1990 Fiscal Year Annual Research Report

植物病原糸状菌への遺伝子導入と形質転換ベクタ-系の開発

Research Project

Project/Area Number	01560057
Research Institution	Kinki University
Principal Investigator	豊田秀吉近畿大学, 農学部, 助教授 (00150805)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	松田克礼近畿大学, 農学部, 研究生吉田元信近畿大学, 食品科学研究所, 講師 (80192425)
Keywords	トマト萎凋病菌 / リボゾ-ムRNA遺伝子 / 相同組換え / in situ検出 / 細胞壁構造 / 固型NMR / キチンーキトサン複合系 / キケン分解性放線菌
Research Abstract	本研究では,植物病原菌としてトマトの萎凋病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici)を使用し,本菌における発現ベクタ-を完成した。すなわち,本菌の染色体からリボゾ-ムRNAをコ-ドする遺伝子を分離し,それを薬剤検定マ-カ-遺伝子の上流および下流域に接続した。このようにして作製したベクタ-を使用すれば,本研究で分離した遺伝子と相同な部位が,病原菌染色体上に多数存在することから,容易にかつ効果的に導入遺伝子との組換えをひき起こすことが可能となる。また,今回分離した遺伝子は他の病原糸状菌のリボゾ-ムRNA遺伝子とも高い相同性を示すことから,多くの病原菌の適用が可能であった。一方,本遺伝子は単にその染色体導入を可能にするだけではなく、その発現検出にも有効に利用できることが証明された。すなわち,この遺伝子を標識してプロ-ブに使用することで,細胞内における遺伝子発現を直接同定することに成功した。以上の結果は,論文にまとめ,現在日本農芸化学会誌に投稿中である。病原菌におけるベタタ-系の開発は,上記の目的に加え,本研究の最終目標でもある病害防除にも有効に利用できる。病原菌が伸長する際には,その細胞壁の合成が必要であるが,その際に細胞型成分が分泌され,宿主植物にシグナルを与え,植物の抵抗反応を誘導もしくは抑制すると考えられている。そこで本菌の細胞壁を固型NMR法で分析し,その主要成分がキチンーキトサンから成ることを明らかにした。このような事実から,本菌の防除・抑制にはキチン分解酵素が有効であると考え,キチン分解性放線菌を分離するとともに,その生産遺伝子をクロ-ニングし,塩基配列を決定した。これらの結果の一部は、日本農芸化学誌に公表した。また他の一部については米国微生物学会誌に投摘中である。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 豊田秀吉: "培養カルス系による耐病性植物の選抜" 化学と生物. 28. 12-19 (1990)
[Publications] 豊田秀吉・堀越浩二・稲葉幸司・大内成志: "Plant Regeneration of callus tissues mduced from leaf explants of strawberry" 植物組織培養. 7. 38-41 (1990)
[Publications] 深溝慶・園田浩二・豊田秀吉・大内成志・後藤幸男: "Solid state ^<13>CーNMR analysis of cell wall components of Fusarium oxysporum" Agric.Biol.Chem.54. 2761-2762 (1990)
[Publications] 豊田秀吉: "野菜の培養変異と育種への利用" バイオホルティ-. 4. 9-14 (1990)
[Publications] 豊田秀吉・山家高子・松田克礼・大内成志: "Transient expression of the βーgluculonidase gene introduced into barley coleoptile cells by microinjection" Plant Cell Reports. 9. 299-302 (1990)
[Publications] 豊田秀吉他9名: "Callus induction and plant regeneration from barley coleoptile tissues" 植物組織培養. 7. 202-204 (1990)
[Publications] 豊田秀吉: "最新バイオテクノロジ-全書3 野菜の組織・細胞培養と育種" 農業図書, 250 (1990)
[Publications] 豊田秀吉: "植物病害と遺伝子工学" 朝日出版社, 225 (1989)

1990 Fiscal Year Annual Research Report

植物病原糸状菌への遺伝子導入と形質転換ベクタ-系の開発

Principal Investigator

豊田 秀吉 近畿大学, 農学部, 助教授 (00150805)

Research Products

[Publications] 豊田 秀吉: "培養カルス系による耐病性植物の選抜" 化学と生物. 28. 12-19 (1990)

[Publications] 豊田 秀吉・堀越 浩二・稲葉 幸司・大内 成志: "Plant Regeneration of callus tissues mduced from leaf explants of strawberry" 植物組織培養. 7. 38-41 (1990)

[Publications] 深溝 慶・園田 浩二・豊田 秀吉・大内 成志・後藤 幸男: "Solid state ^<13>CーNMR analysis of cell wall components of Fusarium oxysporum" Agric.Biol.Chem.54. 2761-2762 (1990)

[Publications] 豊田 秀吉: "野菜の培養変異と育種への利用" バイオホルティ-. 4. 9-14 (1990)

[Publications] 豊田 秀吉・山家 高子・松田 克礼・大内 成志: "Transient expression of the βーgluculonidase gene introduced into barley coleoptile cells by microinjection" Plant Cell Reports. 9. 299-302 (1990)

[Publications] 豊田 秀吉他9名: "Callus induction and plant regeneration from barley coleoptile tissues" 植物組織培養. 7. 202-204 (1990)

[Publications] 豊田 秀吉: "最新バイオテクノロジ-全書3 野菜の組織・細胞培養と育種" 農業図書, 250 (1990)

[Publications] 豊田 秀吉: "植物病害と遺伝子工学" 朝日出版社, 225 (1989)

豊田秀吉近畿大学, 農学部, 助教授 (00150805)

[Publications] 豊田秀吉: "培養カルス系による耐病性植物の選抜" 化学と生物. 28. 12-19 (1990)

[Publications] 豊田秀吉・堀越浩二・稲葉幸司・大内成志: "Plant Regeneration of callus tissues mduced from leaf explants of strawberry" 植物組織培養. 7. 38-41 (1990)

[Publications] 深溝慶・園田浩二・豊田秀吉・大内成志・後藤幸男: "Solid state ^<13>CーNMR analysis of cell wall components of Fusarium oxysporum" Agric.Biol.Chem.54. 2761-2762 (1990)

[Publications] 豊田秀吉: "野菜の培養変異と育種への利用" バイオホルティ-. 4. 9-14 (1990)

[Publications] 豊田秀吉・山家高子・松田克礼・大内成志: "Transient expression of the βーgluculonidase gene introduced into barley coleoptile cells by microinjection" Plant Cell Reports. 9. 299-302 (1990)

[Publications] 豊田秀吉他9名: "Callus induction and plant regeneration from barley coleoptile tissues" 植物組織培養. 7. 202-204 (1990)

[Publications] 豊田秀吉: "最新バイオテクノロジ-全書3 野菜の組織・細胞培養と育種" 農業図書, 250 (1990)

[Publications] 豊田秀吉: "植物病害と遺伝子工学" 朝日出版社, 225 (1989)