Project/Area Number |
20K22991
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Research Category |
Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
0906:Surgery related to the biological and sensory functions and related fields
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
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Project Period (FY) |
2020-09-11 – 2022-03-31
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2021)
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Budget Amount *help |
¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
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Keywords | In vivo imaging / Ecel1 / Retinal ganglion cell / Glaucoma |
Outline of Research at the Start |
我が国失明原因の1位である緑内障の病態は、網膜神経節細胞の細胞死である。その原因については未だ不明な点が多く、病態の解明が大きな課題となる。本研究では遺伝子導入技術を用いて網膜神経節細胞を可視化させ、様々な障害を与えた際の生体内での網膜神経節細胞の反応を評価し、緑内障の病態の解明と薬物治療の効果を評価していく。
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Outline of Final Research Achievements |
Using primers designed from the gene database, the promoter sequence of the Ecel1 gene on human DNA was amplified by PCR and ligated with an E. coli plasmid that has introduced the fluorescent protein in our previous studies. The plasmid was amplified by introducing it into E. coli and culturing, and the target sequence was confirmed by sequencing. Furthermore, the produced plasmid was packaged into AAV2 virus as the target viral vector. On the other hand, in order to adjust the newly introduced SLO camera, we prepared rats in which AAV2-CAG-EGFP was introduced into retinal ganglion cells (RGCs) by vitreous injection and confirmed that imaging of RGCs was possible by the device.
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Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
緑内障は、眼圧下降治療以外にエビデンスによって確立された治療法は未だ存在しない。その理由として緑内障は多因子疾患であり、眼圧非依存的な病因因子が複数存在すると推測される。これまでの基礎および臨床研究から、酸化ストレス、血流障害、軸索障害などで緑内障病態の主体である網膜神経節細胞が障害を受けることが示されている。 そこで、我々は網膜神経節細胞が軸索障害を受けた際に蛍光性を示す動物モデルを作成し、それを利用することで網膜神経節細胞の細胞死のメカニズムを解明し、さらには新しい緑内障治療の可能性を追究する。
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