植物膜タンパク質のユビキチン修飾と機能発現制御機構の解明

• Project Area: New aspect of the ubiquitin system : its enormous roles in protein regulation
• Project/Area Number: 15H01167
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 山口 淳二 北海道大学, 理学研究院, 教授 (10183120)
• Project Period (FY): 2015-04-01 – 2017-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2016)
• Budget Amount: ¥9,490,000 (Direct Cost: ¥7,300,000、Indirect Cost: ¥2,190,000); Fiscal Year 2016: ¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000); Fiscal Year 2015: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000)
• Keywords: ユビキチンリガーゼ / 植物免疫 / 膜交通 / 植物 / 病原体受容 / 病原体受容体

Outline of Annual Research Achievements

本研究では「植物膜タンパク質のユビキチン修飾と機能発現制御機構の解明」を目指し，3研究課題に取組んでいる。H28年度は以下のような成果を得た。
植物に特有の膜局在型ユビキチンリガーゼATL遺伝子族は，標的となる膜タンパク質をユビキチン化することで，膜タンパク質の安定化，細胞内局在等の制御に関与する。また，その性質から，細胞膜を介した環境シグナルの受容・伝達制御に深く関わる。申請者は，基幹代謝制御に関与するATL31の発見以来，一貫してATL族の機能解明を進めてきた。本申請では，ATL31による細胞膜上の環境シグナル受容と伝達制御機構の全容解明を目指す。また， ATL31の膜局在性に着目し，細胞の内と外の情報受容・伝達制御にATL31がどのように関与するかについて検討した。
ATL31はユビキチンリガーゼ活性に依存的してC/N応答を制御するが，これまでの解析でATL31の細胞内局在性がユビキチンリガーゼ活性依存的に変化することを発見し，ATL31の細胞内局在性がその機能と密接に関係することが示唆されていた。ATL31のユビキチン化標的を調べ得るためIP-MS解析による相互作用因子の探索を行ったところ，SNAREタンパク質が複数同定された。SNAREタンパク質群はSANRE複合体を形成することで膜融合を促進する膜交通制御の鍵因子である。その中でもSYP61は重要で，受容体やトランスポーター，細胞壁合成装置などの様々なタンパク質の小胞を介した輸送制御の中心を担っている。興味深いことに，ATL31はこのSYP61と相互作用し，ユビキチンリガーゼ活性依存的にSYP61の細胞内局在性を変化させることを発見した。これらの結果から，ATL31がSYP61を介して膜交通に作用することでC/N応答を制御する可能性が示唆された。

Research Progress Status

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

28年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Int'l Joint Research] Max-Planck-Institute (Potsdam-Golm)(ドイツ)
• [Int'l Joint Research] University of Pisa(イタリア)
• [Int'l Joint Research] Max-Planck-Institute (Potsdam-Golm)(ドイツ)
• [Int'l Joint Research] University of Pisa(イタリア)
• [Journal Article] Direct transcriptional activation of BT genes by NLP transcription factors is a key component of the nitrate response in Arabidopsis (2017)
  • Author(s): Sato, T., Maekawa, S., Konishi, M., Yoshioka, N., Sasaki, Y., Maeda, H., Ishida, T., Kato, Y., Yamaguchi, J. and Yanagisawa, S.
  • Journal Title: Biochem. Biophys. Res. Commun. Volume: 483 Issue: 1 Pages: 380-386
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2016.12.135
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Arabidopsis CBL-interacting protein kinases regulate carbon/nitrogen-nutrient response by phosphorylating ubiquitin ligase ATL31. (2017)
  • Author(s): Yasuda S, Aoyama S, Hasegawa Y, Sato T, Yamaguchi J
  • Journal Title: Mol. Plant Volume: 10 Issue: 4 Pages: 605-618
  • DOI: 10.1016/j.molp.2017.01.005
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Characterization of ubiquitin ligase SlATL31 and proteomic analysis of 14-3-3 targets in tomato fruit tissue (Solanum lycopersicum L.) (2016)
  • Author(s): Lu Y, Yasuda S, Li X, Fukao Y, Tohge T, Femie A R, Matsukura C, Ezura H, Sato T, Yamaguchi J
  • Journal Title: Journal of Proteomics Volume: 印刷中 Pages: 254-264
  • DOI: 10.1016/j.jprot.2016.04.016
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Effect of Carbon/Nitrogen ratio on carbohydrate metabolism and light energy dissipation mechanisms in Arabidopsis thaliana (2016)
  • Author(s): Huarancca Reyes T, Scartazza A, Lu Y, Yamaguchi J, Guglielminetti L
  • Journal Title: Plant Physiology and Biochemistry Volume: 印刷中 Pages: 195-202
  • DOI: 10.1016/j.plaphy.2016.04.030
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] ABI1 regulates carbon/nitrogen-nutrient signal transduction independent of ABA biosynthesis and canonical ABA signalling pathways in Arabidopsis (2015)
  • Author(s): Lu, Y. et al.
  • Journal Title: Journal of Experimental Botany Volume: 66 Issue: 9 Pages: 2763-2771
  • DOI: 10.1093/jxb/erv086
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The <i>Arabidopsis</i> ubiquitin ligase <i>ATL31</i> is transcriptionally controlled by WRKY33 transcription factor in response to pathogen attack (2015)
  • Author(s): Huarancca Reyes T, Maekawa S, Sato T, Yamaguchi J
  • Journal Title: Plant Biotechnology Volume: 32 Issue: 1 Pages: 11-19
  • DOI: 10.5511/plantbiotechnology.14.1201b
  • NAID: 130005061605
  • ISSN: 1342-4580, 1347-6114
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Pale-green phenotype of atl31 atl6 double mutant leaves is caused by disruption of 5-aminolevulinic acid biosynthesis in Arabidopsis thaliana (2015)
  • Author(s): Maekawa S, Takabayashi A, Huarancca Reyes T, Yamamoto H, Tanaka A, Sato T and Yamaguchi J
  • Journal Title: PLoS ONE Volume: 10 Issue: 2 Pages: 1-14
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0117662
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] AtCCR4a and AtCCR4b are involved in determining the poly(A) length of granule-bound starch synthase 1 transcript and modulating sucrose and starch metabolism in Arabidopsis thaliana (2015)
  • Author(s): Yuya Suzuki, Toshihiro Arae, Pamela J. Green, Junji Yamaguchi and Yukako Chiba
  • Journal Title: Plant and Cell Physiology Volume: 印刷中 Issue: 5 Pages: 863-874
  • DOI: 10.1093/pcp/pcv012
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Integration of C/N-nutrient and multiple environmental signals into the ABA signaling cascade (2015)
  • Author(s): Lu Y., Yamaguchi J. and Sato T.
  • Journal Title: Plant Signaling & Behavior Volume: 12 Issue: 12 Pages: e1048940-e1048940
  • DOI: 10.1080/15592324.2015.1048940
  • Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
• [Remarks] 形態機能学講座IIaのホームページ
  • URL: http://www.sci.hokudai.ac.jp/CSF2-web/
• [Patent(Industrial Property Rights)] 不定根発生誘導剤及び根系発達促進剤特許 (2016)
  • Inventor(s): 山口淳二，眞木祐子，副島洋，谷野圭持，綿引雅昭，佐藤長緒
  • Industrial Property Rights Holder: 山口淳二，眞木祐子，副島洋，谷野圭持，綿引雅昭，佐藤長緒
  • Industrial Property Rights Type: 特許
  • Filing Date: 2016-03-25