1990 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
02304020
|
|---|
| Research Institution | Nagoya University |
|---|
Principal Investigator |
山下 興亜 名古屋大学, 農学部, 教授 (50023411)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 正彦 東京大学, 農学部, 教授 (60162020)
古賀 克己 九州大学, 農学部, 教授 (40038261)
泉 進 東京都立大学, 理学部, 助手 (10145659)
佐々木 卓治 名古屋大学, 農学部, 助手 (20023492)
前川 秀彰 国立予防衛生研究所, 技術部, 室長 (60100096)
|
|---|
| Keywords | 家蚕 / 卵特異タンパク質 / 貯蔵タンパク質 / プロテア-ゼインヒビタ- / ソルビト-ルデヒドロゲナ-ゼ / イニシアトリン |
|---|
| Research Abstract |
カイコの卵特異タンパク質のcDNAをプロ-ブに用いて遺伝子のスクリ-ニングを行い,3個のクロ-ンを得た。塩基配列を2000個以上を決めた。5'側の上流域に6〜8塩基の特異的な配列,ホルモン受容体結合配列,卵包細胞指定配列、が認められ、本遺伝子の発現調節に与っていると推察した。
血清タンパク質とりわけ30KDaタンパク質ー1については遺伝子の構造が明らかにされた。このタンパク質はミクロビテリンと高い相同性を有していた。血中に一時的に蓄積される貯蔵タンパク質の遺伝子構造も明らかにされた。5'上流域にはホルモン受容タンパク質結合配列も存在しており、ホルモンによる発現調節が示唆された。
プロテア-ゼインヒビタ-は生体防御の面からも注目されるようになり、プロテア-ゼ研究とならんで重要性が確認されてきている。カイコの体液中には大別して2型6種類のインヒビタ-が存在していた。このうちアンチトリプシンの完全鎖長cDNAをクロ-ンし,またアンチキモトリプシンインヒビタ-についても部分鎖長cDNAを得た。得られたアミノ酸配列を他の動物のものと比較したところ,C末端側にのみそれぞれの分子の特異性が認められた。
NADーソルビト-ルデヒドロゲナ-ゼに対する抗体を得,脂肪体mRNAを用いてeDNAライブラリ-を作成し,全鎖長のcDNAクロ-ンを得た。アミノ酸配列は哺乳動物の肝臓ソルビト-ルデヒドロゲナ-ゼのものとよく類似していた。
イニシアトリンを精製し,その特異抗体を作成した。また種々の外来遺伝子の導入のために初期発生卵への注射方法を検討し,注射時期ならびに注射後の保護方法を確立した。
|
-
[Publications] Yoshimi,T.,Furusawa,T.and Yamashita,O.: "Localization of Cl in the egg of the silkworm,<Bombyx mori>___ー,treated with HCl." Journal of Sericultural Science. 59. 14-21 (1990)
-
[Publications] Chen,Y.L.and Yamashita,O.: "Nonselective uptake of different 30kDa plasma proteins by developing ovaries of the silkworm,<Bombyx>___ー <mori>___ー." Journal of Sericultural Science. 59. 202-209 (1990)
-
[Publications] Yaginuma,T.,Kobayashi,M.and Yamashita,O.: "Effects of low temperatures on NADーsorbitol dehydrogenase activity and morphogenesis in nonーdiapause eggs of the silkworm,<Bombyx>___ー <mori>___ー" Comparative Biochemistry and Physiology. 97B. 495-506 (1990)
-
[Publications] Fujiwara,Y.and Yamashita,O.: "Purification,characterization and developmental changes in the titer of a new larval serum protein of the silkworm,<Bombyx>___ー <mori>___ー." Insect Biochemistry. 20. 751-759 (1990)
-
[Publications] Ikeda,M.,Sasaki,T.and Yamashita,O.: "Purification and characterization of proteases responsible for vitellin degradation of the silkworm,<Bombyx>___ー <mori>___ー." Insect Biochemistry. 20. 725-734 (1990)
-
[Publications] Sasaki,T.,Kohara,A.,Takagi,H.and Shimidzu,T.: "Limited proteolysis of silkworm antitrypsin by several proteases." Agricultural and biological Chemistry. 54. 131-137 (1990)
