1990 Fiscal Year Annual Research Report
ヒト型精子不動化抗体特異的抗イディオタイプ抗体の作製と避妊ワクチンへの応用
Project/Area Number |
01571238
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Research Institution | Hyogo Medical University |
Principal Investigator |
繁田 実 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (80122315)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
辻 芳之 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (60148658)
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Keywords | 抗イディオタイプ抗体 / ワクチン / 抗精子抗体 |
Research Abstract |
ヒト型精子不動化抗体(H6ー3C4)をマウスの免疫し、得られた抗血清をイディオタイプの異なるヒトIgMにて吸収し精製した抗イディオタイプ抗血清はH6ー3C4とH6ー3C4のclass switched IgG_1抗体(Enー46)に特異的であったので、これをKLHに1:1で結合させ、アジュバントと共にBalb/cマウス、SD系ラット、ラビットにそれぞれ免疫し、抗々イディオタイプ抗体が産生されるか否かをヒト精子を用いた精子不動化試験にて測定した。マウスにおいてはキャリア-として用いたKLHに対する抗体は産生されたが、ヒト精子に対する不動化抗体は産生されなかった。ラットではKLH結合抗イディオタイプ抗体(AB2ーKLH)で精子不動化抗体価(SI_<50>)は11であり、KLH免疫では、精子不動化抗体は検出されなかった。ラビットでもAB2ーKLHでSI_<50>が122であるのに対し、KLH免疫ではSI_<50>は14であった。精子不動化抗体(AB1)に対する抗イディオタイプ抗体(AB2)を抗原として免疫し、抗々イディオタイプ抗体(AB3)が産生されたことにより、このAB2がヒトにおいても精子不動化抗体の対応抗原として使用できる可能性が証明できた。AB2Hを産生することが確認されたH6ー3C4免疫マウスの脾細胞を採取し、マウスミエロ-マ細胞NSー1と細胞融合しAB2産生ハイブリド-マを作製した。免疫に用いたH6ー3C4及びEn46に反応し、イディオタイプの異なるヒトIgMや、ヒトIgG_1には反応しない4種のモノクロ-ナル抗体が得られた。このうち3種においてEn46の精子不動化活性が中和されたが、H6ー3C4のそれは中和されなかった。現在この解離共を分析中である。H6ー3C4とEn46に共通するイディオタイプに反応するAB2が目的とする抗体であるので、現在新たにH6ー3C4に対するAB2抗体産生ハイブリド-マの作製を続けている。
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