| Project/Area Number |
22K11724
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 59040:Nutrition science and health science-related
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
引地 俊文 金沢大学, 医学系, 協力研究員 (20846240)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 靖彦 金沢大学, 医学系, 教授 (20313637)
木村 久美 金沢大学, 医学系, 助教 (60409472)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2023: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
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| Keywords | 骨粗鬆症 / メチルグリオキサール / 糖尿病 / 糖尿病性骨粗鬆症 / イメージング / 骨芽細胞 / 破骨細胞 |
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| Outline of Research at the Start |
本研究の目的は、申請者独自の蛍光プローブを用いたイメージング手法により 細胞内のMGを可視化・定量化し、糖尿病状態で過剰となるMGの骨系統細胞機能への作用とそ の分子基盤を解明する。さらにMGの消去による糖尿病性骨粗鬆症の予防効果をMG消去酵素（Glo1）を過剰発現させることで明らかとし、新規治療法を開発する基盤をつくることである。
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| Outline of Annual Research Achievements |
マウス頭蓋冠由来骨芽細胞およびマウス骨髄血由来破骨細胞に対して、メチルグリオキサール（MG）反応性蛍光センサープローブを用いて細胞内MG産生の評価を行った。siRNAを用いてMGを消去する酵素であるGlyoxalase1をノックダウンすることで、MGが細胞内で増加することを時間依存的シグナルを評価することで確認することに成功した。また、解糖系代謝酵素であるGAPDHをsiRNAで阻害することで、Glyoxalase1をコードする遺伝子であるGlo1の発現が増加する可能性がRT-PCRで明らかとなった。これは、高血糖によるGAPDHの不活化によるMGの著増に反応してGlo1の発現が増加するというフィードバック機構を反映するものである可能性がある。さらに代謝を抑制することによる影響も検討している。
本年度は、マウスにおいてストレプトゾトシンを投与することで1型糖尿病性骨粗鬆症モデルマウスを作成し、その骨パラメーターと遺伝子発現を評価した。BMDは有意に減少していたが、Glo1の発現には有意な差は認められなかった。本年度はさらにn数を増やして検討を継続しており、同様な傾向を認めている。
温度変化による代謝抑制に対するMGの産生低下も細胞内で確認できた。また、ストレプトゾトシン投与マウスにおける骨粗鬆症モデルをμCTにて評価を継続している。Glo1過剰発現マウスの作成も継続しており、作成次第、in vivoでの検討を進める予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
GLO1ノックダウンのマウス作成に難渋している。他の研究については順当に進行しており、やや遅れているとした。
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| Strategy for Future Research Activity |
GLO1 ノックアウトマウスの作成を継続しつつ、T1DMマウスでの骨代謝やMGの関与についてより詳細に評価を行う。次年度の予算はマウスや研究物品の購入費、研究成果の発表のための旅費、論文作成のための費用として使用する。
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