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Device development for single-cell analysis of iPS cell-derived neurons

Research Project

Project/Area Number 20H04506
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Section一般
Review Section Basic Section 90110:Biomedical engineering-related
Research InstitutionKyushu Institute of Technology

Principal Investigator

YASUDA Takashi  九州工業大学, 大学院生命体工学研究科, 教授 (80270883)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 廣瀬 伸一  福岡大学, 医学部, 教授 (60248515)
桂林 秀太郎  福岡大学, 薬学部, 教授 (50435145)
Project Period (FY) 2020-04-01 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥17,680,000 (Direct Cost: ¥13,600,000、Indirect Cost: ¥4,080,000)
Fiscal Year 2023: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Fiscal Year 2021: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2020: ¥6,630,000 (Direct Cost: ¥5,100,000、Indirect Cost: ¥1,530,000)
Keywordsマイクロデバイス / 微小孔 / 微小電極 / ニューロン / アストロサイト / 共培養 / 単一細胞解析 / 細胞外電位計測 / iPS細胞
Outline of Research at the Start

窒化シリコン製の自立膜に微小孔アレイと微小電極を形成し、膜表面にヒトiPS細胞由来の単一ニューロンを、膜裏面に多数のアストロサイトを培養する。微小孔アレイを通じた良好な細胞間相互作用により、単一ニューロンの活性を長期に渡り維持し得る共培養技術を構築する。そして、薬剤刺激に対する単一ニューロンの電気的応答を微小電極により計測する技術を構築する。本研究により、ヒトiPS細胞由来ニューロンの定量的な解析が可能になり、難治神経疾患の治療薬の開発などに貢献できる。

Outline of Final Research Achievements

A SiN culture membrane having a microhole array was fabricated, and a single neuron and astrocytes were co-cultured on both sides of the membrane. This successfully maintained the physiological activity of a single neuron by cell-to-cell communication through the microhole array.
In addition, microelectrodes were formed on a SiN membrane together with a microhole array, and human iPS cell-derived neurons were cultured on the electrode-formed surface of the membrane and astrocytes were cultured on the reverse side of the membrane. The extracellular potential of neurons was successfully measured while maintaining their physiological activity.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

本研究では、デバイス上でヒトiPS細胞由来ニューロンを単一細胞レベルで解析する新たな方法論を導出した。疾患特異的iPS細胞由来のニューロンを本技術に適用すれば、難治神経疾患の発症機構などの新たな医学的知見の獲得や、革新的な神経疾患治療薬の開発への応用が可能となる。また、容易にこの単一ニューロン解析系を多数アレイ化することが可能であるため、薬の候補化合物から治療効果の高い化合物を探索するハイスループットな創薬スクリーニングへと発展させることができる。

Report

(5 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Annual Research Report
  • 2021 Annual Research Report
  • 2020 Annual Research Report
  • Research Products

    (27 results)

All 2024 2023 2022 2021 2020 Other

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 4 results,  Open Access: 3 results) Presentation (18 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results) Book (1 results) Remarks (2 results) Patent(Industrial Property Rights) (2 results) (of which Overseas: 1 results)

  • [Journal Article] Location analysis of presynaptically active and silent synapses in single-cultured hippocampal neurons2024

    • Author(s)
      Kitaoka Otoya, Oyabu Kohei, Kubota Kaori, Watanabe Takuya, Kondo Satoru, Matsui Teppei, Katsurabayashi Shutaro, Iwasaki Katsunori
    • Journal Title

      Frontiers in Neural Circuits

      Volume: 18 Pages: 1358570-1358570

    • DOI

      10.3389/fncir.2024.1358570

    • Related Report
      2023 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Astrocyte Ca2+ signaling is facilitated in Scn1a+/? mouse model of Dravet syndrome2023

    • Author(s)
      Uchino Kouya、Tanaka Yasuyoshi、Ikezawa Wakana、Deshimaru Masanobu、Kubota Kaori、Watanabe Takuya、Katsurabayashi Shutaro、Iwasaki Katsunori、Hirose Shinichi
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 643 Pages: 169-174

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2022.12.084

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Establishment of autaptic culture with human-induced pluripotent stem cell-derived astrocytes2022

    • Author(s)
      Uchino Kouya、Tanaka Yasuyoshi、Kawaguchi Sayaka、Kubota Kaori、Watanabe Takuya、Katsurabayashi Shutaro、Hirose Shinichi、Iwasaki Katsunori
    • Journal Title

      iScience

      Volume: 25 Issue: 8 Pages: 104762-104762

    • DOI

      10.1016/j.isci.2022.104762

    • Related Report
      2022 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Back-to-back Layered Co-culture on a SiN Porous Membrane for Stable Measurement of Neuronal Extracellular Potentials2021

