2009 Fiscal Year Annual Research Report
活性酸素シグナル受容体蛋白質の分子制御:蛋白質S―グアニル化プロテオミクス
| Project Area | Signaling functions of reactive oxygen species |
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| Project/Area Number |
20117005
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
赤池 孝章 Kumamoto University, 大学院・生命科学研究部, 教授 (20231798)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤 智裕 熊本大学, 大学院・生命科学研究部, 准教授 (30284756)
岩井 純夫 鹿児島大学, 農学部, 教授 (50295276)
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| Keywords | 活性酸素 / シグナル伝達 / プロテオミクス / 酸化ストレス / 生理活性 |
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| Research Abstract |
活性酸素シグナル伝達の分子機構は充分理解されていない。活性酸素・NOは、その最も上流に位置する分子群であるが、シグナル伝達機構の詳細(例えば、センサーと直接反応するのか?あるいは、二次メッセンジャーの生成をもたらすのか?など)は、これまでほとんど分かっていなかった。本申請者らは最近、生体の酸化ストレスに対する適応応答のシグナル伝達に関与するNOの全く新しい二次メッセンジャーである8-nitro-cGMPを発見した(Nature Chem Biol 2007)。本年度は、8-nitro-cGMPの高感度定量解析法の開発を行った。タンデム質量分析法とあわせて安定同位体ラベルした内部標準を用いることにより、細胞内における8-nitro-cGMPを再現性良く定量することに成功した。その結果、従来NOの下流シグナルとして知られていたcGMPを凌駕するレベルの8-nitro-cGMPが生成することが明らかとなった。現在、8-nitro-cGMPの様々な細胞・組織における生成プロファイルならびに生成メカニズムの解析を鋭意進めている。さらに、8-nitro-cGMPによる新しい蛋白質翻訳後修飾であるcGMP付加体形成(蛋白質S-グアニル化)について、質量分析に基づくプロテオミクス(蛋白質S-グアニル化プロテオミクス)を開発した。現在、本手法によるミトコンドリアにおける標的蛋白質の網羅的解析を行うとともに、蛋白質S-グアニル化がもたらす機能修飾についても解析を進めている。
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