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Identification of tetrodotoxin in marine sediments and screening for its biosynthetic genes in marine soil bacteria

Research Project

Project/Area Number 19K22266
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 38:Agricultural chemistry and related fields
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

Yamashita Mari  東北大学, 農学研究科, 教授 (50192430)

Project Period (FY) 2019-06-28 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥6,240,000 (Direct Cost: ¥4,800,000、Indirect Cost: ¥1,440,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Keywordsテトロドトキシン / 麻痺性貝毒 / 生合成 / ホタテガイ
Outline of Research at the Start

テトロドトキシン(TTX)はフグ毒として知られるが、海洋では他にカニ、タコなど、また陸上ではイモリ、カエルに存在する。起源生物は細菌としているが、どこで膨大なTTXが生産されるのか、なぜ、広範な生物が毒化するのかわかっていない。本研究は、日本でTTXが発生している地域の二枚貝や海底土壌を分析し、TTXが検出されるのか明らかにする。さらに、TTX陽性の土壌中微生物のDNAを抽出し、TTX生合成遺伝子を得ることに挑戦する。

Outline of Final Research Achievements

Tetrodotoxin (TTX) is detected in some marine animals, pufferfish, crabs, octopuses, etc., and bacterial production of TTX has been reported. However, the questions such as, where TTX is produced, and why TTX is widely distributed among marine organisms, have not been well answered yet. Biosynthetic genes of TTX have not been identified neither. In this study, we analyzed TTX in marine sediments, and in the scallops cultured in a bay of East Japan, which were temporally collected for three years. TTX was clearly detected in the marine sediment one time. TTX in the scallops was identified by LCMS for the first time in Japanese bivalves. However, the TTX concentrations in the edible tissues were confirmed to be lower than the restricted concentration proposed by European Food Safety Authority (EFSA). The concentrations of TTX in scallops repeatedly increased from August to October in three years.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究では、未解明のTTX生合成を解決するために、海底土壌サンプルのTTX分析や、海底付近の微小生物のDNA網羅的解析を行い、TTX生合成遺伝子を探索した。さらに、海水中に吊るして養殖したホタテガイを分析し、微量のTTXを国内で初めてLCMSで同定した。また、TTXは8月-10月にかけてピークを示すことを初めて示した。これらは、海洋生物のTTX毒化メカニズム解明において、学術的意義がある。また、ホタテガイ可食部のTTX濃度は食品衛生的に問題のないレベルであることを明らかにし、社会的意義もある。

Report

(4 results)
  • 2021 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • Research Products

    (101 results)

All 2022 2021 2020 2019 Other

All Int'l Joint Research (4 results) Journal Article (22 results) (of which Int'l Joint Research: 8 results,  Peer Reviewed: 21 results,  Open Access: 7 results) Presentation (72 results) (of which Int'l Joint Research: 10 results,  Invited: 9 results) Book (1 results) Remarks (2 results)

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    • Author(s)
      Akamatsu Michiru、Hirozumi Ryosuke、Cho Yuko、Kudo Yuta、Konoki Keiichi、Oshima Yasukatsu、Yotsu-Yamashita Mari
    • Journal Title

      Marine Drugs

      Volume: 20 Issue: 3 Pages: 166-166

    • DOI

      10.3390/md20030166

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      Taylor S. Steele, John K. Brunson, Yukari Maeno, Ryuta Terada, Andrew E. Allen, Mari Yotsu-Yamashita, Jonathan, R. Chekan*, Bradley S. Moore*
    • Journal Title

      Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.

      Volume: 119 Issue: 6

    • DOI

      10.1073/pnas.2117407119

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      Dietrich Mebs,* Julio V. Schneider, Oskar Schroder, Mari Yotsu-Yamashita, John R. Harley, Linda Mogk, Gunther Kohler
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      Toxicon

      Volume: 206 Pages: 28-41

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      10.1016/j.toxicon.2021.12.010

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      Maeno Yukari、Kotaki Yuichi、Terada Ryuta、Hidaka Masafumi、Cho Yuko、Konoki Keiichi、Yotsu-Yamashita Mari
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      Organic & Biomolecular Chemistry

      Volume: 19 Issue: 36 Pages: 7894-7902

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      10.1039/d1ob01378e

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      Toxicon

      Volume: 198 Pages: 32-35

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      10.1016/j.toxicon.2021.04.025

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      Volume: 23 Issue: 9 Pages: 3513-3517

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      10.1021/acs.orglett.1c00916

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      Chemosphere

      Volume: 278 Pages: 130224-130224

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      Cho Yuko、Hidema Shizu、Omura Takuo、Koike Kazuhiko、Koike Kanae、Oikawa Hiroshi、Konoki Keiichi、Oshima Yasukatsu、Yotsu-Yamashita Mari
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      Harmful Algae

      Volume: 101 Pages: 101972-101972

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      Keisuke Nishikawa, Takayuki Noguchi, Seiho Kikuchi, Takahiro Maruyama, Yusuke Araki, Mari Yotsu-Yamashita, and Yoshiki Morimoto
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      Org. Lett.

