| Project/Area Number |
20K18321
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 56050:Otorhinolaryngology-related
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
二之湯 弦 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 特任講師 (70814573)
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| Project Period (FY) |
2022-12-19 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
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| Keywords | マクロファージ / 内耳免疫 / 多重免疫染色 / 内耳組織マクロファージ / イメージサイトメトリー / 内耳 |
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| Outline of Research at the Start |
近年内耳にも組織マクロファージを中心とした免疫応答機構があることが明らかになり、難聴治療の新たなターゲットになる可能性が示唆されている。本研究は、多重免疫染色とデジタル画像技術を組み合わせた、Multiple IHC/Image cytometoryの手法を用いて、そのメカニズムの一端にせまり、新たな難聴発症機構の解明とその治療薬開発の基盤を形成することを目的とする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年内耳にも組織マクロファージを中心とした免疫応答機構があることがあきらかになり、聴覚や平衡障害の治療のターゲットとなる可能性が示唆されている。組織マクロファージのサブセットは様々な組織において研究されているが、内耳においてはその起源や維持機構。免疫応答に対するサブセットの変化などは、まだ不明な点が多く残されている。そこで申請者は、多重免疫染色とデジタル画像解析技術を組み合わせた、Multiplex IHC/Image cytometryの手法を内耳に応用し、免疫細胞の組織上での分布と細胞同士の位置関係を調べ、内耳組織マクロファージの生理的な機能を明らかにすることで、それによる難聴発症機構の解明とその治療薬開発の基盤を形成することを目的として実験を行った。
初年度はまず、マクロファージ表面マーカーに用いる抗体の選別（抗体パネルの作製）と、多重免疫染色を内耳に応用するためのプロトコールの確立を行った。古典的なM1/M2マーカーに加え、マイクログリアやβ-3tublinなどの神経線維を同時に可視化することが可能となった。次にこの手法を用いて、シスプラチン投与前後でのマクロファージの挙動を経時的にとらえることを行い、従来言われていたマクロファージの数だけでなく、サブセットにも変化が起こることを見出した。
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