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In vitro reconstitution of intraflagellar transport by cytoplasmic dynein-2

Research Project

Project/Area Number 20K21378
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 43:Biology at molecular to cellular levels, and related fields
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

Niwa Shinsuke  東北大学, 学際科学フロンティア研究所, 准教授 (30714985)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 小田 賢幸  山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (20569090)
Project Period (FY) 2020-07-30 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2021: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Fiscal Year 2020: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Keywordsダイニン / ダイナクチン / 逆行性輸送 / 繊毛内輸送 / IFT / クラミドモナス / 繊毛 / ダイニン2 / intraflagellar transport
Outline of Research at the Start

ダイニン2は繊毛内輸送を担う分子モータータンパク質である。ダイニン2の欠損は繊毛病と呼ばれる疾患の原因となっていることが知られている。本研究ではクラミドモナスと呼ばれる緑藻においてダイニン2を蛍光ラベルして精製する。精製したダイニン2の微小管上での運動を顕微鏡下で再構成して観察することができる実験系を構築する。

Outline of Final Research Achievements

Defects in retrograde intrafragellar transport(IFT) induces a series of diseases called ciliopathy. To understand the mechanism of ciliopathies, it is important to reconstitute intraflagellar transport in vitro. We purified recombinant cytospasmic dynein 2 from chlamydomonas. Recombinant dynein 2 was inactive because of autoinhibitory mechanisms as anticipated. To unlock the autoinhibition in vitro, we purified IFT complex from chlamydomonas as well.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

逆行性の繊毛内輸送(IFT)の分子モータータンパク質であるダイニン2複合体の活性化をin vitroで再構成することは世界中で誰も成功していない学術的に重要な問題である。この問題に取り組むために本研究ではクラミドモナスからダイニン2複合体の精製を行った。本研究で精製に成功した組換えダイニン2複合体は今後1分子計測の手法によってダイニン2複合体の活性化メカニズムを解析するための基盤となる。

Report

(3 results)
  • 2021 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2020 Research-status Report

URL: 

Published: 2020-08-03   Modified: 2023-01-30  

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