エリスロポエチンの腎線維化と間質浸潤マクロファージに及ぼす影響の検討
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20K08263
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
西田 眞佐志 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 客員教授 (50275202)
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| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | 腎線維化 / エリスロポエチン / 片側尿管結紮 / M1マクロファージ / M2マクロファージ / マクロファージ |
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| Outline of Research at the Start |
腎線維化の進展過程におけるエリスロポエチン（Epo）シグナルのマクロファージを介する作用について明らかにするため、マウス片側尿管結紮（UUO）による腎線維化モデルを用いた、in vivoにおけるEpoの腎線維化および間質マクロファージ浸潤などへの影響の検討（UUO早期および後期における検討）、マウス腹腔内マクロファージを用いたin vitroにおけるEpoのマクロファージ機能に及ぼす影響の検討などを行う。これによりEpoを用いた腎不全進展抑制治療の可能性につき検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
マウス片側尿管結紮（UUO）モデルにおいて、UUO後期（day 7-13）にリコンビナント・ヒト・エリスロポエチン（Epo）1000 U/kgの連日腹腔内投与を行い、腎線維化、間質マクロファージ浸潤などに対するEpo投与の影響についての検討を継続して行った。UUO day14において、Epo投与群では、腎組織マッソン染色および腎組織抽出液中hydroxyproline定量による評価により腎線維化の軽減を認め、同時に腎組織α-smooth muscle actin（α-SMA）免疫染色、腎組織抽出液によるウエスタンブロットによりα-SMAの発現低下を認めた。腎組織より抽出したtotal RNAを用いたRT-PCR法による検討では、Epo投与群で腎組織中１型collagen mRNA発現の有意な低下を認めたが、TGF-β1 mRNA発現については有意な変化を認めなかった。
また、F4/80、CD86、CD206の腎組織免疫染色およびウエスタンブロットによる検討では、Epo投与によりF4/80陽性マクロファージ浸潤の程度に有意な変化は認めなかったが、Epo投与群で腎組織免疫染色によるCD86陽性M1マクロファージ浸潤の有意な減少、CD206陽性M2マクロファージ浸潤の有意な増加、およびウエスタンブロットによるCD206/CD86比の有意な増加を認めた。
さらにEpo投与による末梢血ヘマトクリット（Ht）値への影響を検討したところ、UUO day14においてEpo投与による有意なHt値の変動は認められなかった。
今回の結果より、Epoは腎線維化出現以降のUUO後期における投与でも腎線維化の進展抑制作用を有することが示され、その機序にEpoのマクロファージphenotypeに及ぼす影響の関与が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Epoの腎線維化および間質マクロファージ浸潤に及ぼす影響につき、UUOを用いた腎線維化モデルにおいてUUO後期におけるEpoの投与で興味深い知見が得られた。今後、Epoのマクロファージを介する腎線維化抑制作用について研究を進める端緒となる知見である。
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| Strategy for Future Research Activity |
研究実績の概要にて述べたUUOモデルにおけるEpo投与の腎線維化および間質浸潤マクロファージに対する影響の機序につきさらに検討を進める予定である。具体的には、TUNEL染色などによるEpoのUUO腎におけるアポトーシスに対する影響、Keap1-Nrf2系などの腎線維化関連因子に対する影響、UUO腎組織より単離したマクロファージを用いたEpoのマクロファージ機能に及ぼす影響のin vitroでの検討、などを進めていく予定である。
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Report
(3 results)
Research Products
(7 results)
