| Project/Area Number |
19K16019
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 42040:Laboratory animal science-related
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
Murata Kazuya 筑波大学, 医学医療系, 助教 (60713485)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2021)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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| Keywords | タンパク質間相互作用 / in vivo BioID / ビオチン餌 / ノックインマウス / BMAL1 |
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| Outline of Research at the Start |
生体においてタンパク質は、様々なタンパク質と相互作用することにより、細胞・組織機能を調和的に制御している。古くから培養細胞レベルでのタンパク質間相互作用の網羅的解析（＝インタラクトーム解析）は行われているが、生体組織 (in vivo) においては技術的な問題が多く存在し、成功例は少ない。本研究では、近年開発された「近位依存性ビオチンラベリング (BioID) 」と呼ばれる手法を用い、マウス組織におけるインタラクトーム解析技術を確立し、多くの研究者が利用可能なマウスモデルを作製する。
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| Outline of Final Research Achievements |
Protein-protein interaction (PPI) has a critical role for the proper regulation of cellular and tissue functions. In this study, we have generated a novel BioID mouse model, which enables us to directly analyze PPI in vivo. We investigated an appropriate method for biotin administration and found that feeding a 0.5% biotin diet efficiently induced biotinylation of proximal proteins. This method can avoid unnecessary chemical solvent-induced biological changes and injection-related stresses in mice.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
in vivo BioIDは基礎生物学、分子生物学、医学など多岐にわたる分野で活用が見込まれる強力な研究ツールであり、本研究成果はin vivo BioIDの基盤となる新規ビオチン化誘導法を報告したものである。また、in vivo BioIDは各種組織における利用例が少ない状況であったが、脳や心臓、肝臓、精巣など幅広い組織で活用可能であることを示した。
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