdTomato-expressing cells fluorescently. Using these mice, GFP+ odontoblasts and tdtomato+ ameloblasts were identified and isolated by immunohistochemistry and flow cytometry. Furthermore, we have established embryonic stem cell lines from Dspp-GFP; Amelx-tdTomato double transgenic mice and attempted to induce GFP+ odontoblasts and tdTomato+ ameloblasts in vitro using different fluorescence markers.
In addition, from these mice, we have identified progenitor cells of odontoblasts or ameloblasts that are negative before culture but become positive for fluorescence after culture by using tooth organ culture.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
高齢化社会におけるQuality of lifeは、非常に重要であり、特に歯の維持や歯の再生医療は大きな期待をされている。歯はエナメル質を産生するエナメル芽細胞と象牙質を産生する象牙芽細胞からなり、本研究では、初めて、象牙芽細胞特異的遺伝子dentin sialophosphoprotein及びエナメル芽細胞特異的遺伝子Amelogenin の発現を同一個体で別々の蛍光で検出できるマウスや胚性幹細胞株を作成した。これらの系は蛍光を指標にエナメル芽細胞と象牙芽細胞を簡単に検出することができ、今後期待される歯の試験管内再生や治療の有効な道具となる。
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