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Development of a novel method for insect gene editing by adult injection

Research Project

Project/Area Number 20K21311
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 39:Agricultural and environmental biology and related fields
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

Daimon Takaaki  京都大学, 農学研究科, 教授 (70451846)

Project Period (FY) 2020-07-30 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2020: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Keywordsゲノム編集 / 遺伝子編集 / 昆虫 / 形質デザイン / 昆虫機能利用 / 卵母細胞 / ビテロジェニン / 受容体 / CRISPR / Cas9
Outline of Research at the Start

本研究では、昆虫のメス成虫にインジェクションすることでゲノム編集が可能となる、革新的なゲノム編集ツールを開発することを目的とする。メス成虫の卵母細胞へ体腔内注射したCas9 RNPをデリバリーするために、新規の高活性・広宿主域の卵移行リガンドを開発し、これをCas9タンパク質と融合させることで、ゲノム編集の効率を向上させるとともに対象種の範囲を拡大させる。本研究が目指すのは、「誰でも」「容易に」「特別な装置を必要とせず」「あらゆる昆虫種で」ゲノム編集ができる未来である。これによって産業昆虫の形質デザインや、農業害虫や衛生害虫の制圧に向けた基礎・応用研究を強力に牽引することを目指す。

Outline of Final Research Achievements

In this project, we developed a simple and accessible method for insect gene editing, termed Direct Parental CRISPR (DIPA-CRISPR). We show that injection of Cas9 ribonucleoproteins (RNPs) into the haemocoel of adult females efficiently introduces heritable mutations in developing oocytes. Importantly, commercially available standard Cas9 protein can be directly used for DIPA-CRISPR, which makes this approach highly practical and feasible. DIPA-CRISPR enables highly efficient gene editing in the cockroaches, on which conventional approaches cannot be applied, and in the model beetle Tribolium castaneum. Due to its simplicity and accessibility, DIPA-CRISPR will greatly extend the application of gene editing technology to a wide variety of insects.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

昆虫科学は昆虫の特異な形態・生理・生態を理解することで将来にわたる人類の生存を保証しようとする学問分野である。本課題では、革新的な昆虫ゲノム編集法を開発に取り組み、成虫に注射することで高効率にゲノム編集を行うことができる方法(DIPA-CRISPR)を確立した。本法の開発によって、ゲノム編集ツールCas9 RNP(市販品でよい)を成虫に注射するだけ、という簡便な方法で昆虫のゲノム編集を行うことができるようになった。

Report

(3 results)
  • 2021 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2020 Research-status Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2022 2021 2020 Other

All Int'l Joint Research (2 results) Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (5 results)

  • [Int'l Joint Research] Institute of Evolutionary Biology(スペイン)

    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Int'l Joint Research] Institute of Evolutionary Biology(スペイン)

    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Journal Article] Functional conservation and diversification of yellow-y in lepidopteran insects2021

    • Author(s)
      Shirai Yu、Ohde Takahiro、Daimon Takaaki
    • Journal Title

      Insect Biochemistry and Molecular Biology

      Volume: 128 Pages: 103515-103515

    • DOI

      10.1016/j.ibmb.2020.103515

    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Mutations in cardinal are responsible for the red-1 and peach eye color mutants of the red flour beetle Tribolium castaneum2020

    • Author(s)
      Shirai Yu、Daimon Takaaki
    • Journal Title

      Biochemical and Biophysical Research Communications

      Volume: 529 Issue: 2 Pages: 372-378

    • DOI

      10.1016/j.bbrc.2020.05.214

    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Direct parental CRISPR: a simple and efficient method for insect gene editing2022

    • Author(s)
      白井 雄, Piulachs Maria-Dolors, Belles Xavier, 大門 高明
    • Organizer
      第66回日本応用動物昆虫学会大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] parental CRISPR法によるタイリクヒメハナカメムシのゲノム編集2022

    • Author(s)
      高橋 桃世, 白井 雄, 日本 典秀, 大門 高明
    • Organizer
      第66回日本応用動物昆虫学会大会
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] Direct parental CRISPRによる昆虫ゲノム編集の高度化2022

    • Author(s)
      白井 雄、Piulachs Maria-Dolors、Belles Xavier、大門 高明
    • Organizer
      令和4年度 蚕糸・昆虫機能利用学術講演会(日本蚕糸学会年大会)
    • Related Report
      2021 Annual Research Report
  • [Presentation] 昆虫の卵巣発達を利用した新規ゲノム編集法2021

    • Author(s)
      白井雄、大出高広、大門高明
    • Organizer
      第65回応用動物昆虫学会大会
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Presentation] 成虫へのインジェクションによる新規ゲノム編集法の最適化とその汎用性の検証2021

    • Author(s)
      白井雄、大出高広、大門高明
    • Organizer
      令和3年度 蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • Related Report
      2020 Research-status Report

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Published: 2020-08-03   Modified: 2023-01-30  

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