      Volume: 23 Issue: 5 Pages: 1703-1708

    • DOI

      10.1021/acs.orglett.1c00125

    • URL

      https://ocu-omu.repo.nii.ac.jp/records/2020136

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      Chem. Eur. J.

      Volume: 26 Issue: 9 Pages: 2025-2033

    • DOI

      10.1002/chem.201904184

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      Yuta Kudo, Charles T. Hanifin, Yuichi Kotaki, Mari Yotsu-Yamashita*
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      Journal of Natural Products

      Volume: 83 Issue: 9 Pages: 2706-2717

    • DOI

      10.1021/acs.jnatprod.0c00623

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      Dietrich Mebs *, Mari Yotsu-Yamashita, Katharina Hartmann , Christine Elbert ,Richard Zehner, Stefan W. Toennes
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      Toxicon

      Volume: 178 Pages: 77-81

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      10.1016/j.toxicon.2020.02.026

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      化学と生物

      Volume: 58 Pages: 111-119

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      Org. Lett.

      Volume: 21 Issue: 3 Pages: 780-784

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      10.1021/acs.orglett.8b04043

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      1.Cho, Y., Tsuchiya, S., Omura, T., Koike, K., Oikawa, H., Konoki, K., Oshima, Y., Yotsu-Yamashita, M.
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      Sci. Rep.

      Volume: 9 Issue: 1 Pages: 3460-3460

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      10.1038/s41598-019-39708-y

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      Minowa T.、Cho Y.、Oshima Y. 、Konoki K.、Yotsu-Yamashita M.
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      Toxins

      Volume: 11 Issue: 9 Pages: 539-539

    • DOI

      10.3390/toxins11090539

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    • Author(s)
      Ryuichi Watanabe, Masato Tanioka, Hajime Uchida, Ryoji Matsushima, Hiroshi Oikawa,Masahiro Matsumiya, Mari Yotsu-Yamashita, and Toshiyuki Suzuki*
    • Journal Title

      J. Agric. Food Chem.

      Volume: 67 Issue: 46 Pages: 12911-12917

    • DOI

      10.1021/acs.jafc.9b06380

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      Numano Satoshi、Kudo Yuta、Cho Yuko、Konoki Keiichi、Yotsu-Yamashita Mari
    • Journal Title

      Marine Drugs

      Volume: 17 Issue: 12 Pages: 653-653

    • DOI

      10.3390/md17120653

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    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 新規三環性骨格を有するグアニジノ化合物の構造解析2021

    • Author(s)
      工藤雄大, Charles T. Hanifin, 山下まり
    • Organizer
      第32 回万有仙台シンポジウム
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  • [Presentation] マイトトキシンの標的分子探索2021

    • Author(s)
      此木敬一, 角替俊輔, 八代田陽子, 松本健, Katherine Chan, Amy Hin, Yan Tong, Kamaldeep, Kaur Aulakh, Andrea Habsid, 山下まり, Jason Moffat, Charles Boone, 吉田稔, 村田道雄
    • Organizer
      化学コミュニケーションのフロンティア第8回公開シンポジウム
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  • [Presentation] Maitotoxin による細胞膜の Blebbing の機構解明2021

    • Author(s)
      田端滉樹, 角替俊輔, 後藤萌香, 吉尾柊太郎, 長 由扶子, 村田道雄, 山下まり, 此木敬一
    • Organizer
      2021年度日本農芸化学会東北支部大会
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  • [Presentation] テトロドトキシン含有サメハダイモリより得られた新規三環性骨格を有するグアニジノ化合物の構造解析2021

    • Author(s)
      工藤雄大, Charles T. Hanifin, 長 由扶子, 此木敬一, 山下まり
    • Organizer
      第63回 天然有機化合物討論会
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      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 二次元NMR long range-HSQMBCを用いた構造解析の有用性の検証2021

