1990 Fiscal Year Annual Research Report

家畜の抗病性品種作出に関する分子生物学的基礎研究

Research Project

Project/Area Number	01440017
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	波岡茂郎北海道大学, 獣医学部, 教授 (10002297)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	林正信北海道大学, 獣医学部, 助教授 (10130337) 笠井憲雪北海道大学, 医学部, 助教授 (60001947) 田口文広国立精神センター, 神経研究所・モデル開発部, 室長 (30107429) 喜田宏北海道大学, 獣医学部, 助教授 (10109506) 橋本信夫北海道大学, 獣医学部, 教授 (60082103)
Keywords	トランスジェニック動物 / アンチセンスRNA / ウイルス抵抗性 / マウス肝炎ウイルス / ヌクレオチソキャプシドタンパク質 / 分子生物学 / 家畜
Research Abstract	本研究は、ウイルスの増殖に必要な遺伝子に対するアンチセンスRNAを発現するトランスジェニック動物を作製し、当該ウイルス抵抗性品種の作出に関して検討することを目的としている。今年度は以下のような結果を得た。1.昨年度マウス肝炎ウイルス(MHV)のヌクレオキャプシドタンパク質(Nc)の遺伝子に対して、アンチセンスRNAを発現するベクタ-を受精卵に導入して得た数十匹の産仔の内、サザンブロット法によって導入遺伝子が組み込まれていることが確認された産仔(Fo)について、F_1、F_2を得、導入した遺伝子が安定に子孫に伝達されているか否かを検討した。その結果、導入した遺伝子を安定に伝達するいくつかの家系を得た。しかし、Foマウスでは、複数(数十コピ-)の導入遺伝子が確認されたにもかかわらず、F_1へ伝達されない場合もみられ(マウス白血病ウイルスのLTRを使用した場合)、導入した遺伝子DNAの性質が、子孫への安定な伝達に影響を与えることが示唆された。現在、家系が確立されたトランスジェニックマウスについて、当該遺伝子の発現をノ-ザンブロット法によって、確認を行っている。2.MHVゲノムは一本鎖ポジティブRNAであるが、複製転写の過程で、ネガティブ鎖を生じる。したがって、mRNAに対するアンチセンスRNAだけでなく、ネガティブRNA鎖に対するセンスRNAでもMHVの増殖抑制がおこる可能性を考え、Ncに対するセンスRNAの効果を検討した結果、MHVの増殖抑制がおこることが示され、MHVの複製機構についても検討を行っている。3.マレック病ウイルス(MDV)の腫瘍維持に関連していると考えられる遺伝子に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドの処理によって、MDV由来リンパ腫株化細胞の無限増殖や悪性形質転換能が抑制されることを示し、アンチセンスRNAでのウイルス遺伝子の発現抑制が有効な方法であることを示した。

Research Products

(14 results)

All Other

All Publications (14 results)

[Publications] Sasaki,Y: "Restriction fragment length polymorphism for Yc subunit gene of rat liver glutathione Sーtransferase." Jpn.J.Vet.Res.38. 35-42 (1990)
[Publications] Nakamura,K.: "A unique region of Marek's disease virus DNA in a virusーnonproductive lymphoblastoid cell line,MDCCーRP1." Jpn.J.Vet.Sci.52. 1341-1345 (1990)
[Publications] Kawamura,M.: "The inhibitory effects by oligonucleotide complementary to Marek's disease virus mRNA transcribed from BamHIーH region on the proliferation of transformed lymphoblastoid cells,MDCCーMS1." J.Gen.Virol.(1991)
[Publications] Cavanagh,D.: "Recommendation of the coronavirus study group for the nomenclature of the structural proteins,mRNAs,and genes of coronaviruses." Virology. 176. 306-307 (1990)
[Publications] Cavanagh,D.: "Reviced nomenclature for coronavirus structural proteins,mRNAs and genes." Exp.Med.Biol.276. (1991)
[Publications] Taguchi,F.: "Expression of the spike proteins of murine coronavirus JHMV using baculovirus vectors." Exp.Med.Biol.276. (1991)
[Publications] Takaseーyoden,S.: "Localization of neutralizing epitopes on the S1 polypeptide of the murine coronavirus peplomer glycoprotein." Virus Res.(1991)
[Publications] Matsubara,Y.: "Neurovirulence of six different murine coronavirus JHMV variants for rats." Virus Res.(1991)
[Publications] Takashima,I.: "Biotinylated protein A in immunoassay." Methods Enzymol.184. 497-500 (1990)
[Publications] Sawa,T.: "Pathology of experimental chlamydosis in chicks." Jpn.J.Vet.Sci.52. 275-283 (1990)
[Publications] Kasai,N.: "Clinicoーpathological studies of LEC rats with hereditary hepatitis and hepatoma in the acute phase of hepatitis." Lab.Anim.Sci.40. 502-505 (1990)
[Publications] Pan,T.M.: "Heat and ozone resistance of Bacillus spores isolated from laboratory animals." Exp.Anim.39. 371-376 (1990)
[Publications] 笠井憲雪: "感染・特殊実験飼育室の改修と管理" アニテックス. 2. 47-51 (1990)
[Publications] 遠藤幸夫: "実験的奇形作出研究における受精卵移植技術の応用" J.Exp.Anim.Technol.25. 110-114 (1990)

