培養細胞シート内の全細胞解析を目的とした超広視野三次元蛍光イメージング
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21H01843
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 30020:Optical engineering and photon science-related
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
市村 垂生 大阪大学, 先導的学際研究機構, 特任准教授(常勤) (50600748)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中村 友哉 大阪大学, 産業科学研究所, 准教授 (70756709)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥17,680,000 (Direct Cost: ¥13,600,000、Indirect Cost: ¥4,080,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Fiscal Year 2022: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2021: ¥10,660,000 (Direct Cost: ¥8,200,000、Indirect Cost: ¥2,460,000)
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| Keywords | バイオイメージング / 光学 / 蛍光イメージング / 蛍光顕微鏡 / 培養細胞シート / 広視野 / 三次元 |
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| Outline of Research at the Start |
人工細胞シートの発生原理の基礎的理解を進めるための観察ツールとして、１センチメートルを越える広い視野内で全細胞の分布・動態を蛍光イメージングする手法を開発する。研究代表者がこれまでに開発してきた広視野細胞イメージング法に、新規提案の照明系・結像系を組み合わせることで、組織内の深部に至る細胞の分布および動態観察を実現する。原理検証、性能評価したのち、実際に人工細胞シート計測に応用展開する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までに開発した斜入射ライトシート照明法を用いた広視野３次元蛍光イメージング装置の性能向上に取り組んだ。研究代表者が構築してきた光学装置に、研究分担者が設計した計算機生成ホログラムを組み込み、その性能を評価し、照明系及び検出系を最適化した。蛍光ビーズを用いた観察によって、高分解能およびハイスピードの広視野三次元イメージングを実現できることを示した。また、試料側の屈折率に合わせて、屈折率の異なるプリズムと照明角を選定することで、屈折率の異なる各種透明化試薬に対応できる方法を考案し、プリズムマウントなどの周辺治具を含めて、新規開発した。２色のレーザー（488nmと461nm）を用い、それぞれの波長に対して最適化されたホログラムを適用することにより、多色同時イメージングも実現した。透明化し蛍光染色したウズラ胚の三次元観察を実施し、生命科学への応用を示した。
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| Research Progress Status |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和5年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(3 results)
Research Products
(28 results)