    • Author(s)
      工藤雄大, 海原大輔, Charles T. Hanifin, 長 由扶子, 此木敬一, 山下まり
    • Organizer
      第156回 農芸化学会東北支部大会
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  • [Presentation] 生合成酵素を用いたドウモイ酸類縁体の調製と構造活性相関2021

    • Author(s)
      前野優香理, 小瀧裕一, 寺田竜太, 日高將文, 長 由扶子, 此木敬一, 山下まり
    • Organizer
      2021年度日本農芸化学会東北支部大会
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  • [Presentation] C11位に第三級水酸基を有するSTX誘導体の合成と活性評価2021

    • Author(s)
      濡木絢斗, 高柳優夏, 石塚颯, 広川貴次, 千葉修, 此木敬一, 山下まり, 長澤和夫
    • Organizer
      第81回有機合成化学協会関東支部シンポジウム
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  • [Presentation] 生合成環化酵素を用いた新規ドウモイ酸類縁体の生産2021

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      前野優香理, 小瀧裕一, 寺田竜太, 長由扶子, 此木敬一, 山下まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] アメリカ産テトロドトキシン含有イモリより得られた新規環状グアニジノ化合物2021

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      工藤 雄大, チャールズ ハニフィン, 山下 まり
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      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] フグ由来の新規テトロドトキシン関連化合物2021

    • Author(s)
      八重樫 優士, 上山 望, 工藤 雄大, 長 由扶子, 此木 敬一, 山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] テトロドトキシン-タンパク質複合体作製のモデル反応と主生成物の構造決定2021

    • Author(s)
      善 瑞穂, 工藤 雄大, 長 由扶子, 此木 敬一, 山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] サキシトキシン類の非天然型エナンチオマーの合成及びナトリウムチャネル阻害活性評価2021

    • Author(s)
      高柳優夏, 安達栞菜, 石塚 颯, 此木敬一, 山下まり, 小田木 陽, 長澤和夫
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 合成サキシトキシン誘導体に対する電位依存性ナトリウムチャネルの感受性評価2021

    • Author(s)
      千葉修, 山田智士, 角替俊輔, 島田紀子, 長 由扶子, 高柳優夏, 星 美波, 安達栞菜, 石塚 颯, 長澤和夫, 山下まり, 此木敬一
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 電位依存性ナトリウムチャネルを阻害するクロイソカイメン抽出物の探索2021

    • Author(s)
      島田 紀子, 千葉修, 角替俊輔, 長 由扶子, 山下まり, 此木 敬一
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 麻痺性貝毒サキシトキシンの推定生合成中間体の合成と有毒渦鞭毛藻中における同定2021

    • Author(s)
      東海林 千容, 長 由扶子, 安達 栞菜, 石塚 颯, 此木 敬一, 及川 寛, 小池 一彦, 長澤 和夫, 山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 渦鞭毛藻サキシトキシン生合成酵素SxtAの細胞内局在の解明とsxtA遺伝子解析による無毒化機構の提唱2021

    • Author(s)
      長 由扶子, 日出間 志寿, 大村 卓朗, 小池 一彦, 小池 香苗, 及川 寛, 此木 敬一, 大島 泰克, 山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 「天狗の麦飯」から分離されたクテドノバクテリア(Dictyobacter alpinus Uno16)からの抗菌化合物の探索2021

    • Author(s)
      齋藤 彩菜, 矢部 修平, 横田 明, 白石 太郎, 葛山 智久, 新谷 尚弘, 工藤 雄大, 山下まり, 阿部 敬悦
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 致死性海藻中毒原因物質ポリカバノシド類の作用機序と構造活性相関2021

    • Author(s)
      土肥 裕花, 岩崎 浩太郎, 佐々木 理, 川島 悠岐, 島田 紀子, 長 由扶子, 此木 敬一, 佐々木 誠, 山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2021年度大会
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  • [Presentation] 渦鞭毛藻サキシトキシン生合成へのニゲリシンの影響2021

    • Author(s)
      長 由扶子*, 土屋 成輝, 日出間 志寿, 大村 卓朗, 此木 敬一, 大島 泰克, 山下 まり
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会春季大会
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  • [Presentation] テトロドトキシン類縁体のマウス毒性の再確認およびテトロドトキシンのアルカリ初期分解物の単離と構造2021

    • Author(s)
      山下まり*, 八重樫優士, 佐藤恭佳, 杉本亜津子, 長 由扶子, 此木敬一, 工藤雄大
    • Organizer
      令和3年度日本水産学会春季大会
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  • [Presentation] Prediction of biosynthetic pathways of tetrodotoxin and saxitoxin on the basis of the structures of their intermediates2020

