| Project/Area Number |
19K19077
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 57040:Regenerative dentistry and dental engineering-related
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2021: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2020: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
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| Keywords | 幹細胞 / 再生医療 / ケラチノサイト / 幹細胞様細胞 / 口腔粘膜 / 神経再生 / ePUKs / 神経細胞分化 / 多分化能 / 若年者 / 多様性幹細胞 |
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| Outline of Research at the Start |
現在、再生医療の現場では骨髄や歯髄等の多能性幹細胞の有用性に注目した様々な研究が行われているが臨床現場で必要となる質の高い十分量の幹細胞を採取、または生産することは難しい。我々はこれまでにヒトの口腔粘膜や皮膚組織より単離したケラチノサイトから幹細胞様ケラチノサイト(ePUKs: epithelial Pop Up Keratinocytes)を独自の方法で生産・培養しその生物学的評価を行っており、このePUKsには多分化能があると考えている。そこで、口腔外科手術後の運動神経麻痺や知覚神経麻痺の治療にこのePUKsを応用した神経再生を目指した新たな再生医療の道を開く画期的な研究を計画立案した。
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| Outline of Final Research Achievements |
We analyzed the properties of ePUKs (epithekial Pop Up Keratinocytes) by cell size, cell viability, and immunocytofluorescence biomarker staining. The cell size was the smallest and the cell viability was the highest around day4 or 5 after starting cell culture. The growth factors（Epidermal Growth Factor, vascular endothelial growth factor and Fibloblast Growth Factor 2）in the spent media were evaluated by ELISA. In addition, the ePUKs were cultured in the neuronal differentiation media, but the typical structure of neuron could not be detected in the culture. However, our results showed that these ePUKs appear to be progenitor cells, which are small in size, undifferentiated, and have a high proliferative capacity. We believe that ePUKs are suitable for use in medical applications which are like a therapeutic agent for spinal cord injury in the future.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
臨床現場で必要となる質の高い十分量の幹細胞を採取、また生産することは難しい。本研究では口腔粘膜から、より幹細胞に近いヒト口腔粘膜由来のケラチノサイト"epithelial pop-up keratinocytes (ePUKs)" を獲得する事が出来た。今後in vivoでのさらなる評価・検討が必要となるが、再生医療に注目が集まる骨髄や歯髄等の幹細胞に比べて、採取が容易で、かつ一度に大量の幹細胞様ケラチノサイトを生産・培養することができるこのePUKs培養方法は多くの可能性を秘めており、将来の臨床現場でその他の多能性幹細胞に代わる上皮や神経の再生医療の即戦力となるのではないかと考えている。
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