生体膜の疎水性領域を可視化する新規凍結割断レプリカ標識法の開発
Project/Area Number |
22K19252
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Research Category |
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Review Section |
Medium-sized Section 42:Veterinary medical science, animal science, and related fields
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Research Institution | Kagoshima University |
Principal Investigator |
藤田 秋一 鹿児島大学, 農水産獣医学域獣医学系, 教授 (60282232)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
正谷 達謄 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (70614072)
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Project Period (FY) |
2022-06-30 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,990,000 (Direct Cost: ¥2,300,000、Indirect Cost: ¥690,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,510,000 (Direct Cost: ¥2,700,000、Indirect Cost: ¥810,000)
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Keywords | 微細局在 / 脂肪酸 / ナノスケール / 電子顕微鏡 / フリーズフラクチャー / 多価不飽和脂肪酸 |
Outline of Research at the Start |
本研究では急速凍結・凍結割断レプリカ標識(QF-FRL)法を改良することにより、新規凍結割断レプリカ標識法を開発し、今まで困難であった膜脂質の疎水性領域である各種脂肪酸の微細分布の解析を可能にすることを目的とする。近年、不飽和脂肪酸(UFA)の生体内での増加が発癌、癌転移、精神疾患、インスリン抵抗性の改善など種々の生理及び病理機能に関与することがわかってきた。UFAが、どのように細胞に作用して機能関与するのかなど作用機序は全く不明である。新規凍結割断レプリカ標識法を開発することにより、世界に先駆けて、UFAがもたらす生理的作用の機序解明の基礎的情報を獲得できると確信する。
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Outline of Annual Research Achievements |
光学顕微鏡を用いた各種アルキン化脂肪酸の可視化を酵母細胞および哺乳類培養細胞で試みた。培養液に4時間アルキン化脂肪酸をインキュベーションした結果、脂肪酸の細胞内での局在を確認することができ、各細胞は培養液から脂肪酸を獲得し、自らの生体膜に形作るのに役立てていることが示唆できた。各種脂肪酸がそれぞれどのオルガネラ膜に局在するかは現在検討中である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の予定であった、酵母細胞および培養哺乳類細胞での各種脂肪酸の局在を光学顕微鏡で観察できた。
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Strategy for Future Research Activity |
各種脂肪酸がそれぞれ細胞内のどのオルガネラ膜に局在するのかを明らかにし、培養細胞と各種脂肪酸とをインキュベーションする時間を段階的に変化させ、各脂肪酸の局在を時間的経過を追いながら観察することにより、どの段階で細胞内に脂肪酸を取り込み、脂肪酸がどこから取り込まれ、最終的にどのオルガネラ膜に局在するのかを検討する予定である。また、消化管などの各種生体内組織での脂肪酸の局在も検討し、各種脂肪酸の生理的および病理的機能発現機序を解明する。
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Report
(1 results)
Research Products
(4 results)
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[Presentation] ヒトmalaria原虫Plasmodium falciparumでのラフト主成分の糖脂質GM3の局在2022
Author(s)
向達 汐美, 正谷 達謄, 小西 里可子, 黒川 夕奈, 山口 優希, 富奥 甘奈, 福田 佳代子, ハキミ ハッサン, 麻田 正仁, 金子 修, 藤田 秋一
Organizer
第96回 日本生化学大会
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