1990 Fiscal Year Annual Research Report

家畜の抗病性品種作出に関する分子生物学的基礎研究

Principal Investigator

波岡 茂郎 北海道大学, 獣医学部, 教授 (10002297)

Research Products

[Publications] Sasaki,Y: "Restriction fragment length polymorphism for Yc subunit gene of rat liver glutathione Sーtransferase." Jpn.J.Vet.Res.38. 35-42 (1990)

[Publications] Nakamura,K.: "A unique region of Marek's disease virus DNA in a virusーnonproductive lymphoblastoid cell line,MDCCーRP1." Jpn.J.Vet.Sci.52. 1341-1345 (1990)

[Publications] Kawamura,M.: "The inhibitory effects by oligonucleotide complementary to Marek's disease virus mRNA transcribed from BamHIーH region on the proliferation of transformed lymphoblastoid cells,MDCCーMS1." J.Gen.Virol.(1991)

[Publications] Cavanagh,D.: "Recommendation of the coronavirus study group for the nomenclature of the structural proteins,mRNAs,and genes of coronaviruses." Virology. 176. 306-307 (1990)

[Publications] Cavanagh,D.: "Reviced nomenclature for coronavirus structural proteins,mRNAs and genes." Exp.Med.Biol.276. (1991)

[Publications] Taguchi,F.: "Expression of the spike proteins of murine coronavirus JHMV using baculovirus vectors." Exp.Med.Biol.276. (1991)

[Publications] Takaseーyoden,S.: "Localization of neutralizing epitopes on the S1 polypeptide of the murine coronavirus peplomer glycoprotein." Virus Res.(1991)

[Publications] Matsubara,Y.: "Neurovirulence of six different murine coronavirus JHMV variants for rats." Virus Res.(1991)

[Publications] Takashima,I.: "Biotinylated protein A in immunoassay." Methods Enzymol.184. 497-500 (1990)

[Publications] Sawa,T.: "Pathology of experimental chlamydosis in chicks." Jpn.J.Vet.Sci.52. 275-283 (1990)

[Publications] Kasai,N.: "Clinicoーpathological studies of LEC rats with hereditary hepatitis and hepatoma in the acute phase of hepatitis." Lab.Anim.Sci.40. 502-505 (1990)

[Publications] Pan,T.M.: "Heat and ozone resistance of Bacillus spores isolated from laboratory animals." Exp.Anim.39. 371-376 (1990)

[Publications] 笠井 憲雪: "感染・特殊実験飼育室の改修と管理" アニテックス. 2. 47-51 (1990)

[Publications] 遠藤 幸夫: "実験的奇形作出研究における受精卵移植技術の応用" J.Exp.Anim.Technol.25. 110-114 (1990)

波岡茂郎北海道大学, 獣医学部, 教授 (10002297)

[Publications] 笠井憲雪: "感染・特殊実験飼育室の改修と管理" アニテックス. 2. 47-51 (1990)

[Publications] 遠藤幸夫: "実験的奇形作出研究における受精卵移植技術の応用" J.Exp.Anim.Technol.25. 110-114 (1990)