    • Author(s)
      Mari Yotsu-Yamashita*
    • Organizer
      American Society of Pharmacognosy, the Natural Product Science Webinars
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    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] 有毒イモリより得られた新規テトロドトキシン類縁体および環状グアニジノ化合物2020

    • Author(s)
      工藤雄大*, Charles T. Hanifin, 山下まり
    • Organizer
      第62回天然有機化合物討論会
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  • [Presentation] 生合成環化酵素を用いたドウモイ酸新規類縁体生産系の構築2020

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      前野優香理*, 小瀧裕一, 寺田竜太, 長由扶子, 此木敬一, 山下まり
    • Organizer
      日本農芸化学会東北支部・第155回大会
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  • [Presentation] ホタテガイ中腸腺由来オカダ酸アシル基転移酵素の可溶化条件の検討2020

    • Author(s)
      駒崎有紀, 寺内将斗, 工藤雄大, 長 由扶子, 山下まり, 此木敬一
    • Organizer
      日本農芸化学会東北支部・第155回大会
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  • [Presentation] ドウモイ酸とカイニン酸の生合成を利用した多様な新規カイノイドの生産2020

    • Author(s)
      山下まり*
    • Organizer
      新学術領域「生合成リデザイン」第9回公開シンポジウム
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    • Invited
  • [Presentation] LC-MS/MSを用いた麻痺性貝毒研究2020

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      沼野 聡, 加賀 克昌, 工藤 雄大, 山下 まり
    • Organizer
      貝毒分科会
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  • [Presentation] 機器分析法を用いた麻痺性貝毒研究2020

    • Author(s)
      沼野 聡, 加賀 克昌, 工藤 雄大, 山下 まり
    • Organizer
      令和2年度全国食品衛生監視員研修会
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  • [Presentation] 神経興奮物質カイノイド類の生合成中間体の同定及び生理活性評価2020

    • Author(s)
      前野優香理、小瀧裕一、寺田竜太、長由扶子、此木敬一、山下まり
    • Organizer
      第30回記念万有福岡シンポジウム(オンライン)
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  • [Presentation] 有毒イモリより得られた新規テトロドトキシン類縁体と推定生合成関連化合物の構造2020

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      工藤雄大、Charles T. Hanifin、山下まり
    • Organizer
      第31 回仙台万有シンポジウム(オンライン)
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  • [Presentation] サキシトキシン類の非天然型エナンチオマーの合成及びナトリウムチャネル阻害活性評価2020

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      ◯高柳優夏*、安達栞菜、石塚 颯、此木敬一、山下まり、小田木 陽、長澤和夫
    • Organizer
      日本化学会 第100春季年会 (2020)
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  • [Presentation] フグ由来の新規テトロドトキシン関連化合物の単離と構造2020

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      八重樫優士*、工藤雄大、長由扶子、此木敬一、山下まり
    • Organizer
      日本農芸化学会 2020 大会
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  • [Presentation] 麻痺性貝毒サキシトキシンの推定生合成中間体の合成と有毒生物中の分析2020

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      ○東海林 千容*、長 由扶子、赤松 みちる、安達 栞菜、石塚 颯、此木 敬一、長澤 和夫、山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2020年度大会
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  • [Presentation] 有毒イモリより得られたN-hydroxy型テトロドトキシン類縁体の構造解析2020

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      ○工藤 雄大*、ハニフィン チャールス、小瀧 裕一、山下 まり
    • Organizer
      日本農芸化学会2020年度大会
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  • [Presentation] コルヒチン存在下の渦鞭毛藻サキシトキシン 生合成のメタボロミクス解析2020

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      ○長 由扶子、土屋 成輝、 小池 一彦、此木 敬一、 大島 泰克、山下 まり
    • Organizer
      令和2年度日本水産学会春季大会
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      ○山下まり*・佐藤恭佳・千葉 修・長 由扶子・此木敬一
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      令和2年度日本水産学会春季大会
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      日本農芸化学会2020年度大会
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  • [Presentation] 超活性海洋天然有機化合物マイトトキシンの標的分子探索2020

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      角替 俊輔、チャン キャサリーン、トン エイミーヒンヤン、アウラク カマルディープカウアー、ハスビド アンドレア、松本 健、八代田 陽子、モファット ジェイソン、ブーン チャールズ、山下 まり、村田 道雄、吉田 稔、○此木 敬一*
    • Organizer
      日本農芸化学会2020年度大会
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  • [Presentation] テトロドトキシン類縁体の電位依存性Naチャネル阻害活性と生合成経路の推定2019