    • Author(s)
      Satoshi Yoshida, Takashi Yasuda
    • Journal Title

      IEEJ Transactions on Sensors and Micromachines

      Volume: 141 Issue: 7 Pages: 215-221

    • DOI

      10.1541/ieejsmas.141.215

    • NAID

      130008060171

    • ISSN
      1341-8939, 1347-5525
    • Year and Date
      2021-07-01
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    • Author(s)
      坂本虎之介, 吉田悟志, 安田隆
    • Organizer
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      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第47回研究会
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      坂本虎之介, 吉田悟志, 安田隆
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    • Author(s)
      高岡優, 北岡音哉, 大藪康平, 渡辺拓也, 窪田香織, 桂林秀太郎, 岩崎克典
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      第13回トランスポーター研究会九州部会
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  • [Presentation] Preparation of Single Neuron Samples Using a Two-layered Microwell-array Device2022

    • Author(s)
      Ayaka Nakama, Takashi Yasuda
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      26th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (μTAS 2022)
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      Satoshi Yoshida, Takashi Yasuda
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      26th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (μTAS 2022)
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    • Author(s)
      吉田悟志, 安田隆
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第45回研究会
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    • Author(s)
      仲摩綾香, 安田隆
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第45回研究会
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      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] Co-culture Device for Single Neuron Analysis Using a Microporous SiN Membrane2021

    • Author(s)
      Ayaka Nakama, Takashi Yasuda
    • Organizer
      25th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (μTAS 2021)
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      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Microelectrode Array with Back-to-back Layered Co-culture of Neurons and Astrocytes2021

    • Author(s)
      Satoshi Yoshida, Takashi Yasuda
    • Organizer
      25th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (μTAS 2021)
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      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Capture and Release of Single Cells Using Microholes for High Throughput Analysis of Single Neurons2021

    • Author(s)
      Shuntaro Iwai, Takashi Yasuda
    • Organizer
      25th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (μTAS 2021)
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      2021 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 微小電極アレイを形成した多孔膜へのニューロン・アストロサイト共培養系の構築2021

    • Author(s)
      吉田悟志, 安田隆
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会 第43回研究会
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      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 微小電極アレイデバイスを用いたアストロサイトの細胞外電位計測2021

    • Author(s)
      吉田悟志, 安田隆
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      第38回「センサ・マイクロマシンと応用システム」シンポジウム
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  • [Presentation] SiN多孔膜を用いた共培養デバイスによる単一ニューロン解析2021

    • Author(s)
      仲摩綾香, 安田隆
    • Organizer
      第38回「センサ・マイクロマシンと応用システム」シンポジウム
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  • [Presentation] 単一ニューロンのハイスループット解析を目指した微小孔アレイによる単一細胞の捕捉・吐出技術の構築2021

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      岩井俊太郎, 安田隆
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      第38回「センサ・マイクロマシンと応用システム」シンポジウム
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  • [Presentation] 単一ニューロン・アレイの形成を目指したマイクロ流体操作技術の構築2021

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      岩井俊太郎, 安田隆
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  • [Presentation] SiN多孔膜を介する単一ニューロン・アストロサイト共培養を目指したデバイス構築2020

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      仲摩綾香, 安田隆
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  • [Presentation] SiN多孔膜を介した階層型共培養によるニューロン細胞外電位の安定的計測2020

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      吉田悟志, 安田隆
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      第37回「センサ・マイクロマシンと応用システム」シンポジウム
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  • [Book] PHARM STAGE, Vol. 22, No. 7(「バイオMEMSを用いた細胞培養・解析技術」を担当)2022

    • Author(s)
      安田隆, 善明祐介, 吉田悟志
    • Total Pages
      6
    • Publisher
      技術情報協会
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  • [Remarks] 九州工業大学 大学院生命体工学研究科 安田研究室ホームページ

    • URL

      https://www.life.kyutech.ac.jp/~yasuda/jp/

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    • URL

      http://www.life.kyutech.ac.jp/~yasuda/jp/research/index.html

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  • [Patent(Industrial Property Rights)] 細胞培養デバイス及び細胞培養方法2023

    • Inventor(s)
      安田隆, 仲摩綾香
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人九州工業大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2023
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    • Overseas
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 細胞培養デバイス及び細胞培養方法2022

    • Inventor(s)
      安田隆, 仲摩綾香
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人九州工業大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Industrial Property Number
      2022-082309
    • Filing Date
      2022
    • Related Report
      2022 Annual Research Report

URL: 

Published: 2020-04-28   Modified: 2025-01-30  

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