味蕾におけるカドヘリンファミリーの局在と機能および味覚障害との関連
Project/Area Number |
21K11731
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 59040:Nutrition science and health science-related
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Research Institution | Fukuoka Women's University |
Principal Investigator |
濱田 俊 福岡女子大学, 国際文理学部, 教授 (60282349)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
生田 李緒 福岡女子大学, 国際文理学部, 助手 (90853557)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2022: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
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Keywords | 味蕾 / カドヘリン / 細胞接着分子 / シナプス形成 |
Outline of Research at the Start |
味蕾は100個前後の細胞を含むが、細胞は常に入れ替わっている。味細胞に接続する神経は、細胞の入れ替わりに伴って適切な味細胞を選び、新たに神経結合を作る必要がある。我々は、この過程に細胞膜同士を接着させるタンパク質、カドヘリンが関与する可能性を検討する。味細胞は2種類に大別され、それぞれに特徴的に出現するカドヘリンについて、出現の仕方や機能阻害が味細胞の神経結合にどのような影響を及ぼすのか検討する。
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Outline of Annual Research Achievements |
【味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスの作成と解析】味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスは、味蕾細胞で強く発現するケラチン8遺伝子の発現調節領域の制御下でタモキシフェン投与によりN-カドヘリン遺伝子を不活性化できるマウスである。前年度の予備実験でこのマウスを用いて遺伝子組換えを起こさせるためには、タモキシフェンの投与量、回数などを再検討する必要があることがわかった。そこで本年度は、味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスの作成に利用したケラチン8-Cre/ERT2マウスをCreによるDNA組換え活性のレポーターマウスであるAi14マウスと交配し、タモキシフェンの投与を行い、タモキシフェンの投与量、回数などを決定した。また、次年度の本実験に向けてケラチン8-Cre/ERT2、floxed N-カドヘリン、Creレポーターを有するマウスを交配により作成中である。 【Ⅱ型細胞の分化とNカドヘリンの発現との関係】 前年度の解析方法には問題があったため、今年度は再度実験を実施した。当初の仮説では、シナプス形成前の幼若なⅡ型細胞はPLCβ2が弱く、N-カドヘリンは強く発現し、その後N-カドヘリンの接着活性によりシナプスが形成されるとPLCβ2の発現が増加し、N-カドヘリンの発現は低下するのではないかと考えた。今回の結果では、Ⅱ型細胞に分化するとN-カドヘリンの発現は低いまま、PLCβ2の発現が先に増加し、最終分裂から10.5日以降の成熟したと考えられるⅡ型細胞でN-カドヘリンの発現が増加することが示唆され、仮説を支持する結果とはならなかった。 【亜鉛欠乏マウスにおけるカドヘリンの局在】 亜鉛欠乏飼料及び対照飼料を4週間投与したマウスの有郭乳頭味蕾におけるN-カドヘリン、T-カドヘリンの局在を検討した。その結果、亜鉛欠乏群、対照群との間で両者の局在様式に大きな違いは認められなかった。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定通り次年度には目的とする遺伝子改変マウスが得られ、N-カドヘリンの喪失によりⅡ型細胞シナプスにどのような異常がみられるか検討できる見込みであるため。その他当初予定していた検討事項も概ね完了している。
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Strategy for Future Research Activity |
Cre活性のレポーター遺伝子を導入した味蕾細胞Nカドヘリン遺伝子欠損マウスが2023年度には利用できるので、これによりN-カドヘリンの発現低下がⅡ型細胞のシナプス形成・維持に何らかの影響を与えるのかどうか検討する。
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Report
(2 results)
Research Products
(4 results)