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Analysis of the Lysogenization Mechanism of Bacillus Phage SPbeta through Homologous Recombination

Research Project

Project/Area Number 20K15440
Research Category

Grant-in-Aid for Early-Career Scientists

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Basic Section 38020:Applied microbiology-related
Research InstitutionRikkyo University

Principal Investigator

Suzuki Shota  立教大学, 理学部, 助教 (00792714)

Project Period (FY) 2020-04-01 – 2023-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2022)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2022: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywords溶原性ファージ / 相同組換え / 溶原化 / 部位特異的組換え / 枯草菌 / ファージ / SPβ / インテグラーゼ
Outline of Research at the Start

溶原性ファージは感染後、自らのゲノムを細菌ゲノムの内部へ組み込む。この組み込みは、ファージ由来の部位特異的組換え酵素(Int)によるファージゲノム標的部位(attP)と細菌ゲノム標的部位(attB)との間の組換えにより生じる。一方、研究代表者の予備的研究より、モデル微生物の枯草菌に感染するSPβファージが相同組換えでも溶原化を確立し、誘発によりファージ粒子を形成することを見出した。本研究では、SPβの相同組換え機構について、①関連因子の同定、②in vitro再構成によるメカニズムの解明、③本機構の普遍性の探求を行うことで、溶原性ファージに隠されていた新たな溶原化機構を明らかにする。

Outline of Final Research Achievements

Upon infection, Bacillus phage SPβ is incorporated into the host genome through its site-specific recombination mechanism (SSR), which is encoded within its own genome. Whereas, it has been demonstrated that in the absence of the integration site in the host genome, SPβ integrates through homologous regions present in the SPβ genome. This study reveals the characteristics of homologous recombination utilized as a phage integration mechanism by investigating the preference of specific homologous regions for SPβ-mediated recombination, exploring factors involved in homologous recombination within the SPβ genome, and analyzing the function of homologous regions in SPβ with respect to integration. Additionally, the potential involvement of highly frequent homologous recombination regions in the abortive infection mechanism mediated by the integrative conjugative element ICEBs1 is suggested.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

近年バクテリオファージは、宿主特異的感染や短時間で膨大な数の増殖が可能である特徴を利用してファージセラピーやゲノム合成など医学や合成生物学の分野に応用され注目されている。SPβファージの溶原化機構における相同組換えの利用およびその特性を示し、可能性遺伝因子(ICE)による不稔感染に相同領域が関与する可能性を見出した本研究成果は、ファージの研究分野および外来因子間における宿主感染戦略の理解に新しい知見として貢献できるものであり学術的に意義があると考える。またpSSβベクターを利用した有益な形質の一時的な導入と任意の時期に形質を戻せる可逆的形質転換系は枯草菌の育種や工業的な応用が期待される。

Report

(4 results)
  • 2022 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2021 Research-status Report
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2023 2022 2021

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (7 results)

  • [Journal Article] New<i> Bacillus subtilis</i> vector, pSSβ, as genetic tool for site-specific integration and excision of cloned DNA, and prophage elimination2022

    • Author(s)
      Suzuki Shota, Osada Sachie, Imamura Daisuke, Sato Tsutomu
    • Journal Title

      The Journal of General and Applied Microbiology

      Volume: 68 Issue: 2 Pages: 71-78

    • DOI

      10.2323/jgam.2021.10.004

    • ISSN
      0022-1260, 1349-8037
    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 複製開始起点oriCの進化分子工学的手法による改良2023

    • Author(s)
      鈴木 祥太、宮内 翼、末次 正幸
    • Organizer
      ゲノム微生物学会年会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 進化分子工学的手法によるoriC の改良2023

    • Author(s)
      鈴木 祥太、末次 正幸
    • Organizer
      大腸菌研究会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 進化分子工学的手法による複製開始起点oriC の改変2023

    • Author(s)
      鈴木 祥太、末次 正幸
    • Organizer
      グラム陽性菌ゲノム機能会議
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 進化分子工学的手法を利用したoriC の改良2022

    • Author(s)
      鈴木 祥太、宮内 翼、末次 正幸
    • Organizer
      日本分子生物学会
    • Related Report
      2022 Annual Research Report
  • [Presentation] 枯草菌ファージの相同組換えによる溶原化と誘発2021

    • Author(s)
      菅野貴史, 茶谷朋哉, 鈴木祥太, 細谷茂生, 今村大輔, 佐藤勉
    • Organizer
      2021年度グラム陽性菌ゲノム機能会議
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 枯草菌ファージSPβとφ3Tの相同組換えによる溶原化2021

    • Author(s)
      菅野貴史, 茶谷朋哉, 鈴木祥太, 細谷茂生, 佐藤 勉
    • Organizer
      第15回日本ゲノム微生物学会年会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 枯草菌ファージSPβとφ3Tの相同組換えによる溶原化2021

    • Author(s)
      菅野貴史、茶谷朋哉、鈴木祥太、細谷茂生、佐藤 勉
    • Organizer
      第15回日本ゲノム微生物学会年会
    • Related Report
      2020 Research-status Report

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Published: 2020-04-28   Modified: 2024-01-30  

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