iPS cells producing retroviral replicating vector for malignant glioma
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21H03046
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56010:Neurosurgery-related
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
戸田 正博 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 教授 (20217508)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
植田 良 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (30317143)
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| Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥17,420,000 (Direct Cost: ¥13,400,000、Indirect Cost: ¥4,020,000)
Fiscal Year 2023: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000)
Fiscal Year 2022: ¥5,460,000 (Direct Cost: ¥4,200,000、Indirect Cost: ¥1,260,000)
Fiscal Year 2021: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
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| Keywords | iPS細胞 / 神経幹細胞 / 複製型レトロウイルス / 自殺遺伝子 / グリオーマ / Malignant glioma / 遊走 / Glioma / iPS / NSC / RRV / suicide gene / 遺伝子治療 |
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| Outline of Research at the Start |
悪性神経膠腫（グリオーマ）は、グリオーマ幹細胞（GSC）の存在により、強い浸潤性お
よび治療抵抗性を示す。本研究では、治療抵抗性・浸潤性GCSに追従するiPS細胞由来神経
幹細胞を、自殺遺伝子搭載複製型ウイルスの”producing cell” かつ“delivery vehicle”として用いる革新的な新規治療法を開発する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年は治療用NSCに対するRRVの感染速度が遅い問題を解決するために、NSCの培養方法を比較し、ラミニンコートによる接着培養が効果的であると確認した。この培養方法によりNSCの増殖速度も格段に速くなるため、治療用細胞製剤の大量培養の問題解決にも繋がる。
また、RRVが腫瘍に感染すると腫瘍細胞が発光するin vivoウイルス感染モニタリング技術を確立した。それによりグリオーマモデルマウスに対してRRVを直接投与するよりも、CD-RRV-human NSCを投与した方が腫瘍のより広域にRRVが感染することを確認した。
治療効果に関しても、ヒトグリオーマモデルマウスに対してCD-RRV-human NSCを移植し、5-FCを投与する事で高い抗腫瘍効果を発揮することを確認した。
さらに、様々な細胞株（肺がん：A549、膵がん：Panc-1、胃がん：MKN-7、肝臓がん：HepG2、乳がん：MCF-7、繊維肉腫：HT1080）にCD-RRVが感染して自己複製すること及び5-FC投与で死滅することを確認し、その他の悪性・難治性腫瘍にも適応拡大可能であることを示せた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
RRV単独よりもRRV-NSCを投与した方が脳腫瘍のより広域にRRVが感染することを確認し、NSCがRRVのDelivery vehicleとして有用であることをin vivoで確認できた。また、CD-RRV-NSCが生産したRRVがグリオーマモデルマウスで高い抗腫瘍効果を発揮すること、その他の悪性・難治性腫瘍にも適応拡大可能であることも示せた。
現在、RRVが脳腫瘍全体へ感染するために必要なCD-RRV-NSCの投与細胞数の条件検討に移っており、おおむね順調に進展しているといえる。
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| Strategy for Future Research Activity |
１. CD-RRV-NSCの脳腫瘍に対するDelivery vehicleの有効性を比較
GC株(U87)及びGSC株(hG008) をそれぞれ線条体に移植したヒトグリオーマモデルマウスに対してCD-RRV-human NSCを対側に移植し、遠方の腫瘍に対するRRVの感染を確認する。３色の蛍光タンパク質、３色の発光タンパク質、全脳透明化技術を用いることで、脳腫瘍に対するNSCのDelivery vehicleとしての有効性をin vivoイメージングデータと全脳３D画像データにより比較する。
2. グリオーマモデルマウスにおけるCD-RRV-human NSC投与量の検討
ヒトグリオーマモデルマウスに対して異なる細胞数でCD-RRV-human NSCを移植し、腫瘍全体にRRVが感染しているかを全脳透明化技術および3Dイメージングにより確認する。全ての腫瘍が赤色蛍光＋赤色発光で、RRVが感染した腫瘍はさらに緑色蛍光＋緑色発光で観察できるように設計されている。
３. グリオーマモデルマウスにおけるCD-RRV-human NSCの治療効果及び安全性の評価
ヒトグリオーマモデルマウスに対して異なる細胞数でCD-RRV-human NSCを移植し、5-FCを投与することで脳腫瘍に対する治療効果を評価する。投与する細胞数、5-FCの投与量などの条件を検討する。
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Report
(2 results)
Research Products
(4 results)
