Semisynthetic and folding studies on human IgG antibody using chaperons
Project/Area Number |
19K15698
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Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
Basic Section 37010:Bio-related chemistry
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Research Institution | Osaka University |
Principal Investigator |
Maki Yuta 大阪大学, 理学研究科, 助教 (00805559)
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Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2021)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | 糖鎖 / 糖タンパク質合成 / 抗体 / ペプチドライゲーション / ペプチド固相合成 / 大腸菌発現 / Native Chemical Ligation / 糖タンパク質 / IgG抗体 / フォールディング |
Outline of Research at the Start |
抗体は糖鎖が付加した糖タンパク質であり、基礎研究や創薬などに幅広く用いられる重要な生体高分子である。その一方で、抗体は複数のジスルフィド結合を持った複雑かつ大型な糖タンパク質であり、詳細な機能解明は未だ十分ではない。そこで本研究では、Immunoglobulin G (IgG)抗体の簡便な部分合成法の確立、およびIgG抗体全体の半合成ルートの確立を目指す。一般的な低分子化合物と同じように抗体を合成化学的に扱う方法論を確立することで、今後の抗体研究や抗体を用いた種々の研究を加速させる。
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Outline of Final Research Achievements |
Chemical synthesis of large glycoproteins such as glycoproteins consisting of over 200 amino acids is still big challenge though the many methodologies have been developed. In this work, we targeted Fc region of IgG antibody which is a glycosylated protein and consists of 219 amino acids. We employed not only typical solid-phase peptide synthesis but also E. coli expression to prepare peptides and glycopeptides. Peptide ligation such as Native Chemical Ligation enabled synthesis of full-length Fc polypeptides having different types of glycans.
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Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
抗体は創薬だけでなく基礎研究に幅広く用いられる重要な生体高分子である。現状、抗体のような大きな糖タンパク質は哺乳動物細胞などを用いた発現法によって調製するのが一般的であり、低分子化合物のように有機化学によって自在に構造変化や部位特異的な修飾を行うことが難しい。抗体の構造の中で、Fc領域は生理活性に重要なアスパラギン結合型糖鎖が付加しており、また抗体の高次構造形成に重要な領域である。このFcを有機化学的に自在に合成することができれば、種々のFab領域とのキメラ抗体の創生や、位置特異的に化学官能基修飾を施した抗体の応用研究へと発展させることができる。
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Report
(4 results)
Research Products
(2 results)