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      山下まり
    • Organizer
      第46回日本毒性学会学術年会,シンポジウム「海産毒リビジテッド」
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  • [Presentation] 致死性海藻中毒原因物質ポリカバノシド類の作用機序2019

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      〇山下まり*,土肥裕花,島田紀子,岩崎浩太郎,佐々木 理,川島悠岐,此木敬一,佐々木誠
    • Organizer
      科研費新学術領域研究 化学コミュニケーションのフロンテイア 第6回公開シンポジウム
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  • [Presentation] 中間体に基づく海洋生物毒の生合成研究2019

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      山下まり
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      東京大学大学院薬学系研究科天然物化学教室セミナー
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      〇Maeno, Y., Kotaki, Y., Terada, R., Cho, Y., Konoki, K. and Yotsu-Yamashita, M.
    • Organizer
      Gordon Research Conference, Mycotoxins and Phycotoxins
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      〇Cho, Y., Tsuchiya, S., Omura, T., Koike, K., Oikawa, H., Konoki, K., Oshima, Y. and Yotsu-Yamashita, M.
    • Organizer
      Gordon Research Conference, Mycotoxins and Phycotoxins
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  • [Presentation] 神経興奮物質カイノイド類の生合成中間体の同定及び生理活性評価2019

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      前野優香理* 、小瀧裕一 、寺田竜太 、長由扶子 、此木敬一 、山下まり
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      第30回万有仙台シンポジウム
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  • [Presentation] Identification of new analogs and putative biosynthetic intermediates of tetrodotoxin aimed at elucidating its biosynthetic pathway and structure activity relationship2019

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      ○Kudo, Y. and Yotsu-Yamashita, M.
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      60th American Society of Pharmacognosy Annual Meeting 2019
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  • [Presentation] Screening of novel secondary metabolites from microorganisms associated with the marine sponge Halichondria okadai2019

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      〇Goto, M., Kikuchi, S., Okada, K., Cho, Y., Yotsu-Yamashita, M. and Konoki, K.
    • Organizer
      Tohoku University’s Chemistry Summer School
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      〇Yaegashi, Y., Ueyama, N., Kudo, Y., Cho, Y., Konoki, K. and Yotsu-Yamashita, M.
    • Organizer
      Tohoku University’s Chemistry Summer School
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  • [Presentation] ドウモイ酸とカイニン酸の新規関連化合物の単離,構造決定と生合成経路2019

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      〇前野優香理, 小瀧裕一, 寺田竜太, 長 由扶子,此木敬一, 山下まり
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      〇安達栞菜,石塚 颯,山田智士,日高將文,広川貴次,小田木 陽,此木敬一,山下まり,長澤和夫
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      第61回天然有機化合物討論会
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      ○宮坂忠親,安立昌篤,工藤雄大,杉本敬太,山下まり,西川俊夫
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      第61回天然有機化合物討論会
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  • [Presentation] ホタテガイに含有する麻痺性貝毒の代謝物に関する研究2019

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      沼野 聡,加賀克昌,工藤雄大,山下まり
    • Organizer
      第115回日本食品衛生学会学術講演会
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      山下まり
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      仙台青葉学院短期大学講演会
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      角替俊輔,Katherine Chan,Amy Hin Yan Tong, Kamaldeep Kaur Aulakh, Andrea Habsid,八代田陽子,Jason Moffat,Charles Boone,山下まり, 村田道雄,〇此木敬一
    • Organizer
      公益社団法人日本農芸化学会東北支部・第154回大会
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      〇角替俊輔,Katherine Chan,Amy Hin Yan Tong,Kamaldeep Kaur Aulakh, Andrea Habsid,八代田陽子,Jason Moffat,Charles Boone,山下まり,村田道雄,此木敬一
    • Organizer
      公益社団法人日本農芸化学会東北支部・第154回大会
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      ○工藤雄大, 山下まり
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      赤松みちる,長 由扶子,此木敬一,山下まり
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      公益社団法人日本農芸化学会東北支部・第154回大会
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      沼野 聡*,加賀克昌,工藤雄大,山下まり
    • Organizer
      第56回 全国衛生化学技術協議会年会
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  • [Book] 水産の科学 カキ・ホタテガイの科学 5.1貝毒 pp139-1522019

    • Author(s)
      山下まり、此木敬一
    • Total Pages
      214
    • Publisher
      朝倉書店
    • ISBN
      9784254485035
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      https://www.agri.tohoku.ac.jp/bukka/index-j.html

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Published: 2019-07-04   Modified: 2023-01-